Способ определения сенсибилизации организма к аллергену Советский патент 1990 года по МПК A61B10/00 G01N33/48 

Изобретение относится к области медицины, а именно к аллергологии.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

В центрифужные пробирки разливают по 300 мкл гепаринизированной венозной крови. В опытные пробы прили- вают аллергены, в контрольную - равный объем растворителя аллергенов.

Пробы инкубируют в течение 1 ч при 37°С, после чего осторожно по стенке наслаивают охлажденный раствор верографина с удельной плотностью 1,077 г/см3. Далее пробирки центрифугируют при 1500 об/мин, в течение 35-40 мин. Клетки из интёрфазы осторожно забирают пипеткой, переносят каплю на предметное стекло и микро- скопируют при 45Ох. На стекле учитывают процентное содержание полнморфно-ядерных лейкоцитов на 200 просчитанных клеток. Затем высчитывают показатель отношения этих величин в опытной и контрольной проб и при повышении плотности нейтрофилов в пробе с аллергеном больше чем на 20% от контроля диагносцируют сенсибилизацию к данному аллергену.

Пример 1. Больные с полпи- нозами и атонической бронхиальной астмой (16 проб).

В опытные пробы добавлены аллергены, на которые были положительные провокационные ингаляционные тесты. Негативный контроль составили аллергены, на которые провокационные тесты были отрицательными.

При определении плотности нейтрофилов в 16 пробах выявлено у трех больных значение этого показателя больше на 20% по отношению к конт(Л

с

ел

со

ЭО

со

31

рЬльной пробе, что позволило определить сенсибилизацию к данному аллергену.

Пример 2. Точность и специфичность предлагаемого способа была также показана при оценке сенсибилизации организма к бактериальным ап- 4ергенам на примере повышенной чувствительности замедленного типа к аллергену гемолитического стрептококка у больных рожистым воспалением. При г остановке теста с коммерческим ал- хергеном гемолитического стрептококка положительные результаты наблюдались у 10 из 12 обследованных боль- пых рожей (83,3+10,8%), при этом среднегрупповые значения опытных и контрольных проб достоверно различались между собой (42,5+5,0 и 21,2+5,0% соответственно, р 0,01), тогда как по результатам негативного контроля (бруцеллин) аналогичные показатели между собой достоверно не

различались (27,,7 и 21,2±5,0% со- ре лью повышения точности способа, пробтветственно, р 0,4). Кроме того, имело место значимое отличие средних значений ИС позитивного и негативного контролей (2,,5 и 1,7+0,2 со- этветственно, р «с 0,03).

В донорской группе положительные результаты регистрировались в 4 из 15 случаев (26,7+11,4%), но по сред- Йегрупповым значениям статистически

30

водят исследование двух проб с аллергеном и без него, при этом определяют плотность нейтрофилоз при разделении в градиенте раствора ве- рографина с удельной плотностью 1,077 г/см3 и при повышении плотности нейтрофилов в пробе с аллергеном больше 20% от контроля диагносцируют- сенсибилизацию к данному аллергену.

значимое различие отсутствовало (в опыте 4,0+0,8%, в контроле 4,0+ +0,8%, р 0,1, ИС 0,95+0,1). Наблюдаемые 4 случая положительных результатов, очевидно, были связаны с наличием сенсибилизации к аллергену гемолитического стрептококка у условно здоровых взрослых доноров.

Способ позволяет повысить точность определения сенсибилизации к аллергену, особенно хорошо работает способ при определении сенсибилизации к пыльцевым аллергенам и бактериальным. В 6 из 8 случаев (Р «с 0,05) точно определя ет ся аллер ге н.

Формула изобретения

Способ определения сенсибилизации организма к аллергену путем забора крови, введения аллергена и определения состояния нейтрофилов, отличающий ся тем, что, с це-

0

водят исследование двух проб с аллергеном и без него, при этом определяют плотность нейтрофилоз при разделении в градиенте раствора ве- рографина с удельной плотностью 1,077 г/см3 и при повышении плотности нейтрофилов в пробе с аллергеном больше 20% от контроля диагносцируют- сенсибилизацию к данному аллергену.

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии. Цель - повышение точности способа. Способ включает исследование сенсибилизации организма к аллергену путем забора крови, приготовлении двух проб с аллергеном и без него. Далее приготовление определений плотности нейтрофилов при разделении в градиенте верографине с удельной плотностью 1,077 г/см³, и при повышении показателя плотности нейтрофилов в пробе с аллергеном по отношению к контрольной больше 20% диагностируют сенсибилизацию к данному аллергену. Способ позволяет точно определить наличие сенсибилизации к определенному виду аллергена.