Способ получения докозагексаеновой, эйкозапентаеновой и арахидоновой кислот или их смеси Советский патент 1991 года по МПК C11C1/02 

Изобретение относится к получению /киров и маселs в частности жирных кислот.

Полиеновые жирные кислоты: эйкоза- тетраеновая (арахидоновая), эйкоза- пентаеновая и докозагексаеновая являются биологически активными соединениями,, используемыми в медицине„

Способ является простым, позволяет сократить время процесса и увеличить его селективность.

Способ осуществляют следующим образом.

На смесь жирных кислот, полученных омылением рыбьего жира, например, иваси,или печени крысы, или концентрат кислот действуют после перевода в калиевые соли 0,5-6,5-кратным избытком йода в присутствии йодида и гидрокарбоната калия в спирте, диок- или тетрагидрофуране для полу- йод-лактонов „ Полученные йод- актоны после оттнтровывания избытка иола гипосульфитом натрия экстрагируют этиладетатом или другим малополярным растворителем из щелочной среды, Растворитель отгоняют, добавляют гексан, полученный раствор промывают раствором карбоната натрия или калия в водном спирте. Йод-лак- тоны обрабатывают в растворе аце- тонитрила триметилхлор- или йодсила- на для перевода в жирные кислоты. После удаления избытка йода жирные кислоты экстрагируют гексаном или его смесью с эфиром или этилацетатом После отгонки растворителя получают концентрат полиненасыщенных жирных кислот.

Индивидуальные кислоты получают следующим способом.

1. Докозагексаеновая кислота, 1.1. Реакцию йод-лактонизации проводят при содержании йода в смеси в количестве 0,5-1,2 эквивалента от стехиометрии, в расчете на количество докозагексаеновой кислоты. Время реакции ограничивается 1-15 мин. Далее проделывают вышеописанные операции.

1,2, Смесь лактонов полиеновых кислот после реакции йод-лактонизации подвергают действию щелочного агента до перевода йод лактона эйко- запентаеновой в более полярное соединение, которое эффективно отделяют от йод-лактона докозагексаеновой кислоты хроматографическими метода

ми. После этого йод-лактон par срывают обычным способом.

1.3. Раскрытие лактонов приводят при содержании триметилйодсилана в смеси в количестве 0,5-1 эквивалент от стехиометрии в расчете на количество йод1 лактпна эйко апентаеко вой кислоты, В р&зультлге этого йод- лактон докозагексаеновой кислоты

практически остается не раскрытым. Его выделяют и раскрывают обычным способом„

Может быть применена комбинация

с этих вариантов,

2. Эйкозапептаеновая кислота, 2,1. Мирные кислоты, не вступающие в реакцию йод-лактонизации по п. 1.18 выделяют и подвергают повторной йод- лактонизации по описанному способу.

2,2. Полярное соединение йод-лак- тона эйкозапентаеновой кислоты по п, 1.2 раскрывают в кислоты обычным способом,

5 2,3, Водно-органический раствор-, содержащий соль эйкозапентаеновой кислоты, полученной после выделения из смеси йод-лактона докозагексаеновой кислоты по п„ 1,3, подкисляют.

0

0

5

5

экстрагируют органическими растворителями, органическую фазу отделяют, упаривают,

3, Арахидоновая кислота. Традиционным источником арахидоновой кислоты являются внутренние органы животных, в липидах которых она содержится наряду с докозагексаеновой кислотой Поскольку арахидоновая кислота имеет ту же скорость образования йод-лактонов, что и эйкозапен- тасновая, то способы ее выделения остаются такими, как и для эйкозапентаеновой кислоты.

Все названные кислоты могут быть также получены при раделении смеси йод-лактонов колоночной хроматографией на сорбенте с дальнейшим индивидуальным раскрытием каждого йод- лактона .

Способ основан на том, что из всех кислот смеси только три указанные кислоты дают иод-лактоны. В конечном продукте количество жирной кислоты соответствует количеству йод- лактона . При повышении температуры от О до 20°С скорость реакции йод-лак- . тонизации увеличивается примерно в Ю раз, При более высокой температуре снижается выход продукта, при по0

5

нижении возрастает время реакции. Скорость образования йод-лактонов различна для разных пслиеновых кислот. Йод-лактон докозагексаеновой кислоты образуется в 1,5-20 раз быстрее, чем йод-лактон эйкозапентаеново кислоты. Количество йода на моль кислоты определяет состав конечной смеси йод-лактонов. При эквивалентном соотношении образуется преимущественно йод-лактон докозагексаеновой кислоты, при избытке йода образуются и другие йод-лактоны и лактоны докозагексаеновой кислоты.

