Способ определения активности ревматического процесса Советский патент 1990 года по МПК G01N33/53 

i

(21)3937784/28-14

(22)14.06.85

(46) 07.01.90. Бюл. № 1

(71)Днепропетровский медицинский институт

(72)Г.В.Дзяк, Н.Е.Дулина и Н.Г.Папан

(53)615.375 (088.8)

(56) Об унификации клинических, лабораторных методов исследования. Приказ МЗ СССР № 290, 11.04.72.

(54)СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ РЕВМАТИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА

(57) Изобретение относится к медицине, в частности к- терапии, и может

использоваться для диагностики ревматических процессов. Пель изобретения - повышение точности диагностики за счет выявления поражения эндокарда. Лимфоциты пациента испытывают в тесте розеткообразовання с эритроцитами барана, нагруженными антигенами миокарда или эндокарда. При увеличении числа специфических розеткообра- эуюших лимфоцитов с антигенами миокарда по сравнению со здоровыми лицами от 16 до 20% при сохранении в пределах нормы количества розеток к эндокарду диагностируют миокардит, а при увеличении числа розеток от 21 до 30% - эндокардит.

Изобретение относится к медицине, в частности к терапии, и может использоваться для диагностики ревматических процессов. Цель изобретения - повышение точности диагностики за счет выявления поражения эндокарда. Лимфоциты пациента испытывают в тесте розеткообразования с эритроцитами барана, нагруженными антигенами миокарда или эндокарда. При увеличении числа специфических розеткообразовающих лимфоцитов с антигенами миокарда по сравнению со здоровыми лицами от 16 до 20% при сохранении в пределах нормы количества розеток к эндокарду диагностируют миокардит, а при увеличении числа розеток от 21 до 30% - эндокардит.

Изобретение относится к медицине, в частности к терапии, и может быть использовано для диагностики ревматических эндокардитов.

изобретения - повышение точности диагностики за счет выявления поражения эндокарда.

Способ осуществляют следующим образом.

I, Приготовление антигенов.

Белки эндокарда и миокарда очищают аффинной хроматографией нл конка- новалин А-Сефарозе. Фракцию тканевых гликопротеинов получают элитней 107- ным раствором метил-L, D-гликопирано- зида. Полученные фракции гликопротеинов миокарда и эндокарда исполъзукп для получения соответствующих антисывороток путем иммунизации кроликов.

Антисыворотку после истощения используют для регистрации тканевых

антигенов миокарда и эндокарда методом перекрестного пммуноэлектрофоре- за.

Во всех случаях обнаруживают 3 зоны иммунопреципитапии, соответствующие специфическим гликопротеинам миокарда и эндокарда. Специфические гли- копротеины миокарда и эндокарда им- мунологически различны.

II. Постановка Е-РОК с антигенами.

Берут 3-4 мл крови в пробирку с раствором гепарина (125 ед. и 1 мл крови). Кровь разводят в 2 раза Физиологическим раствором. На 2,0 мл смеси (Ьиколлверограйшта наслаивают разведенную кровь. Пробирки иентриЛу- гируют 20-30 мин при 1500 об/мин, кольцо лимфоцитов отбирают пастеровской пипеткой - выделяют лимЛокониент- рат. Дважды отмывают физиологическим раствором при 1500 об/мин (10 мин).

(/

С

С7

сх Ј Ј

Подсчитывают количество лимфоцитов н камере Горячева и Физиологическим раствором доводят до нужной концентрации. В опыт берут 0,2 мл лимФокон-, ценч ратл.

Готовят 5%-ну,п эритроцитов, барана, трижды отмывая их физиологическим раствором, получают 0,5%-ную взвесь. После тянизации эритроцитов JQ отмывают их трижды физиологическим раствором и сенсибилизируют антигена- Mi -эндокарда н миокарда (200 J в 1 мл) 30 мин в термостате при t 37 Г. Трижды отмывают физиологическим рас т- 75 ьором и ресуспочзирутот до первоначального объема. Лимфоциты больного смс ширанп с сенсибилизированными -эритроцитами барана (на I млн лимфоцитов 4 пли эритроцитов) и готовят 20 I%-ную взвесь на физиологическом растворе. Пробы инкубируют 45 мин при 37 С и оставляют в холодильнике 19ч, после чего считывают реакщпо - РОК.

