Способ определения сенсибилизации организма Советский патент 1990 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к биохимическим неспецифическим способам определения состояния сенсибилизации организма и может быть использовано в практической медицине и биологии.

Цель изобретения - повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом,

В электронную ячейку вводят раствор ферро-феррицианида калия (ФФК),переме- шивают на магнитной мешалке, измеряют окислительно-восстановительный потенциал (ОВС) Е 0. Затем вносят пробу, включают секундомер и через фиксированное время измеряют и регистрируют значение потенциала ОВС (Е t). Вычисляют значение Aft

Eo-Et.

О наличии сенсибилизации судят по изменению Aft определяемой пробы крови или

ее фракции относительно аналогичной пробы здорового донора (или интактного животного) в случае определения сенсибилизации у животных.

П р и м е р 1, На обезжиренный бумажный фильтр отбирают 0,2 мл крови здорового 18-летнего студента и фильтр высушивают. Мелко нарезанный фильтр с отобранной кровью заливают 20 мл раствора ферро-феррицианида калия, приготовленного с использованием 1,0 М NaOH, причем концентрация окисленной и восстановленной форм К 3 Fe(CN) 6 /К 4 He(CN) 6 равна 5- 10/1- 10 N, перемешивают в течение 10 мин при 20° С. Потенциал ОВС измеряют также при 20° С до и после введения исследуемого материала. Вычисляют

Afio Е о - Е 10 410-353 57 мВ, где Е о - потенциал до введения ФФК:

О

о

СА) СО О

О

ЕЮ - потенциал после инкубации с ФФК.

П р и м е р 2. На обезжиренный бумаж- фильтр отбирают 0.2 мл крови рабоче- го, контактирующего в производственных 5 условиях с продуктами микробиологического синтеза и сенсибилизированного к дрожжеподобным грибам, и фильтр высушивают. Далее способ проводят по примеру 1. BычиcляютДf10. которая равна 62, что го- 10 ворит о сенсибилизации организма. У здоровых ДГю составляет 58,6± 0,8 мВ.

Примерз. Выделяют сыворотку из 1,0 мл крови интактной морской свинки- самца весом 230 г. В электролитическую 15 ячейкупомещают20мл ФФК, измеряют его потенциал (0 410 мВ), вводят 0,2 мл сыво- роТки и через 5 мин измеряют значение потенциала системы (Е5 ЗВОмВ). При зтом Дf5COcтaвляeт40мB, в норме-40,2 ±0,2 мВ. 20 На основании зтого можно сделать вывод, что организм морской свинки не сенсибилизирован.

П р и м е р 4. Морской свинке-самцу весом 350 г подкожно вводят взвесь клеток 25 С. maltosl в дозе 3 10 клеток/кг, что вызывает кожную реакцию со специфическим антигеном. Далее способ проводят по при- nepy 3. При зтомАГб составляет 43 мВ. По- результаты свидетельствуют о 30 наличии у морской свинки сенсибилизации, так как значение Afs достоверно больше, чем у интактного животного.

Предлагаемый способ позволяет измерять восстановительную емкость пробы 35

крови или ее фракции исследуемого организма, а именно соотношение окисленных и восстановленных форм, путем окисления ее обратимой окислительно-восстановительной системой, что позволяет избежать ошибок и неточности известных неспецифических способов оценки состояния сенсибилизации, а также получить достаточную информацию о состоянии сенсибилизации организма. По сравнению с прототипом возрастает точность выявления сенсибилизации организма на 29%. (точность с использованием прототипа-56%).

Таким образом, предлагаемый способ по сравнению с известными является более точным и информативным. Кроме того, способ прост в исполнении, длится 5-12 мин, не требует использования дефицитного оборудования и реактивов.

Формула изобретения Способ определения сенсибилизации организма путем забора крови, разведения ее растворителем с последующим измерением окислительно-востановительного потенциала, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, в качестве растворителя используют раствор ферро-феррицианида калия, окислительно- восстановительный потенциал определяют до и после разведения образца с последующим вычислением разницы потенциалов, а сенсибилизацию организма определяют при увеличении значения этой величины по сравнению с контролем.

Изобретение относится к биохимическим способам определения состояния сенсибилизации организма и может быть использовано в практической медицине и биологии. Цель изобретения - повышение точности способа. В электродную ячейку вводят раствор ферро-феррицианида калия, перемешивают на магнитной мешалке, измеряют окислительно-восстановительный потенциал. Затем вносят исследуемую пробу крови, вновь перемешивают и измеряют через фиксированное время окислительно-восстановительный потенциал, вычисляют разницу между этими величинами. Сенсибилизацию организма определяют в случае, если величина разницы в опытной пробе превышает таковую у здоровых. В сравнении с прототипом увеличивается точность способа на 29%.