Замедляет реакцию йодистый капни, но одновременно повышает выход. При увеличении соотношения йодистый калий/йод от 0 до 2 скорость реакции йод-лактонизации уменьшается В найденных условиях докозагексаено- вая кислота может быть получена с чистотой выше 95%.

Реакция раскрытия йод-лактонов быстрее всего проходит для эйкозапентаеновой кислоты, поэтому при недостатке триметилйодсилана именно этот лактон раскрывается в первую очередь что позволяет получить эйкозапентае- новую кислоту 90-95% чистоты.

Реакции образования йод-лактонов арахкдоновой и тйкпзапентаеновой кислот способствуют спирты и диок- сан, тетрагидросЬуран способствует образованию йод-лактонов докотагексае- новой кислоты.

Более высокая устойчивость йод- л акт она докозагексар.новой кислоты по сравнению с другими йод-лактонами позволяет их разделить хроматогра- фическим методом. С этой целью используют слабощелочной силикагель, более щелочные сорбенты разрушают йод-лактоны эйкозапентаеновой кислоты. При выдержке в щелочной среде йод-лактон эйкозапентаеновой кислоты переходит в более полярный йод-гид- рин, который лучше отделяется от йод- лактона докозагексаеновой кислоты, что позволяет получить чистую эйкоза- пентаеновую кислоту после реакции с триметилйодсиланом.

Пример 1. Получение концентрата эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот из рыбьего жира.

Жирногислотный состав рыбьего жира, %: эйкозапентаеновая кислота 19, докозагексаеновая кислота 17.

067

10 г смеси жирных кислот, полученных по стандартной методике, растворяют при 0 С и перемешивании в 75 мл 16%-ного раствора гилроклрбоката :а лия, добавляют 20 мл метанола.

Раствор охлаждают до +5°С, затем припивают 120 мл 5%-ного раствора йода в метаноле (по отношению .,. к сумме количества зйкоэапентаено- вой и докозагексаеновой кислот количество йода берут в 2 раза больше, чем требуется по стехиометрии),

Иод-лактонизацию проводят при ; 10 С в течение 3 мин при перемешиваНИИ.

I

После реакции йод, не вступающий в реакцию, оттитровывают 40%-ным

0 раствором тиосульфата натрия до исчезновения бурой окраски, Йод-лактоны из смеси экстрагируют этилаце- татом 2x100 мл, экстракты объединяют и упаривают. Остаток перераство-

5 ряют в 50 мл гексана и для удаления из смеси лактонов жирных кислот промывают 5%-ным карбонатом калия в 20%-ном водном изопропаноле мл. Получают 3,7 г смеси йод-лактонов

о с содержанием йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты 52,2% (выход - 71,7% в расчете на количество кислоты в исходной смеси) и йоц-ллктона докоза- гексаеноуой кислоты 45,1% (выход 72 5%)

/ i , J /о .

Смесь лактонов растворяют в 55 мл сухого (безводного) ацетсннтрила. и приливают раствор 2,5 г триметилйодсилана (количество триметилйодсилана взято в 1,5 раза большее от стехиометрии в расчете на количество йод- лактонов) в 25 мл безводного ацето- нитрила. Через 23 мин выделившийся йод оттитровывают 4 %-ным раствором тиосульфата натрия до исчезновения бурой окраски, затем к смеси добавля- ; ют 70 мл воды, экстрагируют свободные . жирные кислоты смесью гексан-этилС

5

ацетат 3:1 (по объему) мл.

0

Выход 1,9 г смеси жирных кислот с содержанием - эйкозапентаеновой кислоты 52%, (51,9% в расчете на ис- ходное количество), докозагексаеновой кислоты 46%, (51,4%).

Контроль за ходом реакций осуществляют тонкослойной и газожидкостной хроматографией.

