Изобретение относится к способу получения пептидов или их фармацевтически приемлемых солей - новых биологически активных соединений, которые могу г найти применение в медицине.
Цель изобретения - способ получения новых производных пептидов, обладающих низкой токсичностью и более высокой ре- ннин-ингибирующей активностью
Пример 1. Бис(1-нафтилметил)уксус- ная кислота.
2,86 г (0,12 ммоль) натрич растворяют в 250 мл безводного этанола и при охлаждении льдом к полученному раствору добавляют 19,95 г (0,12 ммоль) диэтилмалоната. Затем реакционный раствор перемешивают в течение 1 ч, после чего по каплям добавляют 22,00 г (0,12 ммоль) 1-хлорметилнафталина и полученный раствор перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре, а затем перемешивают в течение 3 ч при 50°С. Выделившуюся соль отфильтровывают, а полученный фильтрат концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Остаток очищают с помощью жидкостной хроматографии среднего давления на колонке с силикагелем до получения 15.2 г
(Л
СО
(41,3%) диэтил(1-нафтилметил)малоната и 9.8 г (17,8%) диэтилди(1-нафтилметил)мало- ната.
9,8 г (22,2 г ммоль) диэтилди(1-нафтил- метил)малоната растворяют в 100 мл смеси 1:1 по объему бутанолэ и воды, 10 г гидроокиси калия добавляют к полученному раствору и полученную смесь нагревают при кипении с обратным холодильником при 150°С в течение 8 ч. Затем реакционную смесь концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Остаток смешивают с водой, а затем добавляют концентрированную соляную кислоту до рН 1. Выделившиеся кристаллы отфильтровывают до получения 6,2 г (82%) указанного соединения в виде белых кристаллов с т.пл, 172- 174°С.
Пример 2. 2-(1-Нафтилметил)-6-фе- нилгексановая кислота.
1,3 г(57 ммоль) натрия растворяют в 200 мл безводного этанола. Этот раствор смешивают с 14,8 г (50 ммоль) диэтил(1-нафтил- метил)малоната при охлаждении льдом и перемешивают в течение 1 ч. 11,7 г (55 ммоль) 4-фенилбутилбромида добавляют затем по каплям и полученную смесь перемешивают в течение 6 ч при 50°С. Выделившуюся соль отфильтровывают и полученный фильтрат концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем (элюируя смесью 1:4 по объему этилацетата и гексана) до получения 15,4 г (71 %) диэтил- 2-(1-нафтилметил)-2-(4-фенилбутил)мало- ната.
Это соединение обрабатывают так же. как описано в примере 1, гидроокисью калия в водном бутаноле до получения 6,8 г (58%) указанного соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.
Пример 3. Диэтил-(1-нафтилме- тил)малонат.
Этилат натрия, полученный из 2,3 г (0,1 грамм-атом) натрия суспендируют в 250 мл диметилформамида. Добавляют 16,0 г диэ- тилмалоната при охлаждении льдом до получения суспензии и полученную смесь перемешивают при 0°С в течение 30 мин, а затем при комнатной температуре в течение 1 ч. К этому раствору добавляют 100 мл диметилформамида, содержащего 17,6 г (0,1 ммоль) 1-хлорметилнафталина, в течение 2 ч. Затем смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, после чего растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток смешивают с водой, а затем экстрагируют этилацетатом. Этилацетатный слой промывают насыщенным водным раствором натрийхлорида, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. После выпаривания остатка при пониженном давлении получают 21,3 г указанного соединения в виде бесцветной вязкой жидкости с т.кип. 210°С (5 мм рт.ст., 667 Па).
Пример 4. Диэтилбензил(1-нафтил- метил)малонат.
