Способ получения силибинина Советский патент 1989 года по МПК C07D407/02 

. 1456013

ной полости или употреблении лекарст- например хлорпромазина, хлороквина венных средств, влияющих на печень, или аспарагиназы.

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения силибинина - средства для лечения печени. Цель изобретения - получение целевого силибинина без примеси его изомера - изосилибина. Процесс ведут переработкой высушенных, плодов растения Silubun marianym L. Gaerth. Способ включает следукщие стадии: отделяют основное; количество жирного масла за счет разрушения клеток плодов под действием высокого механического давлеиия; отпрессованный остаток (с содержанием 5-10% масла) зкстрагируют этилацетатом с последующей его отгонкой; полученный остаток (2% от исходного) растворяют в нижней фазе смеси метанола, воды и петролейного эфира (т.кип. 4р-60 С) при их массовом соотношении в смеси 95г5:100; для удаления хлопьевидных частиц твердого вещества раствор центрифугируют до получения прозрачной жидкости; сухой остаток подвергают противоточному многократному равномерному диспергированию в указанной системе растворителей при равном соотношении объемов верхней и нижней фаз; последнюю фазу упаривают в вакууме досуха с вьщелением коричневого порошка, т.е. 70-80%-ной смеси полиоксифенилхроманонов - силимари- нов 1-18 групп; 1 мае.ч. указанного порошка суспендируют с 0,7-1,5 мае.ч. насыщенного водой этипацетата и выдерживают суспензию в течение 1-2 сут; осадок отделяют фильтрованием, Ъромывают охлажденным насыщенным водой этилацетатом, взятым в количестве 0,07-0,15 мае.ч., сушат в вакууме при 30-50°С; полученный продукт растворяют при кипении в 30-50 мае.ч. безводного этилацетата и обрабатывают в течение 2 ч при кипении активированным углем, взятым в количестве 0,2-0,4 мас.Чо, и фильтруют; фильтрат упаривают в вакууме при 30-50°С до объема 3,33 л и к концентрату добавляют 0,5-0,8 маСоЧ. насьпценного водой этилацетата с последунлдей выдержкой 5-1.0 ч; отфильтрованный остаток суспендируют в 0,9-1,5 мае.ч. технического этилацетата, отделяют осадок и сушат в вакууме при 30-50°С с поеледукщим перемалыванием и повторным высушиванием в вакууме при 30-50°Со Полученный силибинин практически не содержит изосилибина и при лечении печени, пораженной алкоголем, в сравнении с известным плацебо превосходит последний по достигаемому эффекту (меньшее время лечения) . Кроме того, предотвращаются поражения печени при операциях брюшСО 1 ел Од со см

1

Изобретение относится к усовершенствованному способу получения силибинина, который является ценным средетврм для лечения печени.

Силибинин и лекарственные средства, которые содержат это соединение Mariendistel-Silybum marianum L. Gaerth (Carduiis marianus L.), представляют собой известное лекарственное растение Из флаволигнанов присутствующих в плодах этого растения, вьщеляют компонент, а именно силибин (силимарин 1), которьй содержит два изомера: силибинин и изосилибин. Свободный от присутствия изосилибина сипибинин обладает преимуществами по сравнению со смесью этих двух изомеров.

Цель изобретения - получение силибинина без примеси изосилибина за счёт многократной экстракции 70-80%-ной полиоксифенилхроманоно- рой смеси этиловым эфиром уксусной

кислотыо

П р и м-е р 1. А. Получение полиоксифенилхроманоновой смеси.

100 кг высушенных плодов растений Silubym marianym Gaerth на шне- ковом прессе для масляных семян под высоким давлением освобождают от основного количества жирных масел, причем получают 75-80 кг отпрессованного остатка с остаточным содержанием масла 5-10%о

80 кг отпрессованного остатка затем исчерпьшагаце экстрагируют этилацетатом. После испарения этил- ацетата получают 5-6 кг маслянисто- жирного, отчасти комковатого остатка после высушивания с содержанием биологически активного вещества 20-30%о Остаток после высушивания в количестве 2 мас.% растворяют в состоящей из метанола и воды нижней фазы смеси растворителей, состоящей из 95 мас,% метанола, 5 мае.ч. воды и 100 мае.ч. петролейного эфира (т.кип. 40-60°С), и центрифугируют

