Питательная среда для культивирования SтRертососсUS рNеUмоNIае Советский патент 1991 года по МПК C12N1/20 C12Q1/04 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть ис- пользовано при получении диагностических препаратов.

Цель изобретения - повышение элективных свойств среды.

Питательную среду готовят на бульоне, приготовленном из перевара мяса по Хоттингеру. Перевар разводят дистиллированной водой с таким расчетом, чтобы содержание аминного азота составляло 170-180 мг%, татем к перевару добавляют хлорид натрия (5-6 г/л) и фосфат калия двузаметеи- ный (0,5-1 г/л). Полученный бульон Хоттингера фильтруют, устанавливают рН 7,2-7,4 и стерилизуют. После охлаждения стерильно добавляют лецитин в количестве 0,1-0,01 г/л бульона.

Пример 1. Готовят бульон Хоттингера и к 1 л бупьона добавляют 0,01 г лецитина. Для инокуляции среды используют 6-часовую культуру пневмококка штамм N 789 в дозе 2,5 Х105 микр.кл./мл и инкубируют при 36°С п течение 6-9 ч. Р качестве контроля используют бульон Хоттингера .с 10% сыпороткн крупного рогатого скота (известная среда). Мереч 6 ч инкубации на среде с лецитином накапливается 107 KOF/мл, на контрольной среде 106 КОЕ/мл, а через 9 ч 10 и 10е КОЕ/мл соответственно.

Пример 2. Готовят среду в соответствии с примером 1, но лецитин используют в концентрации 0,05 г/л бульона. Посевная доза 2,5 .кл/мл.Через 6 ч инкубирования

от к к

СА Ј

на среде с лецитином накапливается 10 КОЕ/мп, в контроле 10е КОЕ/мл, через 9 ч инкубирования на обеих средах 10 КОЕ/мл.

Пример 3. Готовят среду в соответствии с примером }, но лецитин вносят в концентрации 0,1 г/л бульона. Через 6 ч инкуба.ции на, опыт7 ной контрольной среде 10 и 10е FOE/мл, т.е. при концентрации лецитина 0,1 г/л бульона рост на опытной и контрольной средах штамма W 789 одинаковый.

При выращивании штамма С1 92 через 6 и 9 ч инкубации стимулирующий эффект лецитина более выражен:10 КОЕ/мл (6 ч) и 10 КОЕ/мл (9ч), в контроле 10 и 10Т КОЕ/мл соответственно.

При исследовании обраяцов ликво- ра и отделяемого уха, полученных от больных пневмококковой инфекцией, по чувствительности среда с лецитином превосходит среду с сывороткой крови: из спинномозговой жидкости и отделяемого уха Streptococcus pneumo- niae выделен в 37 случаях на среде с лецитином и в 7.1 случаях на контрольной среде.

5

0

5

Культура пневмококка на среде с лецитином физиологически активная с хорошо развитой капсулой. Использование среды для подращивания культуры с последующим пересевом ее на сывороточный агар обеспечивает образование более крупных колоний (средний диаметр колоний превышает на 0,5- 2,5 мм диаметр колоний без подращивания) . Трех - пятикратное пассирование культуры на среде с лецитином повышает вирулентность культуры на 2 и более ед (ЛД м)

Формула изобретения Питательная среда для культивирования Streptococcus pneumoniae, содержащая бульон Хоттингера с содержанием аминного азота 170-180 мг% и стимулятор роста, отличающая- с я тем, что, с целью повышения элективных свойств спеды, она в качестве стимулятора роста содержит лецитин при следующем количественном соотношении компонентов, г/л: Лецитин0,1-0,01

Бульон Хоттингера с содержанием аминного азота 170-180 мг% 1 л

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при получении диагностических препаратов. Нель изобретения повышение -элективных спойств среды. Для приготовления среды используют бульон Хоттингерч (1 л) с содержанием аминного ачота 170-180 мг7, в который после стерилизации вносят в стерильных условиях лецитин в концентрации 0,1-0,01 г, рН среды 7,2- 7,4. Культуру вырапнпают при 37°С в течение 6-9 ч. Среда обеспечивает получение (Ьизиоло имески активной культуры г хорошо пыраженной капсулой. Среда может быть использована также для подращивания культуры для последующего высева на плотную среду, при этом диаметр колоний значительно увеличивается. Пассирование культуры при использовании среды с лецитином повышает ее вирулентность. с S3 (/ С