Способ дифференциальной диагностики вяло текущего ревматизма и инфекционно-аллергического миокардита Советский патент 1987 года по МПК A61K39/00 G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к ревматологии, и может быть использовано в клинической практике при дифференциальной диагностике вялотекущего ревматизма и инфекционно- аллергического миокардита.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Содержание Т-, В-, О- и D-лимфо- цитов в периферической крови определяют методом двойного розеткообразо- вания с зимозаном. Для этого из периферической венозной гепаринизирован- ной крови выделяют лимфоциты в градиенте плотности фиколл-верографина, В силиконированную пробирку с суспензией лимфоцитов (2x10 лимф/мл) в среде 19 добавляют 0,5%-ную взвесь эритроцитов барана и 0,17%-ную взвес комплекса зимозан-комплемент. Затем последовательно смесь инкубируют при , осаждают центрифугированием, вновь инкубируют при +12°С, фиксирую глютаральдегидом и готовят мазок из тщательно ресуспензированного осадка с последующей его фиксацией в метиловом спирте и окраской метиловым зеленым по Брате. Т-лимфоциты опреде- ляют как Е-розеткообразующие клетки, В - как клетки, фиксировавшие на своей поверхности окрашенный комплекс з зимозанкомплемент, 0-лимфоциты - как клетки, не имеющие рецепторов ни к эритроцитам барана, ни к комплементу а D-лимфоциты, как двойные розетки т.е. несущие на своей поверхности рецепторы как к эритроцитам барана, та и к комплексу зимозан-комплемент.

Циркулирующие в крови иммунные комплексы определяют реакцией преципитации с 3,75%-ным полиэтиленглико- лем, мол.вес.6000. Для этого к предварительно раствор енной в боратном буфере (0,01М) сыворотке добавляют растворенный в этом же буфере поли- этиленгликоль. Затем инкубируют при комнатной температуре и сопоставляют с контрольным разведением сыворотки без полиэтиленгликоля спектрофотомет рическим методом при длине волны 450 нм.

Антителозависимую клеточно-опосре дованную цитотоксичность определяли спектрофотометрическим методом. Для этого из периферической гепаринизиро ванной крови выделяют лимфоциты в

градиенте плотности фиколл-верографина. В качестве клеток-мишеней используют эритроциты барабана, донатором антител для определения цито- токсичности служила стандартная кроличья антисыворотка в титре, превьгаа ющем агглютинирующий, т.е. 1/1280, чтобы предотвратить агглютинацию клеток-мишеней. Инкубацию клеток-эффекторов с клетками-мишенями проводят в соотношении 10:1 при в течении 18 ч. Цитотоксическую активность определяют по изменению оптической плотности супернатанта на спектрофотометре СФ-4А при длине волны 450 нм.

Ц р и м е р 1. Больной Ю., 16 лет поступил в стационар с жалдбами на периодические ноющие боли в области сердца, сердцебиение при физической нагрузке, слабость, общее недомогание. Данные объективного обследования не свидетельствовали с достаточной достоверностью в пользу вялотекущего ревматизма или инфекционного миокардита.

Больной был обследован, получены следующие результаты: Содержание

лимфоцитов Нормальное в крови больного, %

Т-4959,8-65,0

В-1311,8-14,2

0-37 . 21,9-25,7 D-10,7-1,0 ,

Антителозави- симая клеточ- но-опосредованная цитотоксичность, % 1825-30

Содержание иммунных комплексов, усл.ед.

0,075 0,03-0,045

Полученные данные подтверждают наличие иммунной перестройки организма по типу развития иммунокомплекс- ного поражения и свидетельствует о том, что больной страдет ревматизмом. Учитывая непродолжительный характер заболевания (3 мес. от начала заболевания), отсутствие данных, свидетельствующих об органическом по ражении сердца и наличии характерных иммунологических сдвигов, больному бып поставлен диагноз: ревматизм, активная фаза, 1-й степени активности, первичный ревмокардит с преимущественным поражением миокарда, XHKj . Больному был проведен полный курс противоревматической терапии, больной был взят на диспансерное наблюдение. В последующем при длительном наблюдении были выявлены признаки фомирования ревматического поражения клапанного аппарата сердца.

П.р и м е р 2. Больной Г., 23 лет ,поступил в стационар с жалобами на ноющие боли в области сердца, одышку при физической нагрузке, сердцебиение. Заболевание началось остро после перенесенного 2,5 мес. тому назад простудного заболевания.

Данные объективного обследования не давали достаточно достоверных данных в пользу ревматизма или инфекци- онно-аллергического миокардита. После иммунологического обследования были получены следующие результаты: Содержание лимфоцитов в крови больного,%Нормальное

содержание Т-5959,8-65,0

В-17.11,8-14,2

0-2121,9-25,7

Д-30,7-1,0

Антителозависи-

мая клеточно-опо- средованная цито- токсичность Нормальное

содержание

30 . 25-30 Содержание иммунных комплексов,

усл.ед., 0,045 0,030-0,045 Предположение о том, что у больного инфекционно-аллергический мио- кардит, нашло свое подтверждение в развитии клинической картины и в благоприятном исходе после назначенного патогенетического лечения. Дальнейшее наблюдение за больным подтвер дило предположение о неревматической природе заболевания.

Составитель Г.Крюкова Редактор А.Долинич Техред В.Кадар Корректор В .Бутяга

Заказ 7837/6 Тираж 617Подписное

ВНИШИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Производственно-полиграфическое предприятие,г.Ужгород,ул.Проектная,4

Обследовано 140 больных. У 132 больных был уточнен диагноз с использованием предлагаемого способа, что составило 94,3% случаев. В остальных 8 случаях, соответственно в 5,7% случаев, очевидно имели место различные варианты клинической гипердиагностики.

По сравнению с прототипом предла- гаемьш способ дифференциальной диагностики вялотекущего ревматизма и ин- фекционно-аллергического миокардита обеспечивает высокую точность, так как устраняется возможная однонаправленность иммунологических сдвигов, представляется возможно раняя диагностика первичного ревмокардита и вялотекущего ревматизма с преимущественным поражением миокарда, повышается точность дифференциальной диагностики на 38,3%, что позволяет правильно назначить патогенетическую терапию и предотвратить дальнейщее прог- рессирование заболевания, а значит, сократить сроки пребывания больного в стационаре и улучшить дальнейший прогноз.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики вялотекущего ревматизма и инфек- ционно-аллергического миокардита пу- тем исследования крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, в исследуемой крови определяют количество Т и О лимфоцитов, антителозависимую кле- точно-опосредованную цитотоксичность, уровень иммунных комплексов, сравнивают с нормой и по снижению Т, увеличению 0-лимфоцитов, снижению-антител озависимой клеточно-опосредован- ной цитотоксичности и увеличению уровня иммунных комплексов, диагностируют вяло текущий ревматизм, а по отсутствию таких изменений - инфекционно-аллергический миокардит.

Изобретение относится к ревматологии. С целью повьшения точности ,. дифференциальной диагностикой в периферической крови определяют Т-, В-, О- и D-лимфоциты, а также антитело- зависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность и уровень иммунных комплексов. При увеличении 0-лимфоци- тов и уровня иммунных комплексов и при снижении Т-лимфоцитов и антитело- зависимой клеточно-опосредованной ци- тотоксичности относительно нормы диагностируют вялотекущий ревматизм. Отсутствие таких изменений позволяет диагностировать инфекционно-аллерги- ческий миокардит. а « (Л с ISD 00 ;о 4 ;о