Способ получения L-глутамина Советский патент 1991 года по МПК C12P13/14 

Изобретение относится к биотехнологии и касается способа получения L-глутамина ферментативным гидролизом его а -N-ацетилпроизводного.

Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта за счет предотвращения деструкции L-глутамина в процессе гидролиза.

Способ получения L-глутамина осуществляют следующим образом.

Раствор о. -(М-ацетил)-глутамина концентрацией 0,05-0,4 моль пропускают через колонку с иммобилизованной аминоацилазой. Процесс ведут в проточном режиме при 37°С, рН 6,9-7,1 и продолжительности контакта а -(М-ацетил} -глутамина с ферментом 0,1-0,5 ч. Выход L-глутамина 85-95%.

Увеличение продолжительности контакта (более 0,5 ч) приводит к снижению выхода L-глутамина за счет его деструкции. Уменьшение продолжительности контакта (менее

0,1 ч) также приводит к снижению выхода целевого продукта (из-за неполноты гидролиза).

Влияние продолжительности контакта а. -{М-ацетил)-глутамина с ферментом и концентрации его в исходном растворе на выход L-глутамина приведены в табл.1

Как следует из табл.1, увеличение концентрации а -(Ы-ацетил)-глутамина в исходном растворе (более 0,4 моль) нецелесообразно в связи с выпадением осадка L-глутамина в колонке с иммобилизованным ферментом и связанными с этим потерями целевого продукта.

Для осуществления способа пригодна любая аминоацилаза. Высокий выход L- глутамина получают при использовании аминоацилазы из свиных почек или из Streptoverticillium olivoreticuli. иммобилизованной на силохроме n-бензохиноном или включением в полиакриламидный гель.

сл

с

о сл о VJ

о о

Результаты влияния вида иммобилизованной аминоацилазы на выход L-глутами- на приведены в табл 2

Пример В реактор емкостью 100 л загружаю1 «-{М ацетил)-1--глутамин, 80 л дистиллированной воды и добавлением водного аммиака доводят рН раствора до 6,9-7,1 Дистиллированной водой объем раствора доводят до 100 л

В термостатируемую колонку емкостью 2,5 л загружают I кг (2,5 л) влажного препарата (содержание сухого вещества 45%) иммобилизованной аминоацилазы

С помощью дозирующего насоса через термостатированную при 37°С колонку пропускают приготовленный раствор а -{N-аце- нич)-1... Кочичестьо L-глутамина в эгюате определяет дюрмольным ттровани- ем элюата. Элюаг упаривают s вакуум-выпарном аппарате добавляют пятикратный объем этиловою спирта. Образовавшийся осадок L-,л у.амина отфильфоаывают и су- шаг

Формула изобретения

1 Способ получения L-глутамина, включающий гидролиз а-(М-ацетил)-1-глутамина

действием аминоацилазы при 37°С и рН 6,9-7,1 и выделение целевого продукта, о т- личающийся тем, что. с целью повышения выхода, используют иммобилизованную аминоацилазу и процесс гидролиза

ведут в проточном режиме при концентрации а-(Ы-ацетил)-Ьтлутамина 0 05-0,4 моль и продолжительности его контакта с иммобилизованной аминоэцилззой 0,1-0,5 ч. 2. Способ по п 1. отличающийся

тем, что используют аминоацилазу из Streptoverticlllium olivoreticuli, иммобилизованную на силохроме п-бензохиноном или включением в полиакриламидный гель. 3 Способ по п 1, отличающийся

тем, что используют а /иноацилазу из свиных почек, иммобилизованную на силохроме n-бензохиноном или включением в полиакриламидный гель

Изобретение относится к биотехнологии и касается способа получения L-глута- мина ферментативным гидролизом его а -N-ацетилпроизводного Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта за счет предотвращения деструкции L-глу тамина в процессе гидролиза. Раствор a-(N- ацетил)-L-глутамина концентрацией 0,05-0,4 моль пропускают через колонку с иммобилизованной аминоацилазой Процесс ведут в проточном режиме при 37°С, рН 6,9-7,1 и продолжительности контакта 0,1-0,5 ч Используют аминоацилазу из свиных почек или из Streptoverticillium ollvoreticull, иммобилизованную на силох- роме n-бензохиноном или включением в по- лиакриламидный гель Выход L-глутамина 85-45%. 2 з п ф-лы, 2 табл.

Т а б г и ц а 1

Таблица 2