Способ диагностики туберкулеза Советский патент 1989 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано при диагностике туберкулеза.

Цель изобретения - повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом .

Для диагностики туберкулеза в качестве действующего начала в реакции розеткообразования используют фосфа- тидный антиген микобактерий туберкулеза, иммобилизованный на эритроцитах, при зтом в качестве диагностического признака учитьшают концентрацию В-розеткообразующих лимфоцитов (В-РОК), и при значении В-РОК не более 20% диагностируют туберкулез.

При постановке реакции розеткообразования с фосфатвдным зритроцитарным диагностикумом используют следующее соотношение ингредиентов реакционной смеси, мл: зритроцитарный фосфатидный диагностикум туберкулеза 2 в концентрации 1,5%;-комплемент 2; взвесь лимфоцитов 0,1; гемолитическая сыворотка с титром 1/2000 2.

Пример 1. Больная В. 26 лет поступила с подозрением на туберкулез гениталий. В анамнезе бесплодие, опсоменорея. В 16 лет оперирована по поводу разрыва кисты яичника с рез- ко выраженным спаечным процессом в брюшной полости. Туберкулезом ранее не болела.

Обследование проведено по следующей схеме. 5 мл гепаринизированной крови из вены больной отстаивают 1 ч при комнатной температуре, после чего отсасывают лимфоциты. К осадку лимфоцитов приливают среду № 199 в количестве, равном 0,7 объема лейкоцитарного слоя. Взвесь перемешивают. Параллельно разводят комплемент до- бавлен ем к 0,2 мл сыворотки крови белой мыши 1,8 мл физиологического раствора. Эритроцитарный фосфатидный диагностикум туберкулеза, представляющий собой эритроциты барана, сен- сибилизированные фосфатидным антигеном микобактерий туберкулеза, разводят физиологическим раствором до 1,5%-ной взвеси. 2 мл этой взвеси смешивают с 2 мл гемолитической кро- личьей сыворотки в субагглютинирую- щей концентрации, вьщерживают при 37°С в течение 30 мин, дважды отмывают физиологическим раствором и центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин. Осадок растворяют в 2 мл среды 199, смешивают с 2 мл комплемента белой мьши, выдерживают в течение 30 мин при 37°С, дважды отмывают физиологическим раствором и центрифугируют в том же режиме.

Из осадка берут 0,1 мл эритроци- тон сенсибилизированных фосфатидным антигеном) , смешивают с 0,1 мл лимфоцитов обследуемой (в данной смеси со держится 100 сенсибилизированных эритроцитов на 1 лимфоцит) и инкубируют 30 мин при 37°С. Далее в смес вносят 0,05 мл глютарового альдегида и 0,25 мл дистиллированной воды, пос ле чего центрифугируют в течение 5 мин при 1000 об/мин, сливают над- осадочную жидкость, добавляют 0,5мл среды К 1 99 и готовят мазок для микроскопии с окраской по Романовскому.

Под микроскопом просматривают ро- зеткообразующие В-лимфоциты. Учитывают лимфоциты, присоединившие не менее 3 эритроцитов.

При обследовании предварительно устанавливают концентрацию лимфоцитов крови по клиническому анализу крови для определения абсолютного содержания розеткообразующих В-лимфо- цитов по общеупотребительной {мето- Дике.

В данном примере В-РОК 13%, что меньше граничного значения, равного 20%. Поэтому у обследуемой диагностируют туберкулез . Этот диагноз под- твержден клинико-рентгенологически. На рентгеновских снимках матки и прц датков - облитерация и множественные обызвествленные лимфоузлы. Проба Коха с положительной очаговой реакцией.

Пример 2. Больная Б,22 лет. При поступлении диагноз - туберкулезный спондилит поясничного отдела позвоночника, туберкулез легких.

Обследование проводят как в примере 1 .

В результате установлено В-РОК/ 8%, что меньше граничного значения (20%) и позволяет диагностировать туберкулез .

После курса химиоретапии и соответствующей подготовки больная прооперирована. Произ.ведена абсцессото- мия, удаление диска. Диагноз подтвержден бактериологически и рентгенологически.

Пример 3. Донор С. 26 лет, был обследован на донорском пункте ЛПМИ. Обследование проведено как в примере 1.

У данного донора установлено В-РОК 29%, что больше граничного значения (20%). Поэтому сделан вывод о том, что донор здоров, что подтверждается данными его клинического обследования на донорском: пункте.

Использование предлагаемого способа позволяет повысить точность способа. Так, вероятность правильного диагноза при обследовании 34 больных туберкулезом в предлагаемом способе составляет 97,1%, тогда как в известном способе эта вероятность составляет 80,6%. Статистический анализ подтверждает значимость отличий в точности сравниваемых способов при уровне значимости не более 5%, т.е. точность при использовании предлагаемого способа возрастает на 17,5%.

Определенность диагностики в предлагаемом способе характеризуется вероятностью отнесения здорового лица к категории больных лишь 0,05, что вполне соответствует требованиям для статистически обоснованного применения предлагаемого диагностического признака.

Формула изобретения

Способ диагностики туберкулеза, включающий забор крови, вьщеление лимфоцитов, инкубацию их с эритроци- тарным диагностикумом, подсчет розеткообразующих клеток, отличающийся тем, что, с целью повьш1е- ния точности способа, используют

51527593

эритроцитарный диагностикум с иммо-барана и после подсчета розеткообрабипиэацией фосфатвдного антигена ми-зующих клеток диагностируют туберкукобактерий туберкулеза на эритроцитах лез по снижению их от 20% и менее.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано при диагностике туберкулеза. Цель изобретения - повышение точности способа. Проводят забор крови у больных, выделяют лимфоциты. Затем их смешивают с эритроцитарным фосфатидным туберкулезным диагностикумом, инкубируют и подсчитывают число розеткообразующих клеток, при количестве розеткообразующих клеток 20% и меньше диагностируют туберкулез. По сравнению с прототипом точность диагностики возрастала на 17,5%.