Способ моделирования эпилептического статуса Советский патент 1992 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения патофизиологических механизмов эпилепсии, в частности эпилептического статуса, разработки методов его профилактики и купирования, а также испытания новых фармакологических препаратов.

Целью изобретения является повышение воспроизводимости способа и многократных генерализованных клонико-тонических судорог.

Способ осуществляют следующим образом.

Крысам ежедневно однократно внутрибрюшинно вводят пикротоксин в дозе 1,01.3 мг/кг в течение 17-25 дней до получения у 100% животных генерализованных клонико-тонических припадков. Затем под гексеналовым наркозом (100 мг/кг) животных фиксируют в стереотаксическом аппарате и по координатам атласа (АР 0.2. 1 3.0. Н .5) билатерально имплантируют направляющие канюли в хвостовые ядра. Для регистрации электрической активности структур головного мозга вживляют монополярные константановые электроды в гиппокамп (АР -2,8. 1 - 1,5. Н 3,5), хвостатое ядро, сенсомоторную кору. Индифферентный электрод крепят в носовых костях. Через 10-15 дней после операций в условиях свободного поведения животных через проводящие канюли при помощи микроинъектора вводят мкг скополаминэ в 0,5-1,0 мкл 0,9%-ного раствора NaCi з каждое хвостатое ядро. Через 3-5 мин после микроиньекции внутрибрюшинно вводят пикротоксин в Д038 1,0-1.3 мг/кг. Электроды присоединяют к разъемам электрознцефэлографа. Через 15-25 мин после введения наблюдают развитие повторных клонмко-тонических припадков, которые развиваются по 10-15 разм ааканчмоаются летальноу 100% животных.

Пример, Крысе-самке линии Вистар массой 250 г производят вн трибрюшинное введение пикротоксина в дозе 1,3 мг/кг. Наблюдение в течение 60 1ин не выявляет у животного поведенческих и ЭЭГ-изменемий, В дальнейшем подобные введения пикротоксина производят ежедневно однократно виутрибрюшинно. .После 4-й инъекции препарата у крысы отмечается появление миоклонических вздрагиваний головы и отдельных мышц туловища, После 7-й инъекции миоклонические вздрагивания переходят в повторные кпонические судороги всего туловища и/или передних конегностей. Через 19 мин после 17-й инъекции пикротоксина у животного развивается /енерализоБанный клонико-тонический припадок с падением на бок, постприступной депрессией и вегетативными расстройствами. В последующем генерализованные судорожные припадки наблюдаются у животного ПОСПИ каждого введения пикротоксина. В процессе осуществления киндлинга после каждого введения пглкротоксина у животного развивались однократные генерализованные клонико-токическме судороги,

Через 24 ч после 19-го введения пикротоксина крысу под гексеналовым наркозом (100 мг/кг) фиксируют в стереотаксическом аппарате и по координатам атласа (5) имплантируют проводящие канюли 8 хвостовые ядра по координатам АР 0,2, 1 3,0, Р 4,5. Для рег.страции электрической активности структур головного мозга в хвостатые ядра, атакжевгиппокамп(АР 2,8,1 - 1,5, Н - 3,5) и сенсомоторную кору вживляют монополярные константановые электроды. Индифферентный электрод фиксируют в носозых костях. Через 10 дней пЬсле операции крысе в условиях свободного поведения вводят при помощи микроииъектора в хвостовые ядра скополамин в дозе 5,0 мкг и чооез Б мин внутрибрюшенно вводят пикрото .Д1Н в дозе 1,3 мг/кг. Электроды животного присоединяют к разъему злектроанцефалографа. Через 7 мин после инъекции у крысы возникают судорожные

вздрагивания отделъных мышц туловища, которые переходят через 2 мин в повторные клоническиесудорого всего туловища и/или передних конечностей. Клонические судороги через 2 мин после возникновения переходятвгенерализованныеклонико-тонические припадки с падением на бок, постприступной депрессией и вегетативными расстройствами. Во время припадков в ЭЭГ регистрируются частые (7-10 в 1 с) пиковые разряды, синхронизированные во всех структ рах, амплитуда которых максималъно выражена в гиппокампе, где она составляет 600-700 мкВ. Судорожные

5 припадки развиваются у животного повторно 15 раз с интервалами 3-5 мин. Длительность первого судорожного припадка составляла 50 с 15-го - 120 с. 8 конце 15-го клонико-тонического судорожного приступа у крысы развивается тоническая экстензия задних конечностей, остановка дыхания /5 гибель.

Таким образом, у животного воспроизведена модель эпилептического статуса в

5 виде многократных генерализованных судорожных припадк.ов, заканчивающихся летальным исходом.

Данный способ показывает важное значение, которое имеет в патогенезе эпилептического дтатуса состояниеповышенной судорожной готовности с одной стороны, как это имеет место при киндлинге, и нарушение тормозного контроля со стороны хвостатого ядра, в частности снижение в нем

5 активности холинергической нейромедиаторной системы, воспроизводимое локальной микроинъекцией скополамина. Разработанная модель позволяет изучать новые эффективные методы профилактики и

0 купирования эпилептического статуса, что является актуальной проблемой клинической эпилептологии.

Высокая воспроизводимость способа, простота и доступность его осуществления

5 способствуют его широкому распространению в лабораториях, изучающих механизмы деятельности мозга в условиях патологии и занимающихся разработкой тепарии нервных болезней.

Формула изобретения Способ моделирования эпилептического статуса путем введения фармакологических препаратов экспериментальному

5 животному, отличающийся тем, что, с целью повышения аоспроизводимости способа и многократных генерализованных клонико-тонических судорог, производят 17-25 ежедневных однократных внутрибрюшинных введений пикротоксина в дозе

517093806

1,0-1,3 мг/кг и затем однократно в хвоста- поламина и через 3-5 мин внутрибрюшинно тые ядра билатерально вводят 5-10 мкгско- вводят пикротоксин в дозе 1,0-:1,3 мг/кг.

Изобретение относится к области экспериментальной медицины и может применяться при моделировании эпилептического статуса. Цель изобретения - повышение воспроизводимости и многократных генерализованных клонико-техни- ческих судорог. Эта цель достигается путем билатерального введения в хвостатые ядракрыс, подвергнутых пикротоксиновому кин- длингу (17-25 внутрибрюшинных введений пикротоксинг в дозе 1.0-1.3 мг/кг)скопола- мина в количестве 5-10 мкг с последующим (через 3-5 мин) внутрибрюшинным введением пикротоксина в дозе 1.0-1.3 мг/кг. Повторные введения пикротоксина приводят к возникновению у животных судорожных проявлений возрастающей интенсивности до развития однократных генерализованных клонико-тонических припадков. Микроинъекция в хвостатые ядра крыс скополамина за 3-5 мин до очередной инъекции пиротоксина приводит к развитию у крыс клонико-тонических судорожных припадков с падением на бок. котооые повторяются по 10-15 раз (в среднем 13.8±1.2 раза). Один из припадков заканчивается развитием тонической экстензии задних конечностей и гибелью животных, летальность в условиях описываемого способа составляет 100%.ч>&^^