t
(21)4722440/13
(22)30.06.89
(46) 23.08.91 . Бкш. № 31
(71)Научно-исследовательский институт овощного хозяйства
(72)В.Б.Беляева, Е.А.Худякова, В.Ш.Коган и В.И.Ключников
(53)576.8(088.8)
(54)СПОСОБ ОТБОРА 1ЛТАШОВ ГРИБОВ TRICHODERMA - АНТАГОНИСТОВ ФИТОПАТО- ГЕННЫХ ГРИБОВ
(57) Изобретение относится к микробиологии и фитопатологии и касается способа отбора штаммов грибов Trichoder- .ma - антагонистов Аитопатогенных грибов, используемых для защиты растений от болезней. Целью изобретения является отбор более активных штаммов. Способ отбора штаммов Грибов Trichoderj ma - антагонистов йитопатогенных грибов, заключается в том, что на плот- ную агаровую среду засевают два штамма грибов вида Trictioderma, культивируют совместно и отбирают штаммы, образующие при совместном культивировании валикообразные утолщения в зоне соприкосновения колоний грибов. Способ позволяет отобрать более активные штаммы грибов Trichoderma - антагонистов фитопатогенкых грибов. 4 табл.
Изобретение относится к микробиологии и фитопатологии и касается способа отбора штаммов грибов FRICHODERMA - антагонистов фитопатогенных грибов, используемых для защиты растений от болезней. Целью изобретения является отбор более активных штаммов. Способ отбора штаммов грибов FRICHODERMA - антагонистов фитопатогенных грибов, заключается в том, что на плотную агаровую среду засевают два штамма грибов вида FRICHODERMA, культивируют совместно и отбирают штаммы, образующие при совместном культивировании валикообразные утолщения в зоне соприкосновения колоний грибов. Способ позволяет отобрать более активные штаммы грибов FRICHODERMA - антагонистов фитопатогенных грибов, 4 табл.
Изобретение относится к микробиологии и Фитопатологии и касается способа отбора штаммов грибов Trichoderma - антагонистов Аитопатогенных грибов, используемых для защиты растений от болезни.
Целью изобретения является отбор более активных штаммов.
Способ отбора штаммов грибов Trichoderma - антагонистов фитопато- генных грибов заключается в том, что на плотную агаровую среду методом встречных колонии засевают два штамма гриба вила Trichoderma в частности Trichoderma lignorum и Trichoderma harzianum, культивируют совместно, просматривают выраженные ксхтоник и отбирают штаммы, образующие при совместном культивировании волнообразные утолщения в зоне соприкосновения колоний грибов.
Пример 1. Используют штамм Trichoderma viridae и Trichoderma harzianum, различающиеся происхождением; подбор пар произволен. Исследуемые штаммы грибов представлены в табл. 1. Штаммы СК-85.И У относятся к виду Trichoderma harzianum, а все остальные штаммы - к Trichoderma viridae.
Штаммы высевают на картоЛельно- гл юкозный агар (1 л воды, 200 г картофеля, 15 г глюкозы, 15 г агар-агара) в чашки Петри попарно на расстоянии 7 см друг от друга.
Для посева используют швейную иглу, вставленную в держатель ушком вверх. Иглу обмакивают в суспензию (110 спор/мл), при этом инокулюм задерживается в ушке, после чего производят посев на агаризованную ере05
j
05
00
Јь
ду. Чашки Петри устанавливают в термостат и культивируют посеянные колонии при 25 С в течение 5 дн. Затем чашки просматривают и отбирают пары штаммов грибов с 6 типом взаимоотношений (табл. 1). Различные штаммы триходер- мы по разному взаимодействуют друг с другом.
Из грибов рода Trichoderma исполь- зованы Trichoderma harzianum (CK-85 и У) и Trichoderma viridae (остальные ) .