01,05 г (25 ммоль) 55 мас.%/мас. суспензии натрийгидрида в минеральном масле промывают трижды безводным гексаном, чтобы высушить ее, а затем смешивают с 100 мл диметилформамида. К этой суспен5 зии добавляют 7,21 г (24 ммоль) диэтил(1- нафтилметил)малоната при охлаждении льдом. После того, как выделение водорода прекращается, реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин, а затем добавля0 ют 4,10 г (24 ммоль) бензилбромида и полученную смесь перемешивают в течение еше 2 ч при комнатной температуре. В конце этого промежутка времени реакционную смесь концентрируют, выпаривая при пони5 женном давлении. Остаток смешивают с водой и экстрагируют этилацетатом. Этилацетатный слой промывают насыщенным водным раствором нятрийхлорида, сушат над безводным сульфатом натрия и
0 концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Остаток очищают на хроматографической колонке с силикагалем (элюируя смесью 15:1 по объему гексана и этилацетата) до получения 7.3 г указанного
5 соединения в виде бесцветного маслянистого вещества.
Масс-спектр, гп/е: 390 (М1). Пример 5. Диэтил 2-(2-мегоксиэток- си)этил(1-нафтилметил)малонат.
0Повторяют реакцию, описанную в примере 4. но используют 2,12 г (10 ммоль) 2-(2-метоксиэтокси)этилиодида и 2,0 г (6,7 ммоль) диэтил-(1-нафтилметил)малоната до получения 1,93 г указанного соединения в
5 виде бесцветного маслянистого вещества после очистки на хроматографической колонке с силикагелем (элюируя смесью 10:1 по объему гексзна и этилацетата). Масс-спектр, гг./е :402 (М4.
0П р (л мер 6. Диэтил 2-(2-бензилоксиэтокси)зтил(1-нафтилметил)малонат.
Повторяют реакцию, описанную в примере 4, но используют 3,98 г (10 ммоль) 2-(2-бзкзилоксиэтокси)этилиодида и 3,0 г
5 (1C ммоль) дмзтил(1- -;афтилметил)малоната до лолучения 3,62 г указанного соединения з виде бесцветного маслянистого вещества после очистки на хроматографической колонке с смликагелег (элюируют смесью 8:1 по объему гексана м этилацетата).
Масс-спектр, m/e: 478 (М4).
Пример 7. 1-Бензил-З-нафтилпро- пионовая кислота.
Смесь 7,3 г (18 ммоль) диэтилбензил(1- нафтилметил)малоната. 70 мл бутанола, 70 мл воды и 7 г гидроокиси калия нагревают на масляной бане (150°С) при кипении с обратным холодильником в течение 10 ч. Реакционную смесь охлаждают, а затем концентрируют, выпаривая при пониженном давлении, после чего ее подкисляют концентрированной соляной кислотой и экстрагируют этилацетатом. Этилацетат- ный слой промывают насыщенным водным раствором натрийхлорида, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем (элюируя смесью 1:1 по объему гексана и этилацетата) и полученный твердый продукт перекристаллизовы- вают из смеси гексана и этилацетата до получения 3,29 г указанного соединения в виде бесцветных кристаллов с т.пл. 119- 120°С.
Масс-спектр, m/e: 290 (М).
Пример 8. (2-Метоксиэток- си)(1-нафтил)прог1Ионовая кислота.
Повторяют реакцию, описанную в примере 7, но используют 1,87 г (4,6 ммоль) диэтил 2-(2-метоксиэтокси)этил(1-нафтил - метил)малоната до получения 1,12 г указанного соединения в виде бесцветного масля- нистого вещества после очистки на хроматографической колонке с силикагелем (элюируют этилацетатом).
Масс-спектр, m/e: 302 (М).
Пример 9. (2-Бензилоксиэток- си)(1-нафтил)пропионовая кислота.
Повторяют реакцию, описанную в примере 7, но используют 2,50 г (5,2 ммоль) диэтил 2-(2-бензилоксиэтокси)этил(1-наф- тилметил)малоната до получения 1,76 г указанного соединения в виде бесцветного маслянистого вещества после очистки на хроматографической колонке с силикагелем (элюируют этилацетатом).
Масс-спектр, m/e: 378 (М4).
Пример 10. 4(5)(1-насг-гилме- тил)ацетил}-1 -гистидил-амино}-3(5) окси-6- метил-М- 2(5)-(-)-метил-бутил гепатане1Мид (соединение 1).
