Способ определения пластической функции миокарда на гистологическом препарате Советский патент 1990 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической и экспериментальной кардиологии.

Целью изобретения является повышение точности способа о

Способ осуществляют следующим образом.

Кусочек миокарда, который получают во время операции или при аутопсии, произведенной в течение 1 ч после констатации биологической смерти, помещают на подложке в жидкий азот. Затем приготавливают криостатные срезы толщиной Ю мкм„ Их высушивают на воздухе, фиксируют смесью метиловый спирт : ледяная уксусная кислота в отношении 3:1 в течение 10 мин, споласкивают дистиллированной водой. После высушивания препараты обрабатывают в 2 н. растворе муравьиной кислоты в течение 20 мин„ по окончании инкубации стекла споласкивают дистиллированной водой, высушивают на воздухе и окрашивают 50%-ным раствором нитрата серебра. После окрашивания серебром препараты снова тщательно ополаскивают дистиллированной водой, высушивают на воздухе и в течение 40 с подкрашивают 1%-ным раствором краски Гимза, приготовленной на фосфатном буфере с рН 6,8.

В окрашенных серебром препаратах ядра кардиомиоцитов легко отличаются |от ядер других видов клеток их укрупненным размером. Анализ последних осуществляют под иммерсионным объективом с увеличением ЮООх. В каждом ядре кардиомиоцита оценивают общее число ядрышек и содержание в них гранул серебра. При этом показателем низкой белок-синтезирующей активности кардиомиоцитов считается уменьшесл

о о

00 N9

Јь

ние в них гранул серебра (ниже 6), а высокой - увеличение гранул серебра в ядрышке (выше 15), На основании анализа белок-синтезирующей готовности у 100-200 кардиомиоцитов рассчитывают среднее содержание гранул серебра в ядрышках одного кардио- миоцита, а также процентное содержание клеток с низким, высоким и нормальным количеством гранул серебра в ядрышках.

Пример 1. Больной, 49 лет, поступил в клинику с жалобами на приступообразные боль- в области грудины, проявляющиеся при ходьбе. Болен в течение 6 лет. Два года назад перенес инфаркт миокарда, за 2 мес до поступления появилось уча- щдние приступов стенокардии, приступы острой коронарной недостаточности На ЭКГ - ритм синусовый, рубцовые изменения на задне-боковой стенке левого желудочка. Данные коронарогра- фии: полная окклюзия передней межжелудочковой артерии в проксимальной трети,стенозирование (25%) просвета огибающей артерии. На киновентрику- лограммах сокращение и опорожнение левого желудочка удовлетворительное. ВЗят кусочек миокарда для исследования во время операции наложения м ммарно-венечного анастомоза из об/ласти верхушки левого желудочка, которая снабжается кровью передней межжелудочковой артерии. Биоптат поместили в жидкий азот, далее приготовили криостатные срезы толщиной 10 мкм, высушивали на воздухе, про- фиксировали смесью метиловый спирт и ледяная уксусная кислота, обрабатывали в течение 20 мин в 2 н. растворе муравьиной кислоты, промыли дис- стиллированной водой и высушили на воздухе. Срезы импрегнировали 50%-ны водным раствором нитрата серебра, г вешанным на стекле с 2%-ным растворим желатины. Окраску препаратов осуществляли во влажной камере при 69еС в течение 2 мин 30 с. После этого их

0

5

0

5

0

5

0

5

тщательно споласкивали дистилирован- ной водой и докрашивали 1%-ным раствором краски Гимза, В просмотренном препарате 65% кардиомиоцитов были низкоактивными, содержали 1-5 гранул серебра в ядрышках, а в остальных со- шержание гранул серебра не превышало контрольный уровень, что в целом определяло низкую белок-синтезирую- щую и пластическую функцию миокарда.

Пример 2. Больной, 52 лет, поступил с жалобами на приступообразные боли в области грудины.

Коронарография не выявила окклю- зионных изменений в питающей анализируемый участок миокарда передней межжелудочковой артерии, взят биоптат миокарда, среднее содержание гранул серебра в ядрышках кардиомиоцитов равно 12,7. При этом низкое содержание гранул серебра в ядрышках имели место в 11% клеток, в 63% оно не отличалось от контрольного уровня, в 26% было выше 35 гранул серебра на ядро, что позволило определить высокую пластическую функцию кардиомиоцитов миокарда

I

Способ позволяет повысить точность оценки пластической функции миокарда, прогнозировать вероятность развития инфаркта миокарда, нарушение ритма сердечной мышцы, сердечной недостаточности.

Формула изобретения

Способ определения пластической функции миокарда на гистологическом препарате путем окрашивания ядрышек кардиомиоцитов, отличающий- с я тем, что, с целью повышения точности способа, в ядрышках определяют аргентофильные гранулы, при этом в качестве красителя используют 50%-ный раствор нитрата серебра, а пластическую функцию кардиомибциатов определяют по содержанию аргенто- фильных гранул.

Изобретение относится к медицине. Целью изобретения является повышение точности определения пластической функции миокарда. Цель достигается окрашиванием биоптата миокарда в 50%-ном растворе нитрата серебра и выявлением в кардиомиоцитах гранул серебра в ядрышках. При снижении содержания гранул серебра в клетках ниже 6 на одну клетку определяют низкую пластическую функцию миокарда, а соответственно, и возможность развития ИБС или инфаркта.