для отделения от хлопьевидных твердых веществ до получения прозрачной жидкости. Конечный объем нижней фазы составляет 300 л. Затем осуществляют многократное равномерное диспергирование в противотоке следующим образом: шесть отдельных центрифужных сепараторов для разделения жидкость - жидкость при промежуточном

подключении по стадии эмульгирования подключаются последовательно, так, чтобы нижняя фаза проходила через верхнюю в противоположном направлении, причем (смотря по обсто5 ятельствам) в стадии эмульгирования обе фазы с целью обмена веществ эмульгируются одна в другой. В соответствующей следующей стадии отделения эмульсия снова разделяется на тя0 желую и легкую фазы.

Трубопроводы расположены так, что отделенная верхняя фаза противотоком к нижней фазе попадает в соответствующий предшествующий этап эмульгирования и .

Сначала верхнюю и нижнюю фазы указанной тройной смеси растворителей непрерывно одну против другой подводят в батарею для диспергиро0 вания без нагрузки веществом, причем устанавливается фазовое равновесие. В протекающую нижнюю фазу после этого непрерьдано вводят верхний 2%-ньй раствор вещества. При подпитке на 35 входе нижней фазы необходимо, чтобы соотношение общего количества протекающих объемов верхней фазы к нижней не изменялось и оставалось равным 1:1.

40 Скорость протекания обеих фаз зависит далее от степени действия эмульсионного агрегата и разделений. Оптимальное установление можно определять гравиметрически путем коли- 45 чественных определений величин перехода веществ.

Вытекающая из батареи для диспергирования нижняя фаза (примерно

5

300 л) под давлением 20 мм доводится досуха, причем получают 3,1 кг окрашенного от бежевого вплоть до коричневого цвета порошка, который состоит на 70-80% из полиоксифенил- хроманоновой смеси, представлянщей смесь силимаринов I-1V (силимарин I-IV сштимарин I-IV-rpynna). Выход биологически активного вещества составляет 2,.2% в расчете на ис- ходньй материал,

Б, Получение не содержащего иэо- силибина силибинина.

500 г полученной полиоксифенип- хроманоновой смеси (70%) суспендируют в 2 кг метанола (примерно 2,53 л) и кипятят при перемешивании в течение 15 мин. Из полученного таким образом раствора спустя это время может вьшадать уже немного силибинина. Затем удаляют в вакууме 0,75-1,25 кг (примерно 0,96- 1,58 л) метанола и остаток оставляют стоять в течение 10-28 дней при комнатной температуре. Выпавший в осадок силибинин отфильтровывают и дополнительно промывают дважды по 50 мл холодным метанолом. После высушивания при в вакууме изолированный сырой силибинин очищают следующим образом: 60 г cbiporo силибинина растворяют при нагревании в 3 л технического уксусного эфира, после этого смешивают с 20 г активного угля и перемешивают следующие 2 ч в условиях кипения с обратным холодильником. Затем отфильтровьюа- ют до получения прозрачного раствора и раствор концентрируют при 50°С при пониженном давлении вплоть до примерно 250 мл о Концентрат перемешивают в течение 15 мин при применении прибора Ultra-Turrax и при перемешивании смешивают с 25 мл метанола. Затем смесь оставляют в течение ночи при комнатной температуре. Перед отсасыванием на нутч-фильтре осадившегося при этом силибинина смесь еще раз в течение 5 минут размешивают с помоп;ью аппарата iHtra- Turrax. Отсосанный на нутч-фильтре осадок дополнительно промьшают 2 раза по 50 мл уксусным эфиром и высушивают в вакуумном сушильном шкафу в течение ночи при 40 С. После этого продукт размалывают и дополнително высушивают при тех же условиях. Выход снпибинина (в расчете на силиU56013

0

5

0

5

0

5

0

5

0

бинин в сыром силибинине) 79-85% при содержании 96-98,5% силибинина в зависимости от качества сырого силибинина.

Содержание изосилибина 0,1-0,3%.