Тонкослойную хроматографию как качественный метод анализа проводят на пластинах 6x6 см с закрепленным слоем силикагеля КСК-2 с размером частиц 3-7 мкмо Пробу липида в количестве 0,1-0,5 мг наносят на пластинку и хроматографируют в системе бен- зол-этилацетат-уксусная кислота, 95:5:0,5 (по объему). После этого пластинку высушивают и опрыскивают 5%-ной серной кислотой в эталоне (по объему) и нагревают 5 мин при 100°С Под-лактоны арахидоновой и эйкоза- пентаеновой кислот (Rf 0,5), йод- лактон докозагексаеновой кислоты (Rf 0,6), продукт щелочной обработки йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты (Rf 0,4), жирные кислоты (Rf 0,15) проявляются в виде черных пятен на белом фоне силикагеля. Жирнокислотный состав полученных продуктов проводят газожидкостной хроматографией„

Пример 2, Получение метилового эфира высокочистой докозагексаеновой кислоты из концентрата по- лиеновых кислот.

Жирнокислын состав концентрата, % эйкозапентаеновая кислота 22, доко- загексаеновая кислота 42.

10 г концентрата полиеновых кислот, полученного по ранее указанному методу, растворяют при перемешивании в 75 мл 16%-ного раствора гидрокарбоната калия при 40°С, добавляют 20 мл этанола и 4,5 г йодида калия. Раствор охлаждают до +5 С и приливают 120 мл 2,5%-ного раствора йода в этаноле (количество йода рассчитано на количество докозагексаеновой кислоты, от стехиометрического этот показатель равен 0,92; молярное соотношение в реакции йодистого калия и йода равно 2).

Перемешивают при температуре 10 С 5 ч.

По окончании реакции йод оттитро- вывают 40%-ным раствором тиосульфата натрия до исчезновения бурой окраски. Йод-лактоны экстрагируют бензолом, 3x10 мл, экстракты объединяют упаривают. Остаток растворяют в 100 мл гексана и промывают для удаления присутствующих кислот 5%-ным раствором карбоната натрия в водном пропаноле, 2x50 мл.

Получают 4,7 г смеси йод-лактонов с содержанием йод-лактона эйкозапен

,

:

тм

6310678

таеновой кислоты 1,0/ и йод--лак г - ;,.: докозагексаеновой кислоты 9.4,3% ход 79,5% от теоретически ного).

Смесь йод-лактонов растворяют в 80 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 3 г триметилйодсшта- на в 30 мл ацетонитрила (количество триметилйодсклана взято к 1 , 5 раза больше требуемого по стехиометрии на сумму йод-лактонов эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот). Через 20 мин непрореагированный йод оттчт- с ровывают 40%-ным раствором тиосульфата натрия до исчезновения бурой окраски. Жирные кислоты экстрагируют гексаном, 3x35 мл, экстракты объединяют и упаривают. К остатку приливают 100 мл 5%-ного раствора соляной

10

25

30

35

20

кислоты в метаноле и выдерживают

15 мин при 50 С. После охлаждения до +20°С к смеси добавляют 100 мл воды и экстрагируют метиловые эфиры жирных кислот гексанолом мл. После упаривания получают 2,8 г смеси метиловых эфиров жирных кислот с содержанием метилового эфира э.йко- запентаеновой кислоты 1,0%, метилового эфира докозагексаеновой кислоты 98,1% (выход 62,7% в расчете на исходное количество).

Пример 3. Получение высокочистого метилового эфира докозагексаеновой кислоты из концентрата полиеновых кислот. Жирнокислотиый состав концентрата аналогичен приме - РУ 2.

10 г концентрата полиеновых кислот растворяют в 75 мл 16%-ного раствора гидрокарбоната калия, добавляют 20 мл этанола и 1 г йодистого калия. Рас.твор охлаждают до 5 С, после чего приливают 120 мл 2,5%-ного раствора д йода в этаноле (количество йода рассчитано на количество докозагексаеновой кислоты, от стехиометрического этот показатель равен 0S92, молярное соотношение в реакции йодистого калия и йода равно 0,44) при перемешивании при температуре Ю°С 5 мин.

Далее йод-лактоны выделяют из смеси как в примере 2.

Получают 4Э6 г смеси йод-лактонов

40

50

с содержанием йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты 0,9% и йод-лактона докозагексаеновой кислоты (выход 77,8% в расчете на исходное количество кислоты),

Далее йод-лактоны раскрывают в метиловые эфиры полиеновых кислот как в примере 2 с тем же соотношением реагентов.

Получают 2,7 г смеси метиловых эфиров полиеновых кислот с содержанием метилового эфира эйкозалента-- еновой кислоты 0,9% и метилового эфира докозагексаеновой кислоты 98,2%.

Выход 60,5% (в расчете на исходно количество кислоты).

Пример 4. Получение эйкоза- пентаеновой и докозагексаеновой кислот из рыбьего жира. Состав используемого рыбьего жира как в примере 1.

