Способ количественного определения флавонол-3-гликозидов Советский патент 1989 года по МПК G01N21/78 

1

Изобретение относится к способу количественного определения флавонол- 3-гликозидов и может найти применение при контроле содержания флавонол-3- гликозидов в лекарственных препаратах.

Цель изобретения - повышение точности и избирательности способа.

Способ осуществляют следующим образом

Пример 1„ 0,01-0,03 г (точная масса) авикулярина, гиперозида, кверцитрина, рутина или фларонина растворяют в 10 мл диметрилформамида в мерной колбе емкостью 25 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

В две мерные колбы емкостью 25 мл помещают по 1 мл испытываемого раствора, в одну колбу прибавляют 2 мл 1%-ного раствора ацетата меди (0,02 г) IB 40%-ном диметилформамиде с 6%-ной уксусной кислотой (0, 12r)j, затем добавляют 3,5 мл 15%-ного раствора гексаметилентетрамина А),525 г} в 40%-ном диметилформамиде, а в другую колбу прибавляют 0,1 мл 30%-ной уксусной кислоты и доводят объем растворов в колбах до метки 40%-ным водным раствором диметилформамида. Через 15-

Я

00

со

00 СО

31

60 мин измеряют оптическую плотность раствора флавонол-3-гликозида с реат тентами на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 405 нм для фларонина и 415 нм для авикулярина, гиперозида, кверцитрина и рутина, применяя в качестве контроля раствор соответствующего флаво-

нин , приготовленного, как в приме- , ре 1; в одну колбу прибавляют 2,3 мл 1%-ного раствора ацетата меди (О .,023 г) в 40%-ном диметилформамиде с 6%-ной уксусной кислотой (0,138 г), затем добавляют 3,7 мл 15%-ноГо раствора гексаметилентетрамина (0,555 г) в 40%-ном диметилформамиде, а в дру

Изобретение касается аналитической химии, в частности количественного анализа фланоно -3- гликозидов в лекарственных формах. Цель - повышение точности и избирательности способа, который ведут обработкой раствора пробы в органическом растворителе - 35-40%-ном водном растворе диметилформамида ацетатом меди в присутствии CH₃C(O)OH и гексаметилентетраамина с последующим фотометрированием окрашенного раствора. В качестве контроля используют раствор анализируемой пробы, подкисленной CH₃C(O)OH. Эти условия обеспечивают увеличение избирательности в 10 раз и точности в 6-10 раз. Так, способ позволяет определять целевой продукт при содержании примесей агликонов в смеси с гликозидами до 10% против 1% в известном случае при точности анализа 2,2% против 13-23% в случае содержания 10% примеси агликонов. 3 табл.

нол-3-гликозида, подкисленного уксус- Q гую колбу прибавляют 0,1 мл 30%-ной

ной кислотой. Параллельно в тех же условиях измеряют оптическую плотность растворов стандартных образцов рутина, фларонина и гиперозида, прит готовленных таким же способомо

Содержание флавонол-3-гликозида в процентах (X) в пересчете на су- хое вещество вычисляют по формуле Д. С0; 100

Д0 с

где Д - оптическая плотность испытываемой пробы;

Д0 - оптическая плотность стандартного образца;

С0 - количество стандартного образца в пробе для спектрофо- тометрирования в пересчете на сухое вещество, мг; количество .испытываемого фла20

25

30

35

С вонол-3-гликозида в пробе для спектрофотометрирования в пересчете на сухое вещество, МГ0

В связи с отсутствием стандартов авикулярина и кверцитрина проводят пересчет гиперозида на авикулярин, с этой целью в числитель указанной формулы вводят коэффициент 1, 07, а для пересчета на кверцитрин применяют коэффициент 1,035. Указанные коэффи- 0 циенты получены из отношения молекулярной массы гиперозида к молекулярной массе авикулярина или кверцитрина.

уксусной кислоты и доводят объем растворов в колбах до метки 40%-ным водным раствором диметилформамида. Через 15-60 мин измеряют оптическую 15 плотность проб и проводят расчеты, как в примере 1.

При м ер 3.В две мерные колбы емкостью 25 мл помещают по 1 мл испытываемого раствора любого из определяемых веществ, приготовленного ка в примере 1; в одну колбу прибавляют 2,5 мл 1%-ного раствора ацетата меди 0„025 г в 35%-ном диметилформамиде с 6%-ной уксусной кислотой (0,150 г) затем добавляют 4 мл 15%-ного раство ра гексаметилентетрамина (0,600 г) в 35%-ном диметилформамиде, а в другую колбу прибавляют 0,1 мл 30%-ной уксусной кислоты и доводят объем растворов в колбах до метки 35%-ным вод ным раствором диметилформамида. Через 15-60 мин измеряют оптическую плотность проб и проводят расчеты, как в примере I,

П р и м е р 4. Количественное определение рутина в таблетках по 0,02 и фларонина в таблетках по 0,03.

