Питательная среда для культивирования микобактерий туберкулеза Советский патент 1990 года по МПК C12N1/20 C12N1/20 C12R1/32 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к диагностике туберкулеза.

Цель изобретения - повышение выхода биомассы микобактерий.

Среду готовят следующим образом.

Дистиллированную воду подогревают до 50°С и последовательно растворяют: железоаммиачные квасцы, магний сернокислый, натрий лимоннокислый од- нозамещенный или натрий гидроцитрат 1,5-водный, калий фосфорнокислый од- нозамещенный. Полученный раствор пот догревают до 90 С, растворяют 2-ами- ноглютаровую кислоту (глютаминовую кислоту) встряхивают, добавляют глицерин, После охлаждения раствора до комнатной температуры производят коррекцию рН среды путем добавления 5%-ного раствора едкого натрия до рН 7,0, после чего добавляют адениловую кислоту (МАП), Среду автоклавируют при 0,5 атм в течение 30 мин. Приготовленную среду используют в микробиологической диагностике туберкулеза, используют как основу для приготовления специальных сред для выявления - форм микобактерий туберкулеза, а Также для получения большой биомассы микроорганизмов при производстве вакцин БЦЖ и туберкулина.

СП

ел

01

со

СП

00

Пример 1. Готовят следуюие навески компонентов, мас.%: Железоаммиачные

квасцы0,004

Магний сернокислый0,04 Натрий лимоннокйс- лый однозамещенный

или натрий гидро-JQ

цитрат 1,5-водный 0,08 Калий фосфорнокислый однозамещенный 0,4 2-Аминоглютаровая

кислота0,4 jj

Глицерин2 0

Адениловая кислота 0,006 Вода дистиллированнаяОстальноеВыход биомассы при выращивании на 20 реде данного состава: штамм Н-37 У-253 мг, штамм БЦЖ 191 мг, дикого тамма 221; мг.

Пример 2. Готовят навески омпонентов, мас.%:25

Железоаммиачные квасцы0,005

Магний сернокислый 0,05 Натрий лимоннокислый однозамещенный или натрий гидроцитрат 1,5-водный0,1

Калий фосфорнокислый однозамещенный 0,6 2-Аминоглютаровая

кислота.0,7

Глицерин3,0

Адениловая кислота 0,01 Вода ДистиллированнаяОстальноеВыход биомассы при выращивании на реде данного состава: штамм Н37 РУ 88 мг, штамм БЦЖ 208 мг, дикого тамма - 232 мг (по сухой массе).

Пример 3. Готовят навески 45 омпонентов, мас.%: Железоаммиачные

квасцы0,006

Магний сернокислый0 06Натрий лимоннокислый однозамещенный или натрий гидроцитрат Г, 5-водный 0,15 Калий фосфорнокислый однозамещенный 0,9

30

50

55

Q

j

0

5

5

1,0 3.5

0,05

0

0

5

2-Аминоглютаровая кислота Глицерин Адениловая кислота

Вода дистиллированнаяОстальноеВыход биомассы при выращивании на среде данного состава: штамм Н-37 РУ 269 мг, штамм БЦЖ 198 мг, дикого штамма 218 мг (по сухой массе).

Среда повышает выход сухой биомассы микобактерий в 1,8-2,2 раза по сравнению со средой Школьниковой, на которой выход биомассы штамма Н-37 РУ 158 мг, штамма БЦЖ 131 мм, дикого штамма 143 м.

Формула изобретения Питательная среда для культивирования микобактерий туберкулеза, содержащая магний сернокислый, калий фосфорнокислый однозамещеннБ1Й, натрий лимоннокислый, соль железа, стимулятор роста, глицерин и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения выхода биомассы, в качестве натрия лимоннокислого она содержит натрий лимоннокислый однозамещенный или натрий гидроцитрат 1,5-водный, а качестве соли железа она содержит Железоаммиачные квасцы, а в качестве стимулятора роста - 2-аминоглютаровую кислоту и адениловую кислоту.при следующем ко- - личественном соотношении компонентов , мае.%:

Желе зоаммиачные квасцы0,004-0,006

Магний сернокислый0,04-0,06 Натрий лимонно- кислый однозамещенный или натрий гидроцитрат 1,5- водный 0,08-0,15 Калий фосфорнокислый однозамещенный0,4-0,9 2-Аминоглютаровая кислота 0,4-1,0 Глицерин2,0-3,5 Адениловая кислота 0,006-0,05 Вода дистиллированная Остальное

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к диагностике туберкулеза. Цель изобретения - повышение выхода биомассы микобактерий. Для приготовления среды в 100 мл дистилированной воды подогревают до 50°С и последовательно растворяют железоаммиачные квасцы 0,004 - 0,006 г, сернокислый магний 0,04 - 0,06 г, лимоннокислый однозамещенный натрий или натрий гидроцитрат 1,5-водный 0,08 - 0,15 г, фосфорнокислый однозамещенный калий 0,4 - 0,9 г. Полученный раствор подогревают до 90°С, растворяют 2-аминоглютаровую кислоту 0,4 - 1 г, встряхивают, добавляют глицерин 2 - 3,5 г. После охлаждения раствора до комнатной температуры проводят коррекцию PH среды путем добавления 5%-ного раствора едкого натрия до PH 7, затем добавляют адениловую кислоту 0,006 - 0,05 г. Среду автоклавируют при 0,5 атм 30 мин. Среду используют как основу для приготовления специальных сред. Она повышает выход сухой биомассы микобактерий в 1,8 - 2,2 раза по сравнению со средой Школьниковой.