Первая стадия. 4(5)-(М-Бензилоксикар- бонил-1-гистидиламино) 3(5)-окси-6-метил- М-{2(5}-{-)-метил6утил гептанамид.
10 мл б н. раствора соляной кислоты в диоксане добавляют к 0,9 г (2,6 ммоль) (3S, 45)-4-трет-бутоксикарбонила-мино-3-окси- 6-метил-М- 2(3)- (-)-метилбутил гептанами- да. Затем реакционную смесь перемешивают в течение 20 мин при комнатной температуре в атмосфере азота, после чего ее выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток растворяют в 10 мл диметилформамида, а затем добавляют 0,26 г (2,6 ммоль) N-метилморфолина при охлаждении льдом до получения раствора (3S, 45)-4-ами- но-3-окси-6-метил-М-{2(5)- (-)-метилбутил геп- танамида. Этот раствор добавляют к 10 мл
0 холодного раствора в диметилформами- де М-бензилоксикарбонил-1 -гистидиназида, полученного из 0,91 г (3 ммоль) N-бензилок- сикарбонил-1 -гистидингидразида путем обработки изопентилнитритом, и полученную
5 смесь перемешивают в течение 5 дней при 4°С. Растворитель отгоняют при пониженном давлении, а затем к остатку добавляют насыщенный водный раствор карбоната калия и полученную смесь экстрагируют эти0 лацетатом. Этилацетатный экстракт промывают насыщенным водным раствором натрийхлорида, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Получен5 ный остаток очищают хроматографически на колонке с силикагелем, элюируя смесью 20:1 по обьему хлороформа и метанола. Нужные фракции концентрируют, выпаривая при пониженном давлении до получе0 ния сиропообразного остатка. Сироп отверждают, добавляя диэтиловый эфир, остаток собирают фильтрованием, в результате чего получают 0,96 г указанного соединения в виде белого порошка, т.пл.
5 158-168°Г.
Вычислено, %: С 62,89; Н 8,01; N 13.58.
C27H41N505
Найдено, %: С 62.73; Н 7,94; N 13,67.
Вторая стадия 4(5)(1-нафтилме0 тил)ацетил -1 -гистидиламино}-3(5)-окси- б- метил-М- 2(5)-(-)-метилбутил гептэнамид.
Бензилоксикарбонильную группу удаляют из соединения, полученного на первой стадии обрабатывая его водородом при ком5 натной температуре в присутствии 5 мае %/мас. до палладия на активированном угле. 91 мг (0,2 ммоль) полученного соединения. 66,5 мг(0,2 ммоль) бис(1-нафтилметил)ук- сусной кислоты и 39,4 мг (0,22 ммоль)
0 М-окси-5-норборнен-2,3-дикэрбоксиимида растворяют в смешанном растворителе, состоящем из 1 мл диметилформамида и 6 мл метиленхлорида. и полученный раствор охлаждают на льду. К полученному раствору
5 добавляют 44 мг (0,4 ммоль) N-метилморфолина и 45,4 мг (0,22 ммоль) дициклогексил- карбодиимида в указанном порядке и полученную смесь перемешивают в течение 1 ч при охлаждении льдом, а затем в течение 10 дней при комнатной температуре Выделившуюся дициклогексилмочевину отфильтровывают, а полученный фильтрат конденсируют, выпаривая при пониженном давлении. К полученному остатку добавляют 5 мас.% объем водного раствора бикарбоната натрия, Выделившееся маслянистое вещество экстрагируют зтилацетатом. Органический1 экстракт промывают насыщенным водным раствором натрийхлорида, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Полученный остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем, используя в качестве элюента смесь 10:1 по объему хлороформа и метанола. Нужные фракции собирают и концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Остаток отверждают, добавляя диэтиловый эфир, и полученный твердый продукт собирают фильтрованием до получения 35 мг целевого соединения в виде бледно-желтого порошка, т.пл. 130- 15°С.
-66° (С 0,1, меганол). Вычислено, %: С 71,54; Н 7,68 ; N 9,70. С43Н53М504 Н20
Найдено, %: С 71,78; Р7.61; N 10,00.
Получение соли.
