Способ определения устойчивости кукурузы к вредителям Советский патент 1990 года по МПК A01H1/04 

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции растений.

Цель изобретения - повышение производительности труда и снижение трудоемкости.

Способ осуществляют следующим образом.

Для оценки образцов кукурузы используют гомогенат гусениц стеблевого мотылька, хлопковой совки и других вредителей (предварительное замораживание исключается). Навеску в 100-200 мг растирают в. ступке с кварцевым песком с 5 мл фосфатного буфера и разбавляют буфером из расчета 20 мг в 1 мл. Полученную вытяжку

настаивают при 4°С, центрифугируют 10 мин при 6000 об/мин. Смесь из 2 мл центрифугата, 2 мл фосфатного буфера, 2 мл па- рафенилендиамина вносят в КЮЁЭТЫ спектрофотометра или ФЭК, используя в каг честве субстрата пирокатехин. Расчет ведут по времени, за которое раствор достигает заданной оптической плотности по формуле

о

А

D ХаХ4

где D -заданная оптическая плотность, равная в данном случае 0,15;

а- отношение количества жидкости, взятой для приготовления вытяжки, в миллилитрах к весу навески в граммах;

4 - степень постоянного разведения в реакционной смеси;

t - время, с.

Проведение анализа возможно в течение всего года с использованием полевого 1/1 лабораторного материалов,

Пример 1. Для анализа используют гусеницы вредителя старших возрастов, питающиеся на устойчивых образцах кукурузы. Навеску взвешивают и растирают в ступке с кварцевым песком в фосфатном буфере pHJ,4 1/15 М из расчета 20мг ткани в 1 мл буфера. Раствор настаивают 20 мин при 4°С, затем фильтруют ил11 центрифугируют 10 мин при 6000 об/мин, К 2 мл полученного фильтрата (центрифугата) прибавляют 2 мл фосфатного буфера рН 7,4 1/15Ми2мл 0,02%-ного раствора парафенилендиамина, Зту смесь вносят в опытную кювету прибора (ФЭК или спектрофотометр); в контрольную кювету добавляют к этой смеси 2 мл воды, а в опытную 2 мл 1 %-ного раствора пирокате-. хина. Заданная оптическая плотность 0,15. По секундомеру отмечают время, за которое опытный раствор достигает этой плотности, далее расчет ведут по формуле. Критерием устойчивости служит активность полифенй- локсидазы, выраженная в усл. ед./с/ги имеющая пределы 1,4-2,0.

Пример 2. Для анализа используют гусеницы вредителя старших возрастов, питающиеся на неустойчивых к вредителю образцах кукурузы, и осуществлют операции по примеру 1, Критерием неустойчивости служит активность фермента, выраженная в усл. ед./с/г и имеющая пределы 0,4-0,7.

Анализ показал, что исследуемые образцы характеризуются различным антибиотическим воздействием (физиологический барьер) на гусениц вредителя.

Предлагаемый способ по сравнению с

известным менее трудоемкий, обеспеч ива- ет более экономичное и быстрое определение устойчивости, так как исключает дополнительную обработку биологического материала. Анализ устойчивости образцов

можно проводить круглогодично, используя полевой и лабораторный материалы. Производительность труда возрастает при этом в 2 раза,

Формула изобретения

Способ определения устойчивости кукурузы к вредителям, включающий измерения биохимического показателя, по которому судят об устойчивости, отличающийся

тем, что, с целью повышения производительности труда и снижения трудоемкости, в качестве биолог ического показателя измеряют активность фермента полифенолокси- дазы насекомых-вредителей, питающихся

на изучаемых сортосбразцах, при этом к устойчивым относят те образцы, у которых показатель активности фермента 1,4-2,0 усл.ед./с/г.

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции растений. Цель изобретения - повышение производительности труда и снижение трудоемкости. Для определения устойчивости кукурузы к вредителям используют гомогенат гусениц вредителей данной культуры. Навеску в 100-200 мг растирают в ступке с кварцевым песком с 5 мл фосфатного буфера и разбавляют буфером из расчета 20 мг в 1 мл. Полученную вытяжку настаивают при 4°С, центрифугируют 10 мин при 6000 об/мин. Смесь из 2 мл центрифугата, 2 мл фосфатного буфера, 2 мл парафенилендиамина вносят в кюветы спектрофотометра, используя в качестве субстрата пирокатехин. Расчет ведут по времени, за которое раствор достигает заданной оптической плотности по формуле А=D^.Α^.4/T, где D - заданная оптическая плотность

α - отношение количества жидкости, взятой для приготовления вытяжки в мл к весу навески в г

4 - степень постоянного разведения в реактивной смеси

T - время, с.