Изобретение относится к медицине, а именно к способам исследования крови при диагностике патологических состояний, и может быть использовано в ранней диагностике рака, при оценке эффективности лечения онкологических и почечных заболеваний.
Целью изобретения является ускорение способа.
Способ осуществляется следующим образом.
0,05 мл плазмы (сыворотки) крови разводят 0,90 мл физиологического раствора хлористого натрия, добавляют 0,05 мл 1 М ацетатного буфера (рН 4,5-4,6) и инкубируют 2-3 мин на кипящей водяной бане, охлаждают и центрифугируют 8-10 мин при 1500 об/мин. Из супернатанта отбирают 0,1 мл, смешивают с реагентом Bradford, спектрофотометрируют через 2-3 мин при длине волны 595 км и по калибровочной кривой, построенной для человеческого сывороточного альбумина, рассчитывают количество полипептидных компонентов в плазме (сыворотке) крови, которое выражается в мг/1 мл плазмы (сыворотки) крови
В таблице приведены результаты измерений количества полипептидных компонентов в сыворотке крови, рас- считанные по их содержанию в супер- натанте в зависимости от условий обработки пробы: рН и времени инкубации на кипящей водяной бане, а также при использовании известного способа (прототипа).
Как видно из таблицы, для полного осаждения сывороточных белков оптимальным является добавление буфера с рН Ј,5-4,6 с последующей инкубаци- ей пробы на кипящей водяной бане в течение не менее 2 мин.
Изменение рН буфера как в сторону увеличения, так и в сторону уменыпе- ни делает осаждение сывороточных беЛков менее полным, что приводит к снижению точности.
Увеличение времени инкубации пробы на кипящей водяной бане мало влияет на степень осаждения сывороточных белков.
Использование предлагаемого способа количественного определения полипептидных компонентов средней моле-
кулярной массы позволяет при сохранении точности сократить время центрифугирования до 8-10 мин.
Формула изобретения
Способ количественного определения полипептидиых компонентов средней молекулярной массы в крови, включающий разведение пробы крови, осаждение белков, центрифугирование с последующим спектрофотометрирова- нием супернатанта, отличаю -; щ и и с я тем, что, с целью ускорения способа, осаждение белков провдят обработкой пробы 1 М ацетатным буфером рН 4,5-4,6 с последующей инкубацией на кипящей водяной бане в течение не менее 2 мин.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ КРОВИ РЫБ | 1996 |
|
RU2129270C1 |
| Способ диагностики гломерулонефрита | 1984 |
|
SU1318910A1 |
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЪЮГИРОВАННОЙ ФРАКЦИИ КОРТИЗОЛА В МОЧЕ | 1995 |
|
RU2121686C1 |
| Применение сывороточного альбумина в качестве противомикробного агента | 2019 |
|
RU2716003C1 |
| СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОГО ЛЕЙКОЗА | 1991 |
|
RU2007720C1 |
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ ФИБРИНОГЕНА ПЛАЗМЫ КРОВИ ПО СОДЕРЖАНИЮ КАРБОНИЛЬНЫХ ГРУПП В ФИБРИНОВОМ СГУСТКЕ | 2014 |
|
RU2595806C2 |
| Способ диагностики острой стадии вирусного гепатита | 1980 |
|
SU1110443A1 |
| Набор для выделения экзосом | 2023 |
|
RU2824663C1 |
| Способ определения окислительно-модифицированных белков в биологических жидкостях | 2021 |
|
RU2754434C1 |
| СПОСОБ ОЦЕНКИ СОДЕРЖАНИЯ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ДЕСИАЛИРОВАННЫХ ЛИПОПРОТЕИДОВ НИЗКОЙ ПЛОТНОСТИ | 2015 |
|
RU2623879C2 |
Изобретение относится к медицине, а именно к способам исследования крови при диагностике патологических состояний, и может быть использовано для количественного определения полипептидных компонентов средней молекулярной массы в крови. С целью ускорения способа за счет полного выделения из пробы полипептидных компонентов, осаждение сывороточных белков проводят обработкой пробы 1 М ацетатным буфером, рН 4,5-4,6, с последующей инкубацией на кипящей водяной бане в течение 2-3 мин. 1 табл.
Не осаж- 4,9 3,8 3,9 4,5 Не осаж- 2,1 далисьдались
4,3 2,9 3,0 4,1 5
Не осаж- 4,2 2,8 2,8 3,5 Не осаждалисьдались
4,1 2,9 2,8 3,4
Данные прототипа
| Способ диагностики почечной недостаточности | 1980 |
|
SU931171A1 |
| Устройство для сортировки каменного угля | 1921 |
|
SU61A1 |