722 мг (ммоль). 4(5)-{Г Ибис(1-нэфт1ллме- тил)ацетил -1 -гистидиламино}- 3(3)-окси-б- метил-Ы- 2(5)-метилбутил гаптанамид моногидрата растворяют в 30 мл метанола. 10 мл холодной 4 н. соляной кислоты в диок- сане добавляют в метанольный раствор. Раствор вакуумируют, чтобы высушить, при пониженном давлении с получением 757 мг указанного соединения в виде белого порошка.
Пример 11. 4(8)-{М-{Бис(1-нафтилме- тил)ацетил 1--лейциламино}-3(5)-окси- 6-ме- тил-М-этилгекптанамид (соединение 2).
Первая стадия. Этил-4(5НМ-трет-буток- сикарбонил-1 -лейциламимо)-3(5)-окси- 6- метилгептаноат.
Трет-бутоксикарбонильную группу удаляют из 3,06 (10,1 ммоль) этил-(35, 4S)-4- трет-бутоксикарбониламино-3-окси-6-мет- илгептаноата обычными способами (так же, как и на первой стадии примера 10). Полученный продукт растворяют в метиленхло- риде и нейтрализуют триэтиламином при охлаждении льдом. К полученному раствору добавляют 3,48 г (10,6 ммоль) N-трет-буток- сикарбонил-1 -лейцин-М-оксисукцинимида и полученную смесь перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре. Затем добавляют 1,1 мл 3-(М,М-диметиламино)про- пиламина и полученную смесь перемешивают еще в течение 1 ч. Реакционный раствор концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Добавляют этилацетат для растворения остатка и этилацетатный раствор промывают 5 мас.%/объем водным раствором бикарбоната натрия, 10 мае. %
объем водным раствором лимонной кислоты и насыщенным водным раствором на- трйихлорида в указанном порядке. Затем сушат над безводным сульфатом натрия. Растворитель отгоняют при пониженном
0 давлении и полученный остаток перекриг сталлизовывают из смеси диэтилового эфира и гексана до получения 3,02 г указанного соединения в виде бледно-красного порошка, т.пл. 113-114°С.
5Вычислено, %: С 60,55; Н 9,68; N 6,73.
C21H/10N206
Найдено, %; С 60,36; Н 9,70; N 6.66. Вторая стадия, 4(5)-(М-трет-Бутоксикар- бонил-1-лейциламино)-3(5)-окси- бметил0 гептановой кислоты гидразид.
2,65 г (6,36 ммоль) соединения, синтезированного на первой стадии и 3,19 г (63,7 ммоль) моногидрата гидразина растворяют в 80 мл диметилформамида и полученную
5 смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 19 ч, а затем еще 12,5 ч при 50°С. Реакционный раствор концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. К остатку добавляют воду и этилацетат. Выде0 лившийся нерастворимый продукт отфильтровывают. Полученный фильтрат промывают водой, а затем сушат над безводным сульфатом магния. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток
5 и нерастворимый продукт, который был выделен при фильтровании, объединяют и суспендируют в кипящем диэтиловом эфире. Выделившееся соединение собирают фильтрованием и сушат до получения 1,73 г ука0 занного соединения в виде бесцветных призм, т.пл. 140-147°С.
Третья стадия. 4(5)-(М-трет-Бутоксикар- бонил-1 -лзйциламино)-3(5)-окси- б-метил-N- эти л гептана ми д.
5 402 мг (1,00 ммоль) соединения, синтезированного на второй стадии, растворяют в 8 мл диметилформамида, а полученный раствор охлаждают до -60°С. К охлажденному раствору добавляют 0,62 мл 6 н.раствора
0 соляной кислоты в диоксане и 0,18 мл (1,35 ммоль) изопентилнитрита и полученный раствор перемешивают в течение 10 мин при -2С°С, в затем снова охлаждают до -60°С. Затем раствор нейтрализуют, добавляя 0,61
5 г N-метилморфолина, после чего добавляют 108 мг (1,32 ммоль) этиламингидрохлорида и реакционную смесь перемешивают при 5°С Б течение 20,5 ч. Затем реакционную смесь вылизакэт в воду и полученную смесь экстрагируют этилацетатом. Этилацегатную фазу промывают 5 мае. % объем водным раствором бикарбоната натрия, 10 мае. %/объем водным раствором лимонной кислоты и насыщенным водным раствором натрийхлорида в указанном порядке, а затем сушат над безводным сульфатом магния. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток промывают гексаном, собирают фильтрованием и сушат до получения 345 мг указанного соединения в виде белого порошка, т.пл. 193-197°С. Вычислено, %: С 60,69; Н 9,94; N 10.11.
