Способ получения суспензии для реконструкции мембран клеток печени Советский патент 1991 года по МПК G01N33/48 A61K47/00 

Изобретение относится к медицине, и в частности может быть использовано при создании лекарственного средства ,пля лечения заболевании печени

Цель изобретения - повышение репарирующего действия суспензии.

Цель достигается путем смешивания фосфагидилхолина хлопчатника (ФХхл) и детергента солодкового пенообразователя (СП) при соотношении компонентов 1(0,1- 0,4) мае ч. с последующей обработкой полученной смеси ультразвуком в режиме средней мощности в течение 6-10 мин.

Способ осуществляют следующим образом.

Готовят суспензию из ФХхл + СП. Для этого берут 1 маг. ч, ФХхл, растворяют в органическом рлстворителе (бензол, метанол, хлороформ) после чего растворитель

упаривают досуха и приливают зодный г зстоор. содержащей СП Содержание СП составляв 0,1 0,4 мчг ч на 1 vac ч. ФХхл, содержание ФХхл в 1 мл растоора 15 25мг. Компоненты тщательно перемешивают до растворения ФХхл. Полученную мутную жидкость переносят в стакан для ультразвуковой обработки и воздействуют ультразвуком в режиме средней мощности (180 Вт, частота 30 кГц) в течение 6-10 мин при температуре не выше 10°С. Когда суспензия становится прозрачной, воздействие ультразвуком заканчивают Полученную таким образом суспензию используют для реконструкции мембран In vitro и In vivo In vitro поврежденные мембраны эндоп- лаэматического ретикулума (1-3 кг белка микросом в 1 мл водного раствора} смеши вают с суспензией ФХхл + СП (1 4 мг фосО VJ СА Ю ON О

фолипида 1 мл водного раствора) и инкубируют при 4°С в течение 1 ч. In vivo суспензию ФХхл +- СП вводят крысам с токсическим гепатитом в дозе 20 мг фосфо- липида на 100 г массы в течение 3 дн. Реконструирующее действие суспензии оценивают по скорости инактивации ци- тохрома Р-450 в интактных и поврежденных мембранах. В интактных мембранах время полуинактивации цитохрома Р-450 составляет 30 мин. Использование суспензий, содержащих ФХхл + СП при соотношении компонентов 1:(0,1-0,4) мае.ч. с последующей обработкой ультразвуком в режиме средней мощности в течение 6-10 мин сопровождается увеличением времени полуинактивации гемрпротеина с 4-5 мин в поврежденных мембранах до 21-27 мин после их инкубации суспензией ФХхл + СП, а в случае использования препарата Эссенциале оно составляет 6 мин,

Пример 1. Способ осуществляют аналогично описанному, но используют суспензию ФХхл + СП при их соотношении 1:0,1 мае.ч., время озвучивания составляет 6 мин. При этом получают суспензию, обладающую репарирующим действием и вызывающую увеличение времени полуинактивации цитохрома Р-450 до 21 мин в поврежденных мембранах после их инкубации с суспензией ФХхл + СП по сравнению с 4-5 мин в мембранах без воздействия суспензии.

Пример 2. Способ осуществляют аналогично описанному, но используют суспензию ФХхл + СП при их соотношении 1:0,4 мае.ч. время озвучивания составляет 10 мин. При этом получают суспензию, обладающую репарирующим действием и вызывающую увеличение времени полуинактивации цитохрома Р-450 до 24 мин в поврежденных мембранах после их инкубации с суспензией ФХхл + СП по сравнению с 4-5

мин в мембранах без воздействия суспензии.

Пример 3. Проверка репарирующего действия суспензии при оптимальном соотношении ФХхл и СП 1:0,25 мае.ч. и времени

озвучивания 8 мин показывает, что в этом случае после инкубации поврежденных мембран с суспензией время полуинактивации цитохрома Р-450 в них составляет 27 мин по сравнению с 4-5 мин в мембранах без воздействия суспензии. Кроме того, введение такой суспензии крысам с токсическим гелиотриновым гепатитом приводит к увеличению N-деметилазной и р-гидроксилазной активности в 2 раза и

времени полуинактивации цитохрома Р- 450 в 5 раз в поврежденных мембранах эн- доплазматического ретикулума печени крыс по сравнению с мембранами животных, не получавших суспензии ФХхл + СП.

Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я Способ получения суспензии для реконструкции мембран клеток печени, включающий смешивание фосфатидилхолина и детергента в определенном соотношении, отличающийся тем, что, с целью повышения репарирующего действия суспензии, используют фосфатидилхолин из хлопчатника, а в качестве детергента - солодковый пенообразователь при соотношении компонентов 1:0,1 -0,4 соответст- венно с последующей обработкой полученной смеси ультразвуком в режиме средней мо щности в течение 6-10 мин.

Изобретение относится к медицине, предназначено для создания лекарственного средства для лечения заболеваний печени. Цель изобретения - повышение репарирующего действия суспензии путем смешивания фосфатидилхолина хлопчатника (ФХхл) и детергента солодкового пенообразователя (СП) при соотношении компонентов (в массовых частях) 1:(0,1 - 0,4) мас.ч. Затем смесь обрабатывают ультразвуком в режиме средней мощности (180 Вт, частота 30 кГц) 6 - 10 мин при 10°С. Когда суспензия становится прозрачной, воздействие ультразвука прекращают. Суспензию используют для реконструкции мембран.