Константа диссоциации: 9,6x10 (С 4,15x10 мол/л), . 167 С. Растворимость в воде 19 мг/л при , рКа 6,42„

Пример 2„ Получение не содержащего изосилибина силибинина.

1 кг полиоксифенилхроманоновой смеси (силимарин I-IV-силимарин I-IV-rpynn, содер.70%) суспендируют в 1 л насыценного водой уксусно- то эфира в течение 3 мин с интенсивным перемешиванием. Спустя 48 ч стояния при комнатной температуре осадок отсасывают, промьтают 100 мл холодного, насыщенного водой уксусного эфира и высушивают в течение 48 ч при 40°С в вакууме. Выход этого промежуточного продукта (сьрого силибинина) составляет в зависимости от качества сырого силимарина 80-85% (в расчете на содержание силибинина в сьфом си- лимарине) при содержании 80-84%. Сырой силибинин растворяют в 40 л сухого уксусного эфира в точке кипения, кипятят,с обратньм холодильником в течение 2 ч с 360 г активного угля, отфильтровьгеают и концентрируют в вакууме при до общего объема 3330 мл. В этот раствор при интенсивном перемешивании и при комнатной температуре добавляют 667 мл насьш5ен- ного водой уксусного эфира. Спустя 1-3 ч после этого происходит кристаллизация силибинина. После стояния в течение ночи осадившийся силибинин отделяют путем отфильтровывания, дважды суспендируют с техническим уксусным эфиром, беря каждьй раз по 1200 мл, в течение 5-10 мин, снова отфильтровьшают и предварительно вы- сушивают в течение 24 ч в вакууме при 40 С. После размальшания дополнительно высушивают в течение 48 ч при 40 С в вакууме. Вькод силибинина (в расчете на силибинин в сыром силибинине) 79-85% при содержании 96- 58,5% силибинина в зависимости от качества сырого силибинина.

Содержание изосилибина 0,1-0,3%.

Данный способ позволяет получить силибинин практически без содержания изосилибина.

Клинические испытания силибинина.

В последние десятилетия чрезвычайно сильно увеличилось количество токсических повреждений печени. Наиболее частой причиной повреждения является алкоголь.

В результате контролированного изучения удалось доказать превосходство силибинина по сравнению с плацебо и другими сравниваемыми методами лечения. В двойном опыте на 66 пациентах с пораженной алкоголем печенью силибинин (п 31) испытьшали в сравнении с плацебо (п 35).

Подвергнутые статистической оценке результаты показывают, что силибинин значительно превосходит плацебо. При этом значительно сокращается время выздоровления по сравнению с плацебо. Во втором двойном слепом опыте с 76 пациентами, из которых 39 получили рилибинин, а 37 подверглись контрольному лечению, обнаружены очень боль- шие различия, говорящие в пользу силибинина.

При токсичном по отношению к печени действия наркоза в связи с оперированием органов брюшной полости может быть доказано, что предоперационное введение силибинина приводит к значительному уменьшению послеоперационного повьшения содержания ферментов печени в крови. С помощью силибинина эффективно предотвращаются также возникающие в настоящее время все чаще и вызываемые определенными лекарственными средствами поражения печени. Это может быть показано на примере индицированного фенилгидантоином гепатоза, при котором, несмотря на дальнейшее назначение безусловно необходимого и предотвращающего спазмы медикамента, при одновременном назначении силибинина в более короткое время нормализуются все лабораторные показатели.

Другие испытания при заболеваниях шизофренией и с тяжелыми поражениями печени, возникакщими при назначении хлорпромазина, также показалр положительное действие силибинина. Другие опыты касаются предотвращения свя занного с поражением печени воздействия, например, хлороквина или ас- парагиназы. В случаях поражения печени, обусловленных профессией, у всех подвергнутых лечению пациентов могут быть значительно улучшены патологи

5

0

5

0

5

0

5

0

5

чески повышенные данные лабораторного исследования, причем независимо от причины или возможных дополнительных заболеваний.