10 г смеси жирных кислот, полученных, как описано ранее, растворяют в 75 мл 16%-ного раствора гидрокарбоната калия, добавляют 20 мл про- панола и 9,6 г йодида калия. Раствор охлаждают до 5 С и приливают 120 мл 12%-ного раствора йода в пропаноле (количество йода взято в 4,9 раза большее, чем требуется по стехиометрии на количество эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот; молярное соотношение йодистого калия и : юда равно 1) и перемешивают при 0°С 5 ч.

I

После окончания реакции йод оттитровывают 40%-ным раствором тиосульфата натрия до исчезновения бурой окраски, добавляют 100 мл пропанола и 40 мл 4-молярного раствора трис-(ок- симетил)-аминометапа. Смесь выдерживают 30 мин при 20 С, подкисляют концентрированной соляной кислотой до pll 7,0 и экстрагируют липиды хлороформом, мл, объединенные экстракты упаривают. Остаток растворяют в 50 мл гексана, для удаления жирных кислот промывают 50 мл 10%-ного раствора гидрокарбоната калия в 40%-ном водном этаноле, затем гекса- новый слой упаривают. Далее продукты разделяют колоночной хроматографией на силикагеле КСК-2. Колонка - диаметр 3 см, длина 28 см, сорбента 100 г. Разделяемую смесь наносят на колонку и элюируют вначале чистым г бензолом до полного выхода йод-лак- тона докозагексаеновой кислоты (500 мл), затем смесью бензол-этил- ацетат, 19:1 (по объему), до полного выхода продукта щелочной обработки йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты (300 мл). Элюаты в обоих случаях объединяют и упаривают.

0

5

Получают из 1-го злюата ноп-лэктги1 докозагексаеновой кислоты, 2,0 г чистота 96,3%5 выход 81,8% (в расчете , на исходнпе количество кислоты) из 2-го элюата - продукт щелочной обработки йод-лактона эйкозапектаеновой кислоты, 2S1 г, чистота 95,6%, выход 74,5%.

Под-лактон докозагексаеновой кислоты растворяют в 40 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 1,3 г триметилнодсилана в 13 мл без-- водного ацетонитрила (количество три- метилподсилана, взятое на количество йод-лактона, в 1,5 раза больше стехи- ометрического. Через 20 мин непрореа- гировавшнй йод оттитровмвают 40%-ным раствором тиосульфата натрия до исчез- Q новения бурой окраски добавляют 50 50 мл воды и экстрагируют смесью гексан-диэтиловын эфир, 1:1 (по объему), 3x40 мл. Получают 1,1 г смеси жирных кислот с содержанием докозагексаеновой кислоты 96,5Т, выход 62,4% (в расчете на исходное количество кислоты в сырье)„

Продукт щелочной обработки йод- лактона эйкозапентаеновой кислоты растворяют в 35 мл безводного ацето5

0

5

0

5

0

5

нитрила и прибавляют суспензию 4 г безводного йодида натрия в 25 мл ацетонитрила. После полного растворения йодида натрия к смеси добавляют 1,3 мл тряметилхлорсилана и перемешивают 1 ч при 23°С (количество триметилхлорснлана, взятое на количество продукта полочной обработки йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты, больше в 2,045 раза стехиометри- ческого). Затем к смеси добавляют 60 мл воды, непрореагироваший йод от- тйтровывают 40%-ным раствором тио-. сульфата натрия до исчезновения бурой окраски и экстрагируют кислоты ди- этиловым эфиром, 3x50 мл.Получают 1,3 г смеси жирных кислот с содержанием эйкозапентаеновой кислоты 95,9% (выход 65,6% в расчете на количество эйкозапентаеновой кислоты в исходном сырье).

Пример 5. Получение докозагексаеновой кислоты из рыбьего жира. Реакция йод-лактонизации проводится как в примере 4, но в качестве растворителя используют изопропанол - количество йода, взятое на количество эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот, большее в 6,2 раза

1

от стехиометрического; соотношение йодида калия и йода равно 1. По окончании реакции йод нейтрализуют 40%- ным раствором тиосульфата натрия, экстрагируют йод-лактоны диэтиловым эфиром, 2x100 мл, объединенные экстракты упаривают. Остаток растворяют в 50 мл гексяна и промывают 5%-ным раствором гидрокарбоната натрия в 50%-ном водном этаноле, 2x50 мл.

