Питательная среда для культивирования микоплазм Советский патент 1989 года по МПК C12N1/20 C12Q1/04 C12N1/20 C12R1/35 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для накопления биомассы микоплазм и их выделения из исходного материала.

Цель изобретения - упрощение состава среды при сохранении ее ростовых свойств.

Пример 1. Сгустки крови человека, являющиеся отходами серологических лабораторий, разрезают на мелкие кусочки, разводят дистиллированной водой в соотношении 1:1 (вес: :объем) и кипятят 20 мин на водяной бане. Затем сгустки удаляют, перемалывают и вновь переносят в бульон. После охлаждения к смеси прибавляют трипсин из расчета 5 г на 1 л, доводят рН до 8,0 и инкубируют 2 ч при 37°С. Затем корректируют рН и вносят хлороформ из расчета 20 мл/л.

Переваривание ведут до содержания аминного азота 100 мг.%. Перевар кипятят и фильтруют, устанавливают рН 7,4-7,8, стерилизуют в автоклаве при 115°С (0,75 ати) 15 мин, хранят при 4°С до 3 мес.

Для получения сыворотки крови собирают сыворотки доноров 0(1) группы и стерилизуют фильтрованием. Для освобождения сыворотки от возможно присутствующих аитител к микоплазмам ее истощают взвесью микоплазм.

Для получения питательной среды компоненты смешивают в следующем соотношении, мас.%: 50%-ный дрожжевой экстракт 8; сыворотка крови человека 0(1) группы 10; глюкоза 0,5; хлористый натрий 0,5; перевар сгустков крови человека остальное.

Коррекции рН в готовой среде не требуется.

СП N9

м

tc ел

О5

Пример 2. Готовят среду в соответствии с примером 1, но компоненты берут в следующем соотношении, мас.%: 50%-ный дрожжевой экстракт 10; сыворотка крови человека 0(1) группы 15; глюкоза 0,75; хлористьш натрий 0,75; перевар сгустков крови человека остальное.

Пример 3. Готовят среду в соответствии с примером 1, но компоненты берут в следующем соотношении, мас.%: 50%-ный дрожжевой экстракт 15, сыворотка крови человека 0(1) группы 20, глюкоза 1, хлористый натрий) 1, перевар сгустков крови человека остальное.

Пример А, Микоплазму пневмонии штамм 13В выращивают на среде

по чувствительности питательная сред не уступает классической среде.

10

Использование среды позволяет упростить ее приготовление, удешевит процессы выделения и накопления биомассы миконпазм без изменения антигенных свойств.

Формула изобретения

Питательная среда для культивиро вания микоплазм, содержащая питатель ную основу, 50%-ный дрожжевой экстракт, стимулятор роста, глюкозу, хлористый {{атрий, отличающа яся тем, что, с целью упрощения состава среды при сохранении ее росуказанного .состава при 36°С в течение JQ свойств, в качестве питатель- 3 дн. На 4-е сутки слой микоплазм

НОИ основы она содержит перевар сгус ков крови человека, в качестве стимулятора роста - сыворотку крови человека 0(1) группы при следующем количественном соотношении компонентов, мас.%:

снимают 10 мл физиологического раствора и подсчитывают количество мико- плаэм (КОЕ/МП). В данном опыте урожай микоплазм составляет 7,0 Ig КОЕ/мл.

Пример 5. Используют среду в соответствии с примером 4, но используют штамм FH. Урожай микоплазм 6,5 Ig КОЕ/мл.

Пример 6. При исследовании 180 проб отделяемого носа и зева и 80 проб отделяемого цервикального канала выделено 8,3% и 23,7% соответственно микоплазм на среде PPLO 8,3% и 21,2% соответственно. Таким образом

; а

15272564

по чувствительности питательная не уступает классической среде.

Использование среды позволяет упростить ее приготовление, удешевить процессы выделения и накопления биомассы миконпазм без изменения антигенных свойств.

Формула изобретения

Питательная среда для культивирования микоплазм, содержащая питательную основу, 50%-ный дрожжевой экстракт, стимулятор роста, глюкозу, хлористый {{атрий, отличающаяся тем, что, с целью упрощения состава среды при сохранении ее рос свойств, в качестве питатель-

НОИ основы она содержит перевар сгустков крови человека, в качестве стимулятора роста - сыворотку крови человека 0(1) группы при следующем количественном соотношении компонентов, мас.%:

50%-ный Дрожжевой

экстракт8-15

Сыворотка крови

человека

0(1) группы10-20

ГлюкозаО 5 - 1

Хлористый натрий0,5-1

Перевар сгустков

крови человекаОстальное

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для выделения микоплазм и накопления биомассы. Цель изобретения - упрощение состава среды при сохранении ее ростовых свойств. В качестве питательной основы перевар сгустков крови человека (триптический перевар), в качестве стимулятора роста - сыворотку крови человека 0(I) группы, истощенную механизмами, 10-20 мас.%. В состав среды входят, мас.%: 50%-ный дрожжевой экстракт 8-15

глюкоза 0,5-1

хлористый натрий 0,5-1. Все компоненты перемешивают и объем среды доводят до 10 мл переваром сгустков крови. PH среды 7,4-7,8. Рост микоплазм - на 3-4-е сутки.