СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТИМИНРИБОЗИДА Советский патент 1964 года по МПК C07D239/10 

Тиминрибозид является составной частью растворимой РНК - основного переносчика информации при сиитезе белка. Кроме того, синтез тиминрибозида позволит получить некоторые аналоги природных коферментов, играющих важную роль в превращениях углеводов. До настоящего времени источником получения тиминрибозида являлись либо растворимая РНК, содержащая 0,1% тиминрибозида, либо синтетические методы, например следующие:

а)Способ рибозилирования тимина, заключающийся в конденсации дитимин-Hg с галоидным производным ацилированного сахара в толуоле или ксилоле с последующим удалением ацильной защиты гидролизом НС1 в метаноле при комнатной температуре. Однако выход получаемых продуктов недостаточен -

от 5 до 25 %.

б)Способ оксиметилирования уридина, заключающийся в конденсации уридина с формальдегидом при 50°С, отделении 5-оксиметилуридина от побочных продуктов на Дауэкс-1

с последующим гидрированием над PtOa в 50%-ной уксусной кислоте при 3 атм в течение 9 час. Выход 5-оксиметилуридина не нревыщает 19%, 5-метилуридина - 18%.

(реакция Манниха) при 90°С в течение 3 час, затем полученный 5-(диэтиламинометилен)уридин элюируют на Дауэкс-50 1 н. аммиаком. Выход 40-50%. Чистота продукта доказана методами электрофореза, бумажной хроматографии и УФ-спектром. 5-(Диэтиламинометилен) -уридин гидрируют над PtOo в этаноле при 70°С и 1 атм в течение 10 час, подкисляют муравьиной кислотой, отделяют на Дауэкс-50 от непрогидрировавшего продукта. Выход 5-метилуридина 50%. Чистота продукта доказана методами электрофореза и бумажной хроматографии.

Новый способ получения тиминрибозида отличается от известных тем, что для введения метильной группы в 5 положение уридина используется реакция Манниха с последующим гидрированием полученного 5-(диэтиламин)метиленуридина. Кроме того, выход на стадии аминометилирования составляет 40-50% (в известном способе оксиметилирования уридина 19%), при введении метильной группы по этому методу в уридине не образуется димеров и гидрирование протекает мягче. Выход составляет 50-60%. К 500 мг (2 моль) 95%-ного уридина добавляют 2 мл (20 моль) диэтиламина н7 мл воды и осторожно при встряхивании по каплям добавляют ,2 мл ( моль) 40%-ного раствора формальдегида, запаивают ампулу и греют на кипящей водяной бане 3 час. Ампулу вскрывают, реакционную смесь упаривают в вакууме, разбавляют водой до 300-400 мл, подкисляют муравьиной кислотой до рН 2-3 и пропускают через Даузкс-50 (Н+ - форма, объем смолы 100 мл). При этом элюируется непрореагировавший уридин, который может быть использован вторично. 5-(Диэтиламинометилен)-уридин элюируют 120-150 мл 1 н. раствора аммиака. Раствор упаривают, остаток переосаждают из метанола ацетоном. Получают 280 лг (42% от теоретического) 5- (диэтиламинометилен) -уридина, строение которого доказывается данными электрофореза (при рН 4 вещество имеет положительный заряд); бумажной хроматографией: R 0,07 , в системе вторичный бутанол, насыщенный водой (Ry: уридина 0,23) и УФ-спектра (рН 12, max 267лiЛJ/C; 245 ммк; 6400; Smin 4500). б) Гидрирование 5- (диэтиламинометилен) уридина. 100 .иг (0,3 лолй) 5-(диэтиламинометилен)уридина растворяют при нагревании в 2 ял воды, добавляют 8 мл этанола и 100 мг РЮз и гидрируют 10 час при температуре 70°С (1 атм). Раствор упаривают, разбавляют водой, подкисляют муравьиной кислотой до рН 2-3 и отделяют от непрореагировавшего 5-(диэтиламинометилен)-уридина пропусканием через Дауэкс-50 (Н+-форма, объем смолы 40 жл). Раствор упаривают, остаток высушивают, переосаждают из метанола ацетоном. Выход 38 мг (50%).Строение доказывается данными электрофореза (при рН 4 вещество нейтрально), бумажной хроматографией: R/ 0,35 в системе вторичный бутанол, насыщенный водой (Ry уридина 0,23). Полученный препарат превращают в тиминрибозид-51-фосфат известным методом. Предмет изобретения Способ получения тиминрибозида из уридина и формальдегида с последующим гидрированием полученного продукта над PtOg отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса, уридин конденсируют с формальдегидом и диэтиламином и гидрирование ведут в этиловом спирте при температуре 70°С