C21H/MN305
Найдено, %: С 60.46; Н 10,04; N 10.13.
Четвертая стадия. 4(5)(1-наф- тилметил)ацетил -1 -лейциламино}-3(5)- ок- си-6-метил-М-этилгептанамид.
трет-Бутоксикарбонильную группу удаляют из 99 мг (0,24 ммоль) соединения, полученного на третьей стадии. Полученный продукт растворяют в диметилформамиде. К полученному раствору добавляют 91 мг (0,24 ммоль) бис(1-нафтилметил)уксусной кислоты, 50 мг (0,28 ммоль) 90%-ного диэ- тилфосфороцианидата и 64 мг (0,63 ммоль) триэтиламина при охлаждении льдом и полученную смесь перемешивают в течение 14,5 ч при комнатной температуре. Реакционный раствор последовательно обрабатывают, как описано в примере 10 (вторая стадия), и полученный продукт перекристал- лизовывают из смешанного растворителя, состоящего из метиленхлорида и гексана, до получения 59 мг указанного соединения в виде бесцветных иголок, т.пл. 93-96°С.
-157°С (С 0,1, метанол).
Вычислено, %: С 75.32; Н 8,06; N 6,59.
C4oH5iN304 1/2H20
Найдено. %: С 75,06; Н 8,08; N 6.60.
Пример 12. 4(5)(1-нафтилме- тил)эцетил -1 -лейциламино}-3(5) -окси-6-ме- тил-М-(2-метилбутил)гептанамид (соединение 3).
Первая стадия. 4(5)-(1 -трет-Бутокси- карбонил)-1 -лейцилэмино)-3(5)-окси -6-ме- тил-М-(2-Х-метилбутил)гептанамид.
344 мг (1.23 ммоль) (35, 45)-4-амино-3- окси-6-метил-М-(2-метилбутил)гепт.жамид моногидрохлорида растворяют в метипенх- лориде. Этот раствор нейтрализуют триэти- ламином при охлаждении льдом, а затем к нему добавляют 420 мг (1,28 ммоль) М-трет- 6утоксикарбонил-1 -лейцин М-оксисукцини- мида. Полученную смесь перемешивают в течение 22,5 ч при комнатной температуре, а затем добавляют 0,2 мл 3-(М,1 1-диметила- ммно)пропиламина и полученную смесь перемешивают еще 1 ч. Затем реакционный
раствор концентрируют выпариванием при пониженном давлении. Добавляют к остатку метиленхлорид и полученный раствор промывают 5 мас.%/объем водным раствором бикарбоната натрия, 10 мас.%/обьем водным раствором лимонной кислоты и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия в указанном порядке, а затем сушат над безводным сульфатом магния. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Полученный остаток промывают этилацетатом, отфильтровывают и сушат до получения 328 мг указанного соединения в виде белого порошка, т.пл. 166-168°С.
Вычислено. %: С 62,99; Н 10,35; N 9,18.
C24H47N305
Найдено, %: С 62,92. Н 10,16; N 9,14.
Вторая стадия. 4(5)-{М-{Бис(1-нафтилме- тил)ацетил -1 -лейциламино}-3(5)- окси-б-метил-М-(2-метилбутил)гептанамид.
