Способ определения противовирусных антител Советский патент 1990 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической иммунологии, и может использоваться в серологической диагностике ряда инфекционных заболеванийо

Целью изобретения является повышение чувствительности способа.

Способ осуществляют следующим образом

Исследуемую сыворотку объемом 0,1 мл разводят физиологическим раствором (0,9%-ным раствором хлорида натрия) и прогревают на водяной бане при +56°С в течение 30 мин, после чего вносят бараньи эритроциты 50%-ной концентрации в соотношении О,1 мл на 1 мл разведенной сыворотки.

В каждый ряд раз ведений сыворотки добавляют 0,025 мл соответствующего

раствора реополиглюкина на физиологическом растворе в любой из приведенных ниже концентраций - 1%, 2%, 3%. Контакт проводят в течение 1-2 ч при комнатной температуре.

По окончании инкубации в каждую лунку добавляют по 0,025 мл хорошо . перемешанной 1%-ной взвеси антигенного диагностикума и по наличию агглютинации эритроцитов в пробах определяют титр антитело

В качестве контроля проводят следующие реакции:

а) при контроле на агглютинацию с реополиглюкином используют 0,025 мл нормальной кроличьей сыворотки, к которой добавляют 0,025 мл реополиглюкина в соответствующем разведении и инкубируют при комнатной температусл J

ел

о

О5

ре в течение 1-2 ч По окончании инкубации добавляют 0,025 мл 1%-ной взвеси диагностикума;

б) при контроле на спонтанную агглютинацию используют 0,025 мл нормальной кроличьей сыворотки, к которой добавляют 0,025 мл изотонического раствора хлорида натрия и 0,025 мл 1%-його антигенного диагнос тикума.

Способ иллюстрируется следующими (примерами.

Пример 1р Больная Ж., поступила с клиническим диагнозом: корь средней тяжести. Проводилось серологическое обследование больной с применением метода парных сывороток с интервалом 7 дней. Сыворотку больной обрабатывали 1%-ным раствором реопо- лиглюкина в равных объемных соотношениях по 0,025 мл в течение 90 мин : последующей постановкой РПГА по описанной выше методике. Полученные титры реакции составили 1:320 и l:320. Б дальнейшем получено сероло- рическое подтверждение кори.

Пример 2. Больная Т., 31 год Поступила с диагнозом: острый гастро |энтерит средней тяжести. При сероло- гическом обследовании с использованием метода парных сывороток.(с интервалом между взятием крови 7 дней) |титр РПГА составил 1:80 и 1:320 соответственно. Проводилась также РПГА п

5

Q

0

5

предлагаемому способу, согласно которому сыворотки больной предварительно обрабатывались 2%-ным раствором рео- полиглюкина в равных объемных соотношениях в течение 1 ч0 По истечении сроков инкубации проставляли РПГА по. указанной выше методике. Титр РПГА составил в этом случае соответственно 1:640 и 1:2560 о

Таким образом, применение предлагаемого способа позволяет:

1.Повысить чувствительность РПГА в 6-8 раз по сравнению с прототипом,,

2.Осуществлять раннюю серологическую диагностику инфекционных заболеваний,,

3.Осуществлять серологическую диагностику стертых форм инфекционных заболеваний,,

Формула изобретения

Способ определения противовирусных антител,включающий забор крови, выделение сыворотки, разведение ее, инкубацию с эритроцитарным антигенным диагностикумом с последующим выявлением антител по агглютинации тэритроцитов, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, сыворотку после разведения смешивают с 1-3%-ным раствором реополиглюкина в соотношении 1:1 и инкубируют в течение 1-2 ч.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической иммунологии. Цель изобретения - повышение чувствительности способа. У обследованных проводят забор крови, выделение сыворотки. Затем сыворотку разводят и добавляют к разведениям 1 - 3%-ный раствор реополиглюкина в объемном соотношении 1 : 1. Смесь инкубируют при комнатной температуре в присутствии эритроцитарного антигенного диагностикума. Наличие антител в пробе сыворотки определяют по агглютинации эритроцитов. При использовании способа повышается выявляемость противовирусных антител в 6 - 8 раз в сравнении с прототипом.