Получают 4,2 г смеси йод-лактонов с содержанием йод-лактона эйкозапен- таеновой кислоты 50% (выход 78%), йод-лактона докозагексаеновой кислоты 45%, выход 80%.

Смесь йод-лактонов растворяют в 60 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 1,2 г триметилйодсила- на в 12 мл безводного ацетонитрила (количество триметилйодсилана рассчи- тано на количество эйкозапентаеновой кислоты и превьшает стехиометричес- ии в 1,2 раза). Через 5 мин йод от- тптровывают 40%-ным раствором тио- с , 1ьфата натрия, добавляют 70 мл воды и экстрагируют липиды из смеси - этилацетатом, 2x70 мл, экстракты объединяют и упаривают. Остаток растворяют в 50 мл гексана и промывают для удаления жирных кислот 5%-ным раствором гидрокарбоната калия в 50%-ном водном этаноле, 2x50 мл. Гек- сановый слой упаривают, остаток растворяют в 30 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 1,0 г триметилйодсилана в 10 мл безводного ацетонитрила (количество триметилйодсилана рассчитано на количество докозагексаеновой кислоты и превышает стехиометрическое в 1,2 раза). Через 20 мин йод оттитровывают 40%- ным раствором тиосульфата натрия, добавляют 40 мл воды и экстрагируют

10

Получают 4,1 г смеси йод-лактонов с содаржанием - йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты 52,6% (выход 80,1%), йод-лактона докозагексаеновой кислоты 46,1% (выход - 80,3%).

Смесь лактонов растворяют в 60 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 0,9 г триметплйодстага в 9 мл безводного ацетонитрила (количество триметилйодсилана рассчитано на количество йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты и составляет от стехиометрического 0,9). Через 2 мин непрореагировавший йод нейтрализуют 40%-ным раствором тиосульфата натрия, добавляют 60 мл воды и экстрагируют смесью гексан-этилацетат, 3:1 (по объему), 3x50 мл. Экстракты объединяют и упаривают. Остаток растворяют в 50 мл гексана и промывают 5%-ным раствором карбоната калия в 30%-ном водном этаноле, мл. Объединенные водные слои подкисляют соляной кислотой до рН 2 и экстра15

20

25

30

35

40

гируют гексаном, мл.

Получают 1,15 г смеси жирных кислот с содержанием эйкозапентаеновой кислоты 96,2% (выход - 58,2%) в расчете на количество эйкозапентаеновой кислоты, содержащейся в исходном сырье.

Пример 7. Получение арахи- доновой кислоты из печени крысы. Жир- нокислотный состав липидов печени крысы, %: арахидоновая кислота 17, докозагексаеновая кислота 7.

10 г жирных кислот печени крысы, полученных тем же способом, что и кислоты рыбьего жира, растворяют в 75 мл 16%-ного раствора гидрокарбоната калия, затем добавляют 20 мл диок- сана и 0,9 г йодида калия. Затем к смеси приливают раствор 0,6 г йода в

жирные кислоты смесью гексан-диэтило- 45 0 мл диоксана (количество йода расвый эфир, 1:1 (по объему), 3x30 мл, экстракты объединяют и упаривают.

Получают 1,1 г смеси жирных кислот с содержанием докозагексаеновой кислоты 96,3% (выход - 62,3% в расчете на количество докозагексаеновой кислоты в исходном сырье).

Пример 6. Получение эйко-- запентаеновой кислоты из рыбьего жира. Условия реакции йод-лактонизации и выделения йод-лактонов как в примере 5 (соотношения реагентов те же самые) .

50

55

считано на количество докозагексаеновой кислоты и больше стехиометрического в 1,1 раза; соотношение- йодистого калия и йода равно 2) и перемешивают при температуре 25°С 5 ч.

Реакционную смесь экстрагируют гексаном, 3х70 мл, гексановые экстракты отделяют (экстракт содержит почти исключительно йод-лактон докозагексаеновой кислоты), а к водному слою добавляют последовательно 3,5 г йодистого калия, 100 мл диоксана и 7 г йода (количество йода рассчита10

106712

Получают 4,1 г смеси йод-лактонов с содаржанием - йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты 52,6% (выход 80,1%), йод-лактона докозагексаеновой кислоты 46,1% (выход - 80,3%).