Анализ полученных данных позволяет выделить шесть типов взаимоотношений:
фунгистатический алиментарный антагонизм, проявляющийся в нарастании колонии изолята на колонию другого изолята и прекращении роста последней (1);
фунгистатический антибиотический антагонизм, при котором рост одного из изолятов замедляется на некотором расстоянии от колонии другого изолята (2);
фунгистатический территориальный антагонизм, при котором рост одного изолята ограничивается колонией другого изолята по всей поверхности чаш- ки (3);
взаимный антагонизм, при котором задерживается рост обоих изолятов (4) индифферентные отношения, колония одного изолята нарастает на колонию другого изолята с сохранением активного роста либо образуются рав- ные по размеру колонии (5);
стимуляция, образование на границе соприкосновения колоний изолятов характерных валикообразных утолще1- ний (6).
Исследуют штаммы грибов, имеющих разпичные взаимоотношения, на антагонистические свойства по отношению к фитопатогенпым грибам, таким как Fusariuri uxysporum, Fusariutti culmo- rum.
Для этого штаммы грибов Trichoderma высевают попарно друг с другом методом встречных колоний в различных сочетаниях, одновременно те же штаммы высевают с фитопатогенными грибами указанных видов (известным способом) . Цтаммы культивируют при 25 С в течение 5 дн. Затем из выросшей колонии, на границе их соприкосновег- ния, выделяют изоляты штаммов трихо
0
5
0
5
0
дермы. Выделенные изоляты проверяют на антагонистическую активность методом блоков по методике ВИЗР. Полученные результаты представлены в табл . 2 - 4.
Антагонистическая активность штаммов триходермы (известный способ) приведена в табл. 2.
Антагонистическая активность штаммов триходермы после их совместного культивирования друг с другом приведена в табл. 3.
Как видно из приведенных в табл.2 и 3 данных, у штаммов с 6 типом взаимодействия после их совместного культивирования повышается антагонистическая активность по сравнению со i штаммами, отобранными известным способом, а у штаммов с другими типами взаимоотношений антагонистическая активность остается на известном уровне либо становится ниже.
Штаммы, образующие валикообразные утолщения, проявляют наиболее высокую антагонистическую активность по отношению к фитопатогенным грибам. От- бирают штаммы, образующие при совме- стном культивировании соприкосновения колоний и исследуют антагонистические свойства их по отношению к фитопатогенным грибам Fusarium oxysporum и Fusarium culmorum.
Антагонистическая активность штаммов Trichoderma viridae приведена в табл. 4.
Как видно из табл. 4, способ позволяет не только отобрать наиболее активные штаммы грибов рода Trichoderma, но и повысить их активность.
Формула из-обретения
Способ отбора штаммов грибов Tri- choderma-антагонистов фитопатогенных грибов путем посева методом встречных колоний штамма гриба рода Trichoderma и исследуемого гриба на поверхность плотной агаризованной среды с после- 1дующим культивированием и отбором гриба-антагониста по характеру роста, отличающийся тем, что, с целью отбора более активных штаммов, в качестве исследуемого гриба используют грибы рода Trichoderma, а отбор штаммов-антагонистов осуществляют по образованию валикообразного утолщения в зоне соприкосновения колоний грибов.
Т а б л и ц а 1
Истокский
То же
СК-85 СК-85 - Ш
Л-17 Л-17 - ТК-13
У У - Исток- скин4
ТК-13 ГК-13 - 111
Продолжение табл.2
ТаблицаЗ
о же
usarium ulmorum
То же
1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5
1 2 3 4 5 1
2 3 4 5
То же
30,0
29,5
29,2
27,8.
28,2
27,5
26,8
28,-2
27,3
27,0
17,5 16,8 16,2 16,5 16,5 18,3 20,5 19,8 20,7 21,5
119/80 F.oxysporum
119/80 F.culmorum
Истокский а б л и ц а 4
42,5 44,0 41,0 41,7, 43,5
40,3 39,7 41,0 40,5 40,0 29,2 32,0 33,0 32,7 35,0
Полное подавление
То же