0,05-0,1 г (точная масса) порошка растертых таблеток фларонина или 0,1 0,3 г таблеток рутина взбалтывают с 15 мл диметилформамида в течение 15 мин.и раствор фильтруют в мерную колбу емкостью 50 мл, остаток порошка в колбе и на фильтре промывают

Для приготовления 1%-ного раствора д$ 5 мл диметилформамида, к фильтрату уксусно-кислой меди 1 г растертогоприбавляют 20 мл воды, перемешивают

в мелкий порошок ацетата меди раство- и доводят объем раствора водой до ряют в мерной колбе емкостью 100 мл в 20 мл воды, подкисленной 5 мл 30%-ной уксусной кислоты, затем при- гп бавляют 15 мл 30%-ной уксусной кислоты, 35-40 г диметилформамида, перемешивают и доводят объем раствора водой до метки

Пример2. В две мерные колбы емкостью 25 мл помещают по 1 мл испытываемого раствора любого из опреметки0

В две мерные колбы емкостью 25 мл помещают по 2 мл полученного извлеч ния, затем прибавляют реактивы и проводят определение по методике, описанной в примере 1.

55

деляемых веществ (авикулярин, ги- перозид, кверцитрин, рутин, флароСодержание рутина или фларонина в одной таблетке в граммах вычисляют по формуле

х Д Ср-ЗО а

До 6-2

0

5

0

5

0

уксусной кислоты и доводят объем растворов в колбах до метки 40%-ным водным раствором диметилформамида. Через 15-60 мин измеряют оптическую 5 плотность проб и проводят расчеты, как в примере 1.

При м ер 3.В две мерные колбы емкостью 25 мл помещают по 1 мл испытываемого раствора любого из определяемых веществ, приготовленного как в примере 1; в одну колбу прибавляют 2,5 мл 1%-ного раствора ацетата меди 0„025 г в 35%-ном диметилформамиде с 6%-ной уксусной кислотой (0,150 г), затем добавляют 4 мл 15%-ного раствора гексаметилентетрамина (0,600 г) в 35%-ном диметилформамиде, а в другую колбу прибавляют 0,1 мл 30%-ной уксусной кислоты и доводят объем растворов в колбах до метки 35%-ным водным раствором диметилформамида. Через 15-60 мин измеряют оптическую плотность проб и проводят расчеты, как в примере I,

П р и м е р 4. Количественное определение рутина в таблетках по 0,02 и фларонина в таблетках по 0,03.

0,05-0,1 г (точная масса) порошка растертых таблеток фларонина или 0,15- 0,3 г таблеток рутина взбалтывают с 15 мл диметилформамида в течение 15 мин.и раствор фильтруют в мерную колбу емкостью 50 мл, остаток порошка в колбе и на фильтре промывают

и доводят объем раствора водой до

метки0

В две мерные колбы емкостью 25 мл помещают по 2 мл полученного извлечения, затем прибавляют реактивы и проводят определение по методике, описанной в примере 1.

Содержание рутина или фларонина в одной таблетке в граммах вычисляют по формуле

х Д Ср-ЗО а

До 6-2

где Д - оптическая плотность испытываемой пробы;

Д - оптическая плотность пробы стандартного образца рутина или фларонина;

С - количество рутина-стандарта или фларонина-стандарта в спектрофотометрируемой пробе, г;

О - средняя масса таблетки, г; 5 - масса порошка таблеток, г. В табл. 1 приведены результаты определения рутина и фларонина в модельных -смесях и таблетках.

Изобретение расширяет область применения спектрофотометрического метода для анализа флавонол-3-гликозидов в смесях, содержащих 0,1-10% ..сопут- ствукщих им агликонов, с точностью спектрофотометрического определения и позволяет получать достоверные результаты анализа в случае разложения флавонол-3-гликоэидов, что даёт воз- можность использовать предлагаемый способ для изучения сроков хранения исходных субстанций в лекарственных формах (например, таблетках). Предлагаемый способ обеспечивает сокраще- кие времени процесса, включает применение общедоступных недорогостоящих реактивов и исключает использование спиртов, обычно применяемых при анализе флавоноидов.

83339

В табло 2 приведены сравнительные характеристики известного и предлагаемого способов определения флаво,. НОЛ-3-ГЛИКОЗИДОВо

В табл. 3 приведены результаты количественного определения флавонол- 3-гликозидов в искусственных смесях с агликонами предлагаемым способом. 10 Таким образом, избирательность предлагаемого способа повышена в -10 раз, а точность определения - в 6-10 раз.

15 Формула изобретения

Способ количественного определения флавонол-3-гликозидов путем обработки раствора анализируемой пробы в органическом растворителе химическим реагентом с последующим фотомет- рированием полученного раствора, отличающий ся тем, что, с целью повышения избирательности и точности способа, в качестве органического растворителя используют 35-40%-ный водный диметилформамида, в качестве химического реагента - ацетат меди, обработку ведут в присутствии уксусной кислоты и гексаме- тилентетрамина и фотометрирование ведут с использованием в качестве контрольного раствора раствора анализируемой пробы, подкисленной уксусной кислотой.

Таблица 1

0,018-0,022

римечание.

Результаты анализа модельных смесей выражены в % от взятой навески флавонол-3-гликозида, что показывает точность анализа. Результаты анализа таблеток выражены в граммах в I таблетке в соответствии с нормами по НТД.

Избирательность способа (допустимый % примеси агликонов в смеси с г ли коз идами)

Точно сть анали- за при 10% примеси агликонов

Продолжение табл.1

Таблица 2

1,0%

10%

13-23%

2,2%