Смесь лактонов растворяют в 60 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 0,9 г триметплйодстага в 9 мл безводного ацетонитрила (количество триметилйодсилана рассчитано на количество йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты и составляет от стехиометрического 0,9). Через 2 мин непрореагировавший йод нейтрализуют 40%-ным раствором тиосульфата натрия, добавляют 60 мл воды и экстрагируют смесью гексан-этилацетат, 3:1 (по объему), 3x50 мл. Экстракты объединяют и упаривают. Остаток растворяют в 50 мл гексана и промывают 5%-ным раствором карбоната калия в 30%-ном водном этаноле, мл. Объединенные водные слои подкисляют соляной кислотой до рН 2 и экстра15

20

25

0

5

0

гируют гексаном, мл.

Получают 1,15 г смеси жирных кислот с содержанием эйкозапентаеновой кислоты 96,2% (выход - 58,2%) в расчете на количество эйкозапентаеновой кислоты, содержащейся в исходном сырье.

Пример 7. Получение арахи- доновой кислоты из печени крысы. Жир- нокислотный состав липидов печени крысы, %: арахидоновая кислота 17, докозагексаеновая кислота 7.

10 г жирных кислот печени крысы, полученных тем же способом, что и кислоты рыбьего жира, растворяют в 75 мл 16%-ного раствора гидрокарбоната калия, затем добавляют 20 мл диок- сана и 0,9 г йодида калия. Затем к смеси приливают раствор 0,6 г йода в

0

5

считано на количество докозагексаеновой кислоты и больше стехиометрического в 1,1 раза; соотношение- йодистого калия и йода равно 2) и перемешивают при температуре 25°С 5 ч.

Реакционную смесь экстрагируют гексаном, 3х70 мл, гексановые экстракты отделяют (экстракт содержит почти исключительно йод-лактон докозагексаеновой кислоты), а к водному слою добавляют последовательно 3,5 г йодистого калия, 100 мл диоксана и 7 г йода (количество йода рассчитано на количество арахидоновои кислоты, содержащейся в исходном сырье, больше стехиометрического в 5 раз: молярное соотношение йодистого кг.-,-и йода равно 0,9) и перемешивают при 10°С 2 ч.

По окончании реакции непрореаги™ ровавший йод оттитровывают 40%-нкм раствором тиосульфата натрия, экстрагируют йод-лактоны смесью гексан- этилацетат, 4:1 (по объему), мл экстракты объединяют и упаривают. Ос таток растворяют в 50 мл гексана и для удаления жирных кислот промывают 5%-ным раствором гидрокарбоната калия в 70%-ном водном метаноле, мл.

Получают 2.0 г смеси йод-лакто-- нон с со/юржаннем йод-ллктопа арахг- доновой кислоты 37,6/, выход 72,8% (в расчете на количество арахидог.опо кислоты, содержащейся п исходно;-; сырье) j йод-лактона докочг.гексае- новой кислоты 10,2%, чькод - ,

Смесь йод-лактонов раст.юряют ы 30 мл безводного анетоннтри.ча и ппн- ливаюг раствор 0,1 г . Пс.к ;- лана я 7 ми бегшоднсгг. ацстоллтргчн (количество трн.че пмодеил-чн;; г.г. - считано на кочпчосгво под-лак тп;;а арахидоновои кислоты и составляет от стехиометрического 0,86), Через 3 мин йод оттитровывают 40%-пым раствором тиосульфата натрия, приливают 50 мл воды и экстрагируют смесь хлороформом для извлечения жирных кислот s 3x50 мл.

Получают 0,87 г смеси жирных кислот с содержанием арахндоновой кислоты 98,2%,выход - 50% (в расчете ла количество арахидоновои кислоты, содержащейся в исходном сырье); доко- загексаеновой кислоты 1,3%, выход 1,3%.

Пример 8. Получение этилового эфира эйкозапентаеногзой п этилового эф::ра докозагексаеповой кислот. Жирнокислый состав рыбьего жира по примеру 1. Условия реакции йод-лак- тонизации по пр:гмеру 4.

По окончании реакции йод нейтра- (лизуют раствором тиосульфата и йод- лактоны экстрагируют смесью гексан- диэтиловый эфир, 1:1 (по объему), мл. Экстракты объединяют и упаривают. Остаток растворяют в 50 мл гексана и промывают /г л я удаления жирных кислот 10%-ным раствором

0

0

0

5

0

5

боната калия в 50%-ном водном метаноле, M. I Затем гсксановый слон упаривают и ра-зделяют йод-лактоны колоночной хроматографией HP с.нлгткл- геле КС К-2 (размер частиц :;о шликер 4 - 100-250 ,) „ Колонка; диаметр 3,5 см. ллннся 30 см, Количество си- лик а геля 150 г. Элюнрующие системы: чистый бензол до полного выхода йод-лактона докозагексаеновон кислоты (800 мл)5 затем бензолзтилацетат, I 9: (по объему), до полного выхода мсд-лслк гона з нк о запей таен ов о и кислоты (400 мл).

