Способ выделения гибберелина Советский патент 1962 года по МПК C12P27/00 

Известен способ выделения гибберелина нз культуральной жидкости экстракционным путем с применением в качестве экстр агента этилацетата, коэффициент распределения которого в воде весьма незначителен, что приводит к расходу большого количества экстрагента.

Предлагается способ выделения гибберелина из культуральной жидкости, заключающийся в экстракции гибберелина н-бутиловым спиртом из кислого раствора с последующим реэкстрагированием продукта щелочными водными растворами и далее этилацетатом. При этом сокращается объем используемого растворителя и расщиряется сырьевая база.

Изучение влияния концентрации водородных ионов на коэффициент распределения гибберелина в системе я-бутиловый спирт-вода показало, что при рН 2,0 3,0 коэффициент распределения равен 25-20 и, следовательно, применение небольших объемов растворителя позволяет извлечь гибберелин из водной фазы с высоким выходом.

Пример. 18 л фильтрата культуральной жидкости с активностью 315 мг/мл (всего 5,65 г гибберелина) подкисляют до ,62N-нoй соляной кислотой и экстрагируют дважды н-бутиловым спиртом (по 3,6 л или 0,2 объема) путем перемешивания в течение 15 мин и разделения фаз на суперцентрифуге. Бутанольные экстракты объединяют и обрабатывают 30 г активированного угля (ОУ марки А).

Осветленный бутанольный экстракт реэкстрагируют трижды растворами бикарбоната натрия следующих составов: 1,2 л 0,2%-ного раствора NaHCOs (рН вытяжки 6,85); 1,2 л 0,1%-ного раствора NaHCOs (рН вытяжки 7,2); 1,2 л 0,06%-ного раствора КаНССЗз (рН вытяжки 7,2).

Водные растворы объединяют, подкисляют соляной кислотой до рН 2,5 и экстрагируют трижды этилацетатом (по 1 л или 0,3 объема). Этилацетатнь1Й экстракт сушат безводным хлористым кальциемч1 концентрируют под вакуумом до выпадения кристаллов, которые промыД Ь 147294-2вают ледяным этил ацетатом и сушат. В результате получают 3,35 г

белых кристаллов с активностью 865 мг1мг; точка плавления гарепарата - 210-212°, удельное вращение al/j 68°. Выход составляет 186 мг гибберелина с одного литра культуральной жидкости или 51,2%.

Предлагаемый способ позволяет значительно повысить производительность процесса экстракции, резко сократить объем используемого растворителя, использовать любые культуральные среды, в том числе и комплексные. Выход и качество продукта при этом не изменяются.. Способ является более технологичным по сравнению с известными способами.

Предмет изобретения

Способ выделения гибберелина из культуральной жидкости экстракционным путем, отличающийся тем, что, с целью сокращения объема используемого растворителя и расширен-ня сырьевой базы„ экстракцию осуществляют ««бутиловым спиртом из кислого раствора с последующим реэкстрагированием продукта щелочными водными растворами и далее этилацетатом.

20if