Штамм гриба FUSаRIUм SроRотRIснIеLLа, используемый для получения Т-2 токсина Советский патент 1991 года по МПК C12N1/14 C12N1/14 C12R1/77 

1

(21)4373312/13 (22)03.03.88 . (46)30.11.91. Бюл. №44

(71)Украинский научно-исследовательский институт птицеводства

(72)А.Н.Котик и В.А.Труфанова (53) 576.8.093.3(088.8)

(56) Соболев B.C., Эллер К.И., Болтянская Э.В., Дмитриева И.В., Тутельян В.А. Изучение токсинообразования Fusarlum sporotrlchlella. Известия Академии наук СССР, серия биологическая, 1984. № 1, с. 137-140.

Т-2 токсин. Технические условия ТУ- 10-07-301/86. утверждены Главным управлением ветеринарии Госагропрома СССР 14 ноября 1986.

(54) ШТАММ ГРИБА Fusarlum sporotrlchiella. ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ Т-2 ТОКСИНА

(57) Изобретение относится к биотехнологии, к производству микотоксинов и может найти применение в процессе санитарно- гигиенического контроля качества продовольственного и фуражного зерна и продуктов его производства. Цель изобретения - новый штамм Fusarlum sporotrichlella ВНИИА Nfe 315А. обладающий повышенной токсинообразующей способностью. При выращивании на стерильном увлажненном зерне (рис. просо) при 6-12°С в течение 4-6 недель или при 24-28°С в течение 1-4 недель штамм образует Т-2 токсин в количестве 8-10 г/кг субстрата. Использование штамма позволит значительно увеличить производство Т-2 токсина. 3 табл.

N

Изобретение относится к биотехнологии, производству микотоксинов. в частности Т-2 токсина (4.15-диацетокси-8-(3-метилбутири- локси)-12, 13-эпокситрихотец-9-ен-3-ола), применяемого в качестве вещества-свидетеля в процессе санитарно-гигиенического контроля качества продовольственного и фуражного зерна и продуктов его переработки, а также для научно-исследовательских целей.

Цель изобретения - новый штамм Fusarlum sporotulchlella 2m-15, обладаю- . щий повышенной токсинообразующей способностью, что позволит увеличить производство Т-2 токсина.

Штамм Fusarlum sporotrlchlella 2m-15 получен при воздействии М-нитрозометилмочевины на исходный штамм Fusarium sporotrichietla 2m и отбора среди полученных мутантов по признаку токсинообразования. Полученный штамм Fusarlum sporotrlchlella 2m-15 депонирован в коллекции культур микроорганизмов ВНИИ антибиотиков и имеет регистрационный номер 315А.

Штамм Fusarlum sporotrlchlella НИИ N°. 315А характеризуется следующими признаками:

Морфологические признаки. Микроко- нидии образуются в воздушном мицелии на простых или разветвленных конидиенос- цах. многочисленные, большей частью грушевидные, почти округлые, реже овальные или удлиненные, иногда веретеновидные.

большинство без перегородок, реже с 1-2 перегородками. Макроконидии веретено- видно-серповидные, веретеновидные или серповидные с постепенно сужающейся верхней клеткой, с более или менее выраженной ножкой у основания, иногда имеющей вид сосочка. Образуются в воздушном мицелии, обычно с 3 перегородками. Хлами- доспоры в мицелии промежуточные, реже конечные.

Культуральные признаки. На агаре Чапека 10-суточная колония ровная округлой формы с неровными краями, центральная часть колонии плоская, воздушный мицелий слаборастущий, низкий, бело-розового цвета. Строма окрашена в розовый цвет. С возрастом культуры окраска колонии изменяется от розового до фиолетово-бурого цвета. На сусловом агаре колония слабопаутинистая, ровная, округлой формы, с неровными краями, центральная часть колонии плоская, воздушный мицелий розово- фиолетовый, Строма лилово-фиолетового цвета на картофельном агаре колонии складчато-бугристые, округлой формы, с неровными краями, воздушный мицелий бело- розовый. Строма красно-лилового цвета. На плотных питательных средах колонии характеризуются ограниченным ростом (величина 2-недельных колоний, выращенных при 24-28°С, не превышает в диаметре 12- 15 мм), а также обильным конидиеобразова- нием.

Токсинообразующая активность. При выращивании на стерильном увлаженном зерне (рис, просо) при 24-28°С в течение 1-4 недель, при б-12°С в течении 4-6 недель образуется Т-2 токсин в количестве 8-10 г/кг субстрата.

П р и м е р 1. Штамм F. sporotrlchlella ВНИИА № 315А выращивают в пробирке на скошенном агаре Чапека при в течение Юсут. Полученной культурой засевают субстраты (рис, рис с просом), предвариДинамика продуцирования Т-2 токсина шт. F. sporotrichlella ВНИИА №315 А

тельно увлажненные водопроводной водой (40мл ка 100 г субстрат и стерилизованные в автоклаве при давлении 1 атм в течение 1 ч. Колбы с засеянными субстратами выдерживают в термостате при 28°С в течение 5-6 сут, а затем в холодильнике при 8-10°С в течение 3-6 недель, после чего биоавтографическим методом определяют содержание Т-2 токсина. Результаты исследования приведены в табл.1.

П р и м е р 2, Токсинообразующая способность штамма Fusarlum sporotrlchiella ВНИИА № 315А, а также штамма Fusarlum sporotrlchlella var. рсае407/4, используемого в процессе производства Т-2 токсина в настоящее время в нашей стране и принятого нами за прототип, представлена в табл.2 и 3, Культуры обоих штаммов на увлажненном стерильном зерне инкубируют в

течение 6 суток при 28°С и затем выдерживают при 6-12°С в холодильнике в течение 4-6 недель.

Как видно из табл.1, штамм ВНИИАМ; 315А отличается от штамма 407/4 большей

токсинообразующей способностью.

Результаты определения количества Т- 2 токсина в культурах штаммов на зерне, выращенных при 28°С. представлены в табл.3.

Как видно из таблиц, новый штамм вырабатывает Т-2 токсин как при 6-12°, так и при 28.

Использование штамма Fusarium

sporotrlchlella ВНИИА № 315А для производства Т-2 токсина вместо используемого в настоящее время штамма Fusarlum sporotrlchlelta var.poae 407/4 позволит значительно увеличить производство Т--2 токсина.

Формула изобретения Штамм гриба Fusarlum sporotrlchlella ВНИИА N 315А, используемый для получе- ния Т-2 токсина.

Таблица 1

Таблица 2

Токсинообразующая активность штаммов Fusarlum sporotrlchlella 407/4и ВНИИА Nr

315 А при 6-12°С

Токсинообразующая активность штамм Fusarium sporotrlchlella

при 28° С

Таблица 3 407/4 и ВНИИА