Способ диагностики респираторных аллергозов Советский патент 1989 года по МПК G01N33/497 

Изобретение относится к-медицине и используется в частности, для диагностики респираторных аллергозов в любой период заболевания о

Целью изобретения является повышение точности и снижение травматичности способа за счет измерения хеми- люминесценции конденсата выдыхаемого воздуха

Способ осуществляется следующим образом.

Больному утром натощак, после тщательного полоскания рта физиологическим раствором, предлагают выдыхать воздух в конденсоприемник, содержащий камеру, охлажденную льдом, в течение 30 мин. Полученный конденсат разливают во флаконы по 0,5 нп В контрольный флакон добавляют 0,05 мл физиологического раствора, в опытные - по 0,05 мл исследуемых аллергенов (растительного, бактериального, эпи-. дермального, грибкового и др. происхождения). Во все пробы вносят по . - 0,05 мл 2.8 мН ояг.тнопя люминола и, после 30-минутной инкубации в термостате - 0,1 мл 3%-ного раствора перекиси водорода. Проводят измерение светосуммы хемилюминесцентного свечения контрольных и опытных проб за 10 с с помощью ФЭУ-39, и при увеличении числа импульсов в опытной пробе в 2 и более раз по сравнению с контрольной диагностируют специфический аллерген респираторного тракта, а следовательно, респираторный аллергоз.

сл to

со

Пример 1. Ребенок К,, 4 лет, поступил с жалобами на приступы удушья, возникающие, в основном, внезапно, среди полного здоровьяс, В весенне-летний период приступы чаще возникают на улице, в осенне-зимний - чаще дома. Ребенок поступил в период обострения с выраженными признаками бронхиальной осбтрукциио Состояние средней тяжестио Одьшка смешанного преимущественно экспираторного характера, частота дыхания - 38 в минуту. Кожные покровы бледные, нери- оральный цианоз, синева под глазами о При физикальном исследовании: коробочный оттенок перкуторного тона над всей поверхностью легких; дыхание жесткое, выдох удлинен, рассеянные сухие и разнокалиберные малозвучные хрипы с двух сторон Границы сердца в пределах возрастной нормы, тоны несколько приглушены, тахикардия (частота сердцебиения 120 в минуту) .

Анализ крови: эритроциты 4,5 10 /лi гемоглобин 125 г/л; лейкоциты 6,4и1Г) /Л , формула крови: э-17; п-1, с-30; л-48; м-4; СОЭ-6 мм/ч.

Подбор испытуемых аллергенов произведен с учетом тщательного анализа анамнеза жизни ребенка. Было создано I8 проб (17 опытных и одна контрольная). В первую (контрольную) пробу добавляли 0,05 мл физиологического раствора, во 2-18-ю добавляют по 0,05 мл следующих исследуемых аллергенов: 2-я проба - домашняя пыль, 3-я - пыль подсолнуха, 4-я - пыль кукурузы, 5-я - пыль ольхи, 6-я - пыль пырея, 7-я пыль костра, 8-я - пыль лещины, 9-я - пыль полыни, 10-я - пыль ржи, 11-я - пыль одуванчика, 12-я - пыль клена, 13-я - пыль дуба, 14-я - пыль лебеды, 15-я - кошачья шерсть, 16-я - коровья шерсть, 17-я - кроличья шерсть, 18-я - собачья шерстьо

Для проведения диагностики респираторного аллергоза согласно предлагаемому способу у больного утром натощак После полоскания рта физиологическим раствором проведен забор конденсата респираторного тракта, который распределяли в контрольную пробу и в пробы, содержащие исследуемые сшлергены по 0,5 мл,. Во все пробы вносили по 0,05 мл 2,8 мМ раствора люминола и, после инкубации в

термостате в течение 30 мин вносили О , 1 мл 3%-ного раствора перекиси водорода, затем проводили измерение светосуммы хемилюминесценции за 10 с с помощью ЛЭУ-39.

В таблице приведены полученные результаты исследований.

0

5

0

5

0

Как свидетельствуют приведенные

данные, повьш1ение хемилюминесцентно- го свечения в 2 и более раз по Сравнению с контрольной пробой отмечалось в пробе № 3 (пыльца кукурузы), № 6 (пыльца пырея), № 13 (пыль дуба) и № 7 (пыль костра). Наиболее высокие значения хемилюминесценции отмечены в пробе № 5 (пыль ольхи) и № 14 (пыль лебеды).

Результаты полученных исследований позволили диагностировать респираторный аллергоз - повышенную чувствительность к указанным растительным аллергенам и отсутствие сенсибилизации к другим испытуемым аллергенам (растительного и бактериального происхождения). Приступы удушья зимой были связаны с наличием печного отопления, в летнее время - с атопи- ческой сенсибилизацией к растительным (пыльцевым) аллергенам

Учитывая отсутствие обострения заболевания в настоящее время, для подтверждения диагностической значимости указанных аллергенов ребенку проведено кожное тестирование. При этом положительные реакции, проявляющиеся на коже в виде волдыря с ди5

аметром 0,5 мм, окруженного гиперемией, получены с аллергенами, вызывающими усилие хемилюминесценции конденсата респираторного тракта в 2 и более раз (пыль подсолнуха, пыль пырея, пыль костра, пыль дуба). Кожная реакция на пыль ольхи и пыль лебеды была резко положительной (волдырь с гиперемией в диаметре более 10 мм) что подтверждает высокую точность предлагаемого способа. При использовании аллергенов, не вызывающих изменения вспышки хемилюминесценции, кожные реакции были отрицательными.