трет-Бутоксикарбонильную группу удаляют из 100 мг (0,22 ммоль) 4(5)-(М-трет-бу- токсикарбонил- -лециламино)-3-(3)-окси- 6-метил-М-(2-метилбутил)гептзнамида, полученного на первой стадии, и полученный продукт растворяют в диметилформамиде. К этому раствору добавляют 77 мг (0,23 ммоль) бис(1-нафтилметил)уксусной кислоты. 42 мг(0,23 ммоль) 90%-ного ди этил фосфороцианидэта и 52 мг (0.54 ммоль) триэтилэмина при охлаждении льдом и полученную смесь перемешивают а течение 4 ч при комнатной температуре. Затем реакционный раствор концентрируют выпаризанием при пониженном давлении. К остатку добавляют этилацетат и полученный раствор промывают 5 мас.%/обьем водным раствором бикарбоната натрия, 1 н. соляной кислотой и насыщенным водным раствором
натрийхлорида в указанном порядке, после чего его сушат над безводным сульфатом магния. Растворитель отгоняют при пониженном давлении, а полученный остаток перекристал- лизовывают изсмешанного растворителя, состоящего из метиленхорида и гексанз. до получения 40 мг указанного соединения в виде белого порошка, т.пл. 98-100°С.
--143° (С 0,1, метанол). Вычислено, %: С 74,96; Н 8,49; N 6,10. C43H57N304 1/2 Н20 Найдено, %: С 75,10; Н 8,56; N 6,10.
Пример 13. 4(5)-{Ы-бис(1-нафтилме- тил)ацетил -1 -лейциламино}3(5)- окси-6-ме- тил-М-(2-этоксиэтил)гептанамид (соединение 4).
Первая стадия. 4(5)-(М-трет-Бутоксикар- бонил-1 -лейциламино)-3(5)-окси-6- метил-N- (2-этоксиметил)гептанамид.
трет-БутоксикарЬонильную группу удаляют из 539 мг (1,56 ммоль) (35, 45)-4-трет- бутоксикарбониламино-З-окси-6- метил-М-(2-этоксиэтил)гептанамида обычным способом, а затем полученный продукт растворяют в метиленхлориде при охлаждении льдом, и нейтрализуют триэтиламином. К этому раствору добавляют 534 мг (1,63 ммоль) N-трет -бутохсикарбонил-1 -лейцин- N-оксисукцинимида и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 22 ч. Затем добавляют 0,2 мл 3- (М,М-диметиламино)пропиламина и полученную смесь перемешивают еще в течение 1 ч.
Реакционный раствор концентрируют выпариванием при пониженном давлении. К остатку добавляют метиленхлорид и пол ученный раствор промывают 5 мас.%/объ- ем водным раствором бикарбоната натрия, 10 мае.%/объем водным раствором лимонной кислоты и насыщенным водным раствором натрийхлорида в указанном порядке, а затем сушат над безводным сульфатом мги- ния. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Полученный остаток перекристаллизовывают из смешанного растворителя, состоящего из метиленхлори- да и этилацетата до получения 294 мг указанного соединения в зиде бесцветных иголок, т.пл. 172-173°С.
Вычислено, %: С 60,10; Н 9,87; N 9,14
C23H45N306
Найдено, %: С 59,99; Н 9,96; N 9,09.
Вторая стадия. 4(5)(1-нзфтилме- тил)ацетил -1 -лейциламино}-3(5)-окси- 6-ме- тил-Щ2-этоксиэтил)гептанамид.
трет-Бутоксикарбонильную группу удаляют из 105 мг (0,23 ммоль) 4(5)-(Ы-трет-бу- токсикарбонил-1 -лейциламино)-3(5)-окси- 6-метил-М-(2-этоксиэтил)гептанамида обычным способом, а затем полученный продукт растворяют в диметилформамиде. К этому раствору добавляют 78 мг (0,23 ммоль) бис(1-нафтилметил)уксусной кислоты, 43 мг (0,24 ммоль) 90%-ного диэтилфосфороцизни- дата и 50 мг (0,49 ммоль) триэтиламина при охлаждении льдом и полученную смесь перемешивают в течение 5,5 ч при комнатной температуре. Реакционный раствор обрабатывают, как на второй стадии примера 12, а полученный продукт перекристаллизовывают из смешанного растворителя, состоящего из метиленхлорида и диэтилового эфирв, до получения 58 мг указанного соединений в виде бесцветных иголок, т.пл. 168-169°С.
