Способ моделирования посттравматической эпилепсии Советский патент 1989 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии.

Цель изобретения - повышение воспроизводимости способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Крысу линии Вистар помещают в коробку с отверстием для хвоста, который опускают на 3-5 мин в теплую воду (40-50 С). Затем с помощью скальпеля надрезают кончик хвоста и опускают в пробирку, куда предварительно наливают бидистиллированную воду (0,2 мл). Не погружая кончик хвоста в воду, собирают в пробирку венозную кровь до объема 0,8 мл. Полученную лизированную кровь набирают в шприц микроинъектора, инъекционную иглу микроинъектора фиксируют в вертикальном положении водителя стереотакси- ческого аппарата.

Крысу, у которой предполагается воспроизводить посттравматическую эпилепсию под эфирным рауш-наркозом

фиксируют в стереотаксическом аппарате. Скальпелем производят разрез мягких тканей головы в сагиттальном направлении. Находят переднезаднюю и латеральную координаты структуры, предназначенной для введения крови. Бормашиной высверливают в найденной точке отверстие, после чего в него вводят инъекционную иглу микроинъектора (внешний диаметр 0,5 мм) на необходимую глубину, также определяемую по сте- реотаксическому атласу. В течение 5 мин вводят 10-15 МП крови (2-3 мкл/мин). После завершения введения остав- - ляют иглу в месте введения еще в течение 2-4 мин, после чего ее удаляют. Начиная со следующего дня после введения крови животному производят внутрибрюшинные е(жедневные однократные введения пикротрксина в дозе 9,9-Г, 1 мг/кг, с последующей визуальной регистрацией поведенческих изменений.

Пример 1. У крысы линии Вис- тар массой 320 г из хвостовой вены

(Я

ел

о

2

берут 0,6 мл крови, к которой добавляют 0,2 мл дистиллированной воды. В дальнейшем эту кровь используют дл введенир в гиппокамп. Крысу-самца линии Вистар массой 270 г под эфирным наркозом закрепляют в стереотак- сическом аппарате и по координатам (АР -4,8, L 3,5, Н 3,5) вводят в гиппокамп билатерально по 12 мкл лизированной крови, при этом каждое введение осуществляется в течение 5 мин, после чего инъекционная игла находится в зоне введения еще в течение 2 мин. На следующий день после введения крови животному производят первое внутрибрющинное введение пик- ротоксина в дозе 1 мг/кг. Наблюдение в течение 30 мин после введения ПКТ

0

после чего инъекционная игла находится в зоне введения еще 2 мин. На следующий день после введения крови животному производят первое внутрибрю- шинное введение пикротоксина в дозе 1,1 мг/кг. Наблюдение в течение 30 мин после введения показывает отсутствие зпилептиформных реакций.

В последующем инъекции этой дозы производят однократно ежедневно. После 7-го введения пикротоксина у крысы отмечаются выраженные миоклонусы конечностей, вздрагивания мышц морды, ушей, наблюдающиеся в течение 20 мин. После 15-го введения у крысы отмечаются клонические судороги всего тела, продолжающиеся в течение 20 мин. 26-я инъекция приводит к развитию ге

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии. Цель - повышение воспроизводимости способа. С этой целью животному в мозг билатерально вводят 10-15 мкл лизированной гомокрови. Затем ежедневно 1 раз в день вводят пикротоксин в дозе 0,9-1,1, мг/кг. Применение способа позволяет повысить воспроизводимость модели посттравматической эпилепсии на 97% по сравнению с прототипом.

показывает отсутствие эпилептиформных 20 -нерализованного клонико-тонического

реакции.

В последующем инъекции этой дозы производят однократно ежедневно. После 4-го введения у крысы отмечаются замирания и миоклонические вздраги- вания мьшц морды и ушей в течение 15 мин. После 7-го введения пикротоксина у крысы развиваются клонические судороги всего тела, регистрирующиеся в течение 25 мин. 10-я инъекция вы- зывает клонические судороги мышц передних конечностей, и после 17-го введения пикротоксина отмечается генерализованный клонико-тонический