При увеличении елепифических ро- 25 зеткообразугощих лимфоцитов с антигенами миокарда по сравнению со здоровыми лицами от 16 до 20% при сохранении в пределах нормы количества розеток к эндокарду диагностируют миокяр- -JQ дит, а при увеличении числа розеток от 21 до 30% - -эндокардит.

Пример 1. Бопьная О.,36 лет |- диагнозом: ревматизм, активность I ст,, ревматический миокардит,,,HI ст., поступила в клинику для уточнения диагноза и лечения. При проведении анализов получены следующие результаты: общий белок 73,8 г/л, альбумины 49%, глобулины: оС, 5,1%, oL240 9,2%, jl 12,7%, |f 24%

Проводитсч соответствующая тера- 1гия. Диагноз верифицирован.

Пример 2. Больной М., 17 чет поступил в стационар с диагнозом: ревматизм, активность II ст. - эндо- миокардит, формирующийся порок сердца, Н о . с г .

Белковые Фракции сыворотки крови: общий белок 75,9 г/л, альбумины 47%; глобулины: с, 4,8%, о 10,6%, /5 13,3%, |р 24,3%.

Исследование реакции специфического розеткообразования: количество розеток к эндокарду 17%, количество розеток к миокарду 20% (при норме 12% розеток).

У больного ревматизм, активность I ст., ревматический миокардит, Н о.ст. Диагноз верифицирован.

Обследование 65 больных ревматизмом, из них 39 больных с ревмоэндо- кардитом и 26 с ревмомиокардитом, показало диагностическую эффективность способа определения активности ревматического процесса.

Формула изобретения

Способ определения активности ревматического процесса путем исследования крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет выявления поражения эндокарда, из исследуемой крови выделяют лейкоциты и проводят реакцию розеткообразования с эритроцитами барана, сенсибилизированными антигенами, полученными из эндокарда или миокарда, и при увеличении розеткообра- зуюших клеток с антигеном миокарда по сравнению со здоровыми лицами до 16-20% и при сохранении в пределах

Реакция специфического розеткооб- pn-юьания. Количество розеток к миокарду 16%, к эндокарду 25%. У больной диагностирован ревмат гческий эндокар- 45 Н°РМЫ розеткообразующих клеток к эн- дит, возможно формирование порокадокарду диагностируют миокардит, а

сердца, II ст. активности ревмати-при увеличении розеткообраэующих клеческого процесса. от 21 до 30% - эндокардит.

Редактор В.Петрам

Составитель И.Башкаев Техред М.Дидык

Заказ 39

Тираж 501

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Проводитсч соответствующая тера- 1гия. Диагноз верифицирован.

Пример 2. Больной М., 17 чет поступил в стационар с диагнозом: ревматизм, активность II ст. - эндо- миокардит, формирующийся порок сердца, Н о . с г .

Белковые Фракции сыворотки крови: общий белок 75,9 г/л, альбумины 47%; глобулины: с, 4,8%, о 10,6%, /5 13,3%, |р 24,3%.

Исследование реакции специфического розеткообразования: количество розеток к эндокарду 17%, количество розеток к миокарду 20% (при норме 12% розеток).

У больного ревматизм, активность I ст., ревматический миокардит, Н о.ст. Диагноз верифицирован.

Обследование 65 больных ревматизмом, из них 39 больных с ревмоэндо- кардитом и 26 с ревмомиокардитом, показало диагностическую эффективность способа определения активности ревматического процесса.

Формула изобретения

Способ определения активности ревматического процесса путем исследования крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет выявления поражения эндокарда, из исследуемой крови выделяют лейкоциты и проводят реакцию розеткообразования с эритроцитами барана, сенсибилизированными антигенами, полученными из эндокарда или миокарда, и при увеличении розеткообра- зуюших клеток с антигеном миокарда по сравнению со здоровыми лицами до 16-20% и при сохранении в пределах

Н°РМЫ розеткообразующих клеток к эн- докарду диагностируют миокардит, а

Ко ррек то р С. Die к ма р

Подписное