Получают 2,3 г йод-лак тона эйко- запентаеновон кислоты, чистота 98,1 %., выход 83s8%j 1,9 г йод-лактсна доко- эагексаеновон кислоть;5 чистота 9758%; выход 80%,

од-ла: тслн эпкозапент.ченовой кис- лоть: растворяют я 30 мл безводного ацетонитрнла и при/киваю г раствор 0,95 г тпнметнлнодсилана в 9 мл безводного ацетоннтрнла (количество тримгтн.дйодс нлан;) , взятое па количество йод-j -iктона йкозапентаеновой кислоты, составляет 0,9 от стехиометрического). 1герсз 3 мин под оттитро- .мг 40 o-Hbit- рлсЛ Вором тиосульфата , добавляют 50 мл полы и жирные кислоты экстрагируют гексаном, 3f v30 ::, riKCTpaKTiii объединяют п упаривают, Остлток растворяют в 30 мл 5%-ного рас.тлорл хлористого водорода в абсолютном этаноле и выдерживают 15 мин при , После охлаждения до 20 С доОаяляггт 40 мл воды и экстрагируют этиловый эфир зйкозапентаеновон кислоты смесью гексан-этилацетат, 4:1 (по объему), мл.

Получают 1,3 г этилового эфира эйкоэапентаеповой кислоты, чистота 98,7%, выход 61,8% (в расчете на количество кислоп, в сырье).

Под-лактон докозагексаеновой кислоты растворяют в 30 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 1,0 г триметилнодсилана в 10 мл безводного ацетониттила (количество триметилйодсилан;, взятое на количество йод-лактона докозагексаеновой кислоты, больше стехиометрического в 1,2 раза). Через 30 мин под оттитровывают 40%-ным раствором тиосульфата натрия, добавляют 50 мл воды и экстрагируют жирные кислоты гексаном, 3x30 мл„ Экстракты объединяют и упаривают. Остаток растворяют в

раствора хлористого в абсолютном этаноле и выi5 мин при 50 С. После ох- аждения до 20°С добавляют 50 мл воы и экстрагируют этиловый эфир до- озагексаеновой кислоты хлороформом, 60 мл о Хлороформные экстракты объеиняют и упаривают.

Получают is2 r этилового эфира окозагексасповой кислоты, чистота 7„6, выход 63 4% (в расчете на ко- чичество докозагексаеповой кислоты в сырье)„

Как видно из представленных примеров, способ приемлем для получения тзысокочистых полиеновых кислот и их :со1Щ -Н7ватоВс Пртт осуществлении способа используются открытые законо- метности, резко сокращают время реакций и увеличивают эффективность способа,

Данный способ является универсаль- С СГО ПОМОЩЬЮ МОЖНО НС ТОЛЬКО

--,-,-, тттть полис-новые жирные кислоты -5 . - Иродпых смессй5 но и разделить -. между собой При этом широко используются экстракционные методы как о лае гсхнологичныс в сравнении с колоночной хооматограЛией, Способ включает1 в себя ряд простых операций,, не требующих сложного аппаратурного оформления, В то же время процесс не трудоемок.

л о р м у л а и э о б р е т е н и я

,. Способ получения докозагексае- нсьой, эйчозапентаеновой и арахидо- нсвом : ислот или их смеси,, о т л и - ч а ю и и п с я тем, что смесь кислот высоконепредельного жира переводят в калиевые соли действием гидрокарбоната калия, затем проводят обработку солей для получения подлак- тонов йодом в количестве 0,5-6,5 моль на 1 моль кислоты в исходной смеси в присутствии йодида калия в количестве 0-2 моль на 1 моль йода при перемешивании в течение 3-300 мин при температуре от 0 до 25 С в полярном органическом растворителе, который выбирают из группы: метанол, этанол,