Провокационный ингаляционный тест был проведен с этиологически значимым аллергеном (пыльцой пырея) и этиологически незначимым аллергеном (пыльцой одуванчика), однако в обо- их случаях получен положительный результат, проявляю1цийся бронхоспаз- heoM (коэффициент бронхоспазмы составлял соответственно 23 и 25%).

П р и м е р 2. Ребенок С., 4 лет, поступила с диагнозом: бронхиальная астма, смешанная форма, тяжелое течение, приступный период. Выражена бледность, синева под глазами, пери- оральный цианоз, экспираторная одыш ка. В легких тимпанический оттенок перкуторного тона, дыхание ослаблено выдох удлинен, множество рассеянных сухих и разнокалиберных незвучных влажных хрипов с двух сторон. Из анамнеза выяснено, что девочка болеет в течение 1,5 лет. Приступы удушь возникают как в связи с ocтpы fи респираторными заболеваниями, так и вне вирусно-бактериального поражения респираторного тракта.

Было создано 29 проб. Кроме перечисленных в примере I проб с аллергенами растительного и эпидермального Происхождения были созданы пробы с грибковыми аллергенами: Альтернария, Кладоспориум, Пенициллинум, Ботрис, Аспергилгас; а также бактериальными аллергенами: нейссерия катарралис, гемофилюс инфлюенце, гемолитического стрептококка, гемолитического стафилококка, бациллюс субтиллис, кишечной папочки.

Конденсат из респираторного трак- та больного был собран за 2 дня (до проведения исследования конденсат, собранный в первый день хранили в морозильном отделении холодильника).

Q

0

5 0

,

5

0

176

Всего было co6paFio 30 мп конденсата, которые разделили на пробы по 0,5 мЛ и провели исследование согласно методике предлагаемого способа. В ре- зультате проведенных исследований получены следующие данные: хемилю- минесцентное свечение в контроле 223510 имп,/10 CJ в пробе, содержащей аллерген нейссерия катарралис 506171 имп./10 С} в пробе, содержащей аллерген рода Аспергилюс 455521 имп./10 С} в пробе, содержащей пыльцу полыни 532900 имп./10 с. Хемилю- мицесцентное свечение в пробах с другими аллергенами существенно не отличалось от такового в контроле На основании усиления хемилюминесценции в пробах, содержащих аллергены нейссерия катарралис, грибы рода Аспергилюс и пыльцу полыни, в 2 и более раз по сравнению с контролем установлена диагностическая значимость указанных аллергенов

Дпя подтверждения точности способа проведена аллергодиагностика известными методами. Учитывая выраженное обострение, постановка ингаляционного проноклционного теста и кожного тестирования была невозможной;, Исследование проведено методами in vitro. Получены следующие результа- тЫо Положительные данные, свидетельствующие о сенсибилизации к нейссерия катарралис получены в реакции бластной трансформации (РБТЛ с ФГА 21,5%; РБТЛ с нейссерия катарралис 41%), в то время как при исследова//

НИИ другими методам (ППН, реакция дегрануляции базофилов, торможение миграции лейкоцитов) специфическая сенсибилизация к этому аллс ргену не обнаруживалась. Положительная реакция на пыльцу полыни (25%) получена методом дегрануляции базофилов, в то Время как проведение других проб in vitro (РБТЛ, реакции торможения лейкоцитов, ППН) не дали положительных результатов Специфическую сенсибилизацию к грибкам рода Аспергилюс удалось выявить только методом ППН (0,24).

Выявленный спектр этиологически значимых бактериа.пьиих аллергенов у данного больного явился обоснованием для проведения антибактериального лечения, что позволило быстро ликвидировать явления обострения.

Учитывая то, что грибки рода Асперги люс преимущественно вегитируют в сырых помещениях, дано заключение о необходимости улучшения квартир- ных условий.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет достоверно и объективно диагностировать респираторные аллергозы и специфичность аллергенов. Точность диагностики по предлагаемому способу составляет 98%, Способ абсолютно безвреден для больного, что позволяет проводить тести- рование в любой период заболевания

8

Формула изобретения

Способ диагностики респираторных аллергозов путем оценки аллергической реакции, отличающийся тем, что, с целью повьпаения точности и снижения травматичности, производят сбор конденсата из выдыхаемого -. воздуха, добавляют к нему исследуемый аллерген, раствор люминола и раствор перекиси водорода, затем измеряют интенсивность хемилюминесцен- ции полученного образца и при увеличении ее значения в 2 раза и более относительно контрольной пробы, диагностируют респираторный аллергоз.

Изобретение относится к медицине, в частности к аллергологии. Целью является снижение травматичности и повышение точности. Для этого у больного натощак производят забор конденсата выдыхаемого воздуха, добавляют исследуемый аллерген, раствор томинола, смесь термостатируют 30 мин, добавляют перекись водорода и измеряют светосумму хемилюминесценции и при увеличении ее значения в 2 раза и более относительно контрольной пробы не содержащей аллергена, диагностируют респираторный аллергоз. Способ абсолютно безвреден для больного, что позволяет проводить тестирование в любой период заболевания. Точность диагностики составляет 98%. 1 табл.