Кроме того силибинин вызывает также значительные улучшения при хронических воспалительных заболеваниях печени и при циррозе печени. Например, пациенты с циррозом печени в рамках продолжительного исследования были использованы в двойном слепом опыте, в котором силибинин испытывали в сравнении с плацебо. Критерием для оценки терапевтического успеха было прежде всего время переживания. Здесь обнаругшлось значительное превосходство силибинина в сравнении с плацеболечением. Сравнительные испытания меяэду силибинином и изосйли- бином и силибином (смесь силибинина и изосилибина) на модели фаллоидин- и празеодим-интоксикации проводили на мышах после внутривенного введения .

Антигепатолоксическое действие силибинина, изосилибина и силибина в виде 11-метилглюкаминовой соли испытывали в дозах 50 и 100 мг-кг .(в расчете на силибинин) на модели отравления валлоидином или празеодимом на мьппах после внутривенного введения Введение исследуемого вещества производили за 1 ч до отравления фаллоидином или за 1 ч до или же через 6,24 и 48 ч после отравления празеодимом. В случае отравления валоидином оценивали степень переживания, а в случае отравления празе- одимом оценивали различные параметры сыворотки и печени через 72 ч после интоксикации.

В случае интоксикации фаллоидином степень переживания после введения силибинина в обеих дозах составляла 100%. При применении остальных веществ степень переживания не превышала 40% у необработанных пораженных контрольных животных.

Изосилибин оказался в связи с интоксикацией праз еодимом непереносимым, вследствие чего доза 100 мг-кг- должна быть разделена на два частичных приема. 1 Формула изобретения

p. .CHjOH

ОСНз

он

оно

при котором высушенные плоды растения Silubum marianym L. Gaerth осво- бождают от основного количества жирного масла посредством тосо, что клетки плодов разрушают под воздействием высокого механического давления, затем отпрессованный остаток, характеризующийся содержанием масла 5-10%, полностью экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, этиловый эфир уксусной кислоты отгоняют, после чего полученньй сухой остаток в количестве 2 мас.% растворяют в состоящей из метилового спирта и воды нижней фазы смеси трех растворителей, состоящей из 95 мае.ч. метилового спирта, 5 мае.ч. воды и 100 мае.ч о петролейного эфира (т.кип АО-бО С), для удаления хлопьевидных частиц твердого вещества производят центрифугирование до получения прозрачной жидкости, а затем в этой системе растворителей сухой остаток подвергают многократному равномерному диспергированию в противотоке, причем соотношение общих протекающих объемов верхней фазы и нижней фазы поддерживают равным 1:1, и непосредственно после этого из вытекающей нижней фазы в результате упаривания в вакууме досуха вьщеляют в виде окрашенного в коричневьй цвет порош- кообразного вещества 70-80%-ную по

8

лиоксифенилхроманоновую смесь (си- лимарин I-IV сипимарин I-IV-rpynn) отличающийся тем, что, с целью получения целевого продукта, свободного от примеси изосилибина, одну массовую часть полученного и окрашенного в коричневатый цвет порошка суспендируют с 0,7-1,5 мае.ч. насьпценного водой этилового эфира уксусной кислоты, приготовленную суспензию вьдерживают в течение 1-2 сут, осадок отделяют фильтрованием, промывают охлажденньм и насыщенным водой этиловым эфиром уксусной кислоты, который берут в количестве 0,07-0,15 мае.ч., и сущат в вакууме при 30-50 С, полученный продукт растворяют при нагревании до температуры кипения смеси в 30- 50 масоЧ. сухого (безводного) этилового эфира уксусной кислоты, раствор обрабатывают в течение 2 ч. при температуре кипения смеси в сосуде, снаженном обратньм холодильником, актиг вированным углем, взятым в количестве 0,2-0,4 мае.ч.,производят фильтрование, после чего фильтрат упаривают в вакууме 30-50°С до общего объема 3,330 л, к концентрату прибавляют 0,5-0,8 мае.ч. насьпценного водой этилового эфира уксусной кислоты, вьщелившийся в осадок силибинин через 5-10 ч. отфштьтровьшают и суспендируют в 0,9-1,5 мае.ч. технического этилового эфира уксусной кислоты, осадок фильтруют и подвергают предварительной сушке в вакууме при 30- , предварительно высушенный продукт перемалывают и вновь сушат в вакууме при 30-50 0.