Пример 3. У крысы линии Висприпадок (длительность 2,5 мин), за- тар массой 340 г из хвостовой вены канчивающийся выраженной постприступ- берут 0,6 кп крови, к которой добавной депрессией. В дальнейшем такие припадки возникают после каждого введения (всего произведено 20 введений), а также после окончания введе- Q ния пикротоксина через 6,5 мес после последней инъекции эпилептогена. Таким образом, у крысы воспроизведена модель посттравматической эпилепсии

ляют 0,2 мл дистиллированной воды. В дальнейшем эту кровь используют для введений в гиппокамп. Крысу-самца линии Вистар массой 300 г под эфирным наркозом закрепляют в стереотаксическом аппарате, по координатам (АР -4,8, L 3,5, Н 3,5) вводят билатерально в гиппокамп по 10 мкл лизированной крови. Каждое введение осуществляется в течение 5 мин, после чего инъекционная игла находится в зоне введения еще в течение 2 мин. На следующий день после введения крови животному производят первое внутри- брюшинное введение пикротоксина в дозе 0,9 мг/кг. Наблюдение в течение 30 мин после введения эпилептогена показывает отсутствие эпилептиформных реакций.

имеющей хронический прогрессивньи характер эпилептиформных проявлений.

Пример2. У крысы линии Вис- тар массой 300 г из хвостовой вены берут 0,6 мл крови, к которой добавляют 0,2 МП дистиллированной воды. Полученную лизированную кровь в даль нейшем используют для введений в сен- сомоторную кору. Крысу-самца линии Вистар массой 310 г под эфирным наркозом закрепляют в стереотаксическом аппарате и в область сенсомоторной коры билатерально вводят 15 мкл лизированной крови, при этом каждое введение осуществляется в течение 5 мин.

припадка длительностью 2 мин с последующей выраженной постприступной депрессией. Подобные припадки отмечаются после каждого последующего введения пикротоксина (всего произведено 30 введений), а также через 6,5 мес после последнего введения эпилепто- . Таким образом, у крысы воспроизведена модель посттравматической эпилепсии с хроническим прогрессивным характером эпилептиформньк проявлений .

Пример 3. У крысы линии Вистар массой 340 г из хвостовой вены берут 0,6 кп крови, к которой добав Q

45

50

55

ляют 0,2 мл дистиллированной воды. В дальнейшем эту кровь используют для введений в гиппокамп. Крысу-самца линии Вистар массой 300 г под эфирным наркозом закрепляют в стереотаксическом аппарате, по координатам (АР -4,8, L 3,5, Н 3,5) вводят билатерально в гиппокамп по 10 мкл лизированной крови. Каждое введение осуществляется в течение 5 мин, после чего инъекционная игла находится в зоне введения еще в течение 2 мин. На следующий день после введения крови животному производят первое внутри- брюшинное введение пикротоксина в дозе 0,9 мг/кг. Наблюдение в течение 30 мин после введения эпилептогена показывает отсутствие эпилептиформных реакций.

В последующем инъекции этой дозы производят однократно ежедневно. После 7-й инъекции эпилептогена у крысы отмечаются замирания, миоклонические

вздрагивания мышц морды, ушей, туловища, которые длятся до 20 мин. Посл 9-го введения у крысы развиваются клонические судороги всего туловища, регистрировавшиеся в течение 25 мин. После 15-й инъекции пикротоксина у крысы развиваются клонические судороги передних конечностей (цоза кенгуру), которые отмечаются в течение 30 мин от их возникновения. 20-я инъекция конвулъсанта вызьшает у крысы развитие генерализованного кло нико-тонического припадка с падением животного на бок длительностью мин с выраженной постприступной депрессией. Пикротоксин, введенный через 6,5 мес после последнего (20-го) введения, вызвал развитие у крысы генерализованного клонико-то- нического судорожного припадка. Та

КИМ образом, у крысы воспроизведена модель посттравматической эпилепсии, имеющей хронический прогрессивный характер эпилептиформных проявлений. Применение способа позволяет повысить воспроизводимость модели посттравматической эпилепсии на 97% по сравнению с известным.

Формула изобретения

Способ моделирования посттравматической эпилепсии путем введения животному в мозг крови, отличающийся тем, что, с целью повышения воспроизводимости способа, билатерально в мозг вводят 10-15 мкл лизированной гомокрови, а затем 1 раз в день - пикротоксин в дозе 0,9- 1,2 мг/кг.