0

пропанол, изопроланол, гиокс н, тст- рагидрофуран, титрова иг избу тка выделившегося йода гипосульфитом натрия, экстракцию йод-лактонов неполярным растворителем, который выбирают из группы: бензол, гексан, диэтиловый эфирs хлороформ, этит- аиетат, отгонку раствор . лечие гексана к получе чо гу остатку его промывку раствором гицрокарбонат шти карбоната щелочного металла в водном 20-70л нсы спирте для удаления непрореагировавших тирных кислот, перевод йод-лактонов в ттопиечовые кислоты: докозаг ексае} ов по3 эйкоза- пентаеновую и арахидононую обработкой триметилхлор- или триметилйодси- ланом в растворе в количестве 0,1-1,5 эквивалент-; на

1 эквивалент йод-лакточа, тиг ние выделившегося йода, экстракцию из последней полиеновых кислот органическим растворителем и упарива- 5 ние растворителя в BaKvyMe,

2. Способ по п. 1, о т л и ч а - ю щ и и с я тем, что при получении смеси йод-лактонов эйкозапентаеповой и докозагексаеноаой кислот состноше- Q ние йод-жирные кислоты выбирают равным 1-6,5.

3„ Способ по п. 1, о т л и ч а - ю щ и и с я тем, что при получении йод-лактона докозагексаеновой кисло- 5 ты соотношение йод-кислота выбирают равным 0,5-1,2 н время перемешивания 3-15 мин.

- о Способ по п. 1, о т л к ч а - ю щ и и с я тем, что при получении о эйкозалентаеновоч кислоты 1 эквивалент эйкозапентаеновой кислоты обрабатывают 0,5-1 эквивалентом триметилхлор- или триметилйодсилана,

5,Способ по п, 1, о т л и ч а - 5 ю Щ н и с я тем, что разделение смеси кислот или их йод-лактонов проводят на слабощелочном силикагеле.

6.Способ по п, 1, отличающийся тем, что при получении

Q йод-лактонов арахидоновой и эйкозапентаеновой кислот в качестве полярного растворителя используют спирты и диокеан.

Изобретение относится к получению жиров и масел, в частности жирных кислот. Для получения эйко- затетраеиовой (арахидоновой)s эйко- запентаеновой и докозагексаеновой кислот на смесь жирных кислот или их концентра, полученный из печени рыб или животных, после перевода в калиевые соли действуют 0,5-6,5 кратным избытком.йода в присутствии иодида и карбоната калия в спирте или диок- сане для получения иод-лактонов. Полученные иод-лактоиы после оттитро- вывания избытка иода гипосульфатом натрия экстрагируют этилацетатом или другим малополярным растворителем из щелочной среды. Растворитель отгоняют, добавляют гексан, полученный раствор промывают раствором карбоната натрия или калия в водном спирте. Затем йод-лактоны обрабатывают в растворе ацетонитрила триметилхлор- шта йодсилана для перевода в жирные кислоты. После удаления избытка йода жирные кислоты экстрагируют гексаном или его смесью с эфиром или этил- ацетатом. После отгонки растворителя получают концентрат жирных полинена2 сыщенных кислот. Для получения докозагексаеновой кислоты используют йод в количестве 0,5-1,2 эквивалента, время реакции до 15 мин. Йод-лактоны могут быть также обработаны щелочью. При хроматографировании на колонке с силикагелем выделяют йод-лактон докозагексаеновой кислоты, Йод-лактон этой кислоты может быть получен также при обработке смеси йод-лактонов 0,5-1,0 эквивалента триметилйодсила- на на эквивалент йод-лактоня эйкоза- пентаеновой кислоты. Эйкозапентаено- вую кислоту можно выделить экстракцией после отделения йод-лактона докозагексаеновой кислоты. Так же может быть выделена арахидоновая кислота. Способ выделения кислот основан на разной скорости лактонизации и прочности цикла йод-лактона. Реакцию проводят при температуре 0-25°С, время реакции 3-300 мин. Содержание в концентрате эйкозапентаеновой кислоты 52%, докозагексаеновой - 46%, выход соответственно 51,9 и 51,4%. Из концентрата может быть получен метиловый эфир докозагексаеновой кислоты с выходом 60,5-62,7% и чистотой 98,1- 98,2%. Выход из рыбьего жира эйкозапентаеновой кислоты 58,2-65,6% с чистотой 95,3-96,2%, докозагексаеновой - 62,3% с чистотой 96,3%, Выход арахидоновой кислоты из жира печени крысы 50% (на исходное количество в жире) с чистотой 98,2%. Выход этиловых эфиров эйкозапептаеновой и докозагексаеновой кислот из рыбьего жира 61,8% с чистотой 98,7% и 63,4% с чистотой 97,6% соответственно. 5 з.п. Л-лы. S СО OS | OKKiSb