1
(21)4332839/28-14
(22)03.12.87
(46) 07.12.89. Бюл. № 45
(71)1-й Ленинградский медицинский институт им. акад. И.П.Павлова
(72)А.А.Тотолян и Н.В.Шамкова
(53)615.375 (088.8)
(56)Джондал М. Лимфоциты, выделение, фракционирование и характеристика. -М.: Медицина, 1980, с. 100-111.
(54)СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ Т-ЛШФОиИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
(57)Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано при оценке иммунного статуса человека. Цель изобретения - сокращение времени анализа
и упрощение способа. У обследуемых производят забор крови, выделение лимфоцитов, инкубацию их с частицами меламинформальдегидной смолы в течение 30 мин при температуре 4 С, препараты высушивают, окрашивают и под- считьшают число розеткообразующих клеток на 100 лимфоцитов. В сравнении с прототипом сокращено в 2 раза время анализа. В результате использования частиц меЛаминформальдегвдной смолы упрощена процедура анализа путем исключения этапов фиксации и отмывки и, кроме того, частицы неламин- формальдегидной смолы дают одинаковые результаты в сравнении с эритроцитами барана независимо от сроков их хранения. 2 табл.
г
(Л
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Способ определения В-лимфоцитов крови человека | 1987 |
|
SU1527591A1 |
| Способ определения нарушения иммунологического статуса онкологических больных | 1991 |
|
SU1820330A1 |
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВИРОВАННЫХ Т-ЛИМФОЦИТОВ В ОРГАНИЗМЕ ЧЕЛОВЕКА | 1992 |
|
RU2080598C1 |
| СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ИММУНОДЕФИЦИТНОГО СОСТОЯНИЯ | 1999 |
|
RU2179316C2 |
| Способ определения розеткообразующих клеток в биологических жидкостях | 1985 |
|
SU1364986A1 |
| СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ | 2001 |
|
RU2193778C1 |
| Способ определения дефекта антигеннезависимой дифференцировки В-лимфоцитов | 1987 |
|
SU1497574A1 |
| Способ определения Т @ - лимфоцитов человека | 1988 |
|
SU1561041A1 |
| Способ определения иммунокомпетентных клеток | 1988 |
|
SU1642397A1 |
| СПОСОБ ОДНОВРЕМЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ КЛЕТОК С РЕЦЕПТОРАМИ К БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫМ ВЕЩЕСТВАМ И ИХ ПОПУЛЯЦИОННОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ | 1994 |
|
RU2081418C1 |
Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано при оценке иммунного статуса человека. Цель изобретения - сокращение времени анализа и упрощение способа. У обследуемых производят забор крови, выделение лимфоцитов, инкубацию их с частицами меламин-формальдегидной смолы в течение 30 мин при температуре 4 °С, препараты высушивают, окрашивают и подсчитывают число розеткообразующих клеток на 100 лимфоцитов. В сравнении с прототипом сокращено в 2 раза время анализа. В результате использования частиц меламин-формальдегидной смолы упрощена процедура анализа путем исключения этапов фиксации и отмывки и, кроме того, частицы меламин-формальдегидной смолы дают одинаковые результаты в сравнении с эритроцитами барана независимо от сроков их хранения. 2 табл.
Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано при оценке иммунного статуса человека.
Целью изобретения является сокращение времени анализа и упрощение способа.
Способ осуществляют следующим образом.
В каждую лунку микрокамеры для иммунологических реакц1Ш (планшет Терасаки) вносят по 0,005мл лейкоцитов в концентрации 1,0-1,510 /мл и 0,005 мл суспензии частиц меламинфор- малъдегвдной смолы с диаметром частиц 5,0 мкм в концентрации 6,0-7,0 10 /мл. Камеры центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин, инкубируют
30 мин при 4°С, фильтровальной бумагой удаляют надосадок, камеры вы- .сушивают и окращивают по Лейшману. При микроскопировании подсчитывают количество розеткообразующих лимфоцитов на 100 лимфоцитов (за розетку принимают лимфоцит, присоединивший 3 и более частиц меламинформапьде- гвдной смолы) .
Пример 1.У16 практически здоровых людей определяют количество Т-лимфоцитов по предлагаемому способу.
Полученные результаты приведены в табл. 1.-,
Пример 2.У5 практически здоровых людей из венозной крови выделяют фракцию мононуклеаров, которую используют для постановки розеткооб- разования с частицами меламинформаль- дегвдной смолы. Затем полученную сус- пенэию лейкоцитов и частиц меламин- формальдегидной смолы инкубируют с моноклональными антителами ОКТ-11, меченньми флюоресценном. Определяют количество розеткообраэутощих лимфо- дитов (Е-РОЛ) и ОКТ-1 I лимфоцитов.
Полученные результаты приведены в табл. 2.
Таким образом, в предлагаемом спосебе отсутствуют этапы фиксации глу- таровым альдегидом (который является сильным канцерогеном и отмывания клеток физиологическим раствором. Кроме того, более чем в 10 раз сокращена длительность этапа приготовления суспензии индикаторных частиц, общая длительность способа составляет не более 60 мин, в то время как длительность известного способа 120-135мин,
Кроме того,при хранении эритроци- ты барана теряют свою активность (срок хранения не более 2 недель), частицы меламинформальдегидной смолы . дают одинаковые результаты независимо от сроков хранения.,
изобретения
Способ определения Т-лимфоцитов крови человека, включающий забор крови, выделение лимфоцитов, инкубацию их в присутствии индикаторных частиц, подсчет числа розеткообразующих клеток, отличающийся тем, что, с целью сокращения времени анализа и упрощения способа, в качестве индикаторных частиц используют частицы меламинформальдегидной смолы.
Таблица I
Таблица 2