-168° (С 0,1, метанол). Вычислено, %; С 73.98; Н 8,13 N 6.16.
C42H55N305
Найдено, %: С 73,85; Н 8,24: N 6,14. Пример 14. 4(5)(1-нафтилме- тил)ацетил -1-лейциламино)-3(5)-окси- 6-ме- (3,4-диметоксифенэтил)гептанамид
(соединение 5).
Первая стадия. 4(5)-(М-трет-Бутоксикар- бонил-1 -лейциламино)-3(5)-окси-6-метил- N- (3,4-диметоксифенэтил)гептанамид.
0,74 г (1,7 ммоль) (3S, 45)-4-трет-буток0 сикарбонил-амино-3-окси-6-метил-Ы-(3,4-д . иметоксифенэтил)гептанамида растворяют в 8 мл 6 н. раствора соляной кислоты в ди- оксане и полученную реакционную смесь после перемешизания в течение 20 мин при
5 комнатной температуре выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток растворяют в 20 мл мзтиленхг.орида и при охлаждении льдом полученный раствор нейтрализуют, добавляя 0.24 мл триэтила0 мина. Затем добавляют 0,58 г (1,8 ммоль) -трет-бутоксикар6опил-1 -лейцин-Р -окси сукцинимида, растворенного в 5 мл мети- ленхлорида. Реакционную смесь перемешивают в течение 20 ч при комнатной
5 температуре, после чего к смеси добавляют 0,2 мл 3-(М,М-диметилэмино)пропиламина и реакционную смесь перемешивают еще в течение 1 ч. Реакционный раствор концентрируют выпариванием при пониженном
0 давлении, а затем к полученному остатку добавляют воду и этилацетат. Выделившийся остаток отфильтровывают и собирают органический слой. Этот органический слой промывают 10 мае.%/объем водным рас5 твором лимонной кислоты. 5 мае.%/объем водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором натрийхлорида в указанном порядке, а затем сушат над безводным сульфатом магния. Раство0 ритель отгоняют при пониженном давлении. Остаток и осадок отфильтровывают, как описано, объединяют и кристаллизуют из смешанного растворителя, состоящего из метиленхлорида и этилацетата, до пол5 учений 0,69 г указанного соединения в виде бесцветных иголок, т.пл. 192-193°С.
Вычислено, %: С 63,13; Н 8,95; N 7,62.
С29НадЫзОт
Найдено, %: С 63,06; Н 8,83; N 7,56.
0Вторая стадия. 4(5)(1-нафтилметил)ацетил -Ь-лейциламино}-3(5)-окси- 6-ме- гил -(3,4-д /1метохсифенэтил)гептанамид.
153мг (0,28 ммоль) 4(5)-(М-трет-бутокси- кзрбонил- -лейциламино)-3(5)-окси-6- ме5 тил-М-(3,4-диметоксифекэтил)гептэнамида растворяют з 1,4 мл 5 н. раствора соляной кислоты ЕЗ диоксзне ы реакционный раствор перемешиеают в течение 20 мин при комнатном температуре, а затем выпаривают досуха пониженном давлении. Остаток
растворяют в 3 мл диметилформамида и перемешивают при охлаждении льдом. К этому раствору добавляют 93 мг (0,27 ммоль) бис(1-нафтилметил)уксусной кислоты, 49 мг (0,7 ммоль) 90%-ного диэтилфосфороциа- нилата и 59 мг (0,58 ммоль) триэтиламина и реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при охлаждении льдом, а затем перемешивают еще 3 ч при комнатной температуре. Затем реакционный раствор концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. К остатку добавляют этилаце- тзт, полученный раствор промывают 5 мае. %/объем водным раствором бикарбоната натрия. 1 н.соляной кислотой и насыщенным водным раствором натрийх/юрида в указанном порядке и сушат нам безводным сульфатом магния. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток промывают гексаном, а затем кристаллизуют из смешанного растворителя, состоящего из метиленхлорида и диэтилового эфира до получения 128 мг указанного соединения в виде белого порошка, т.пл. 164-166°С.
а 23--104° (С 0,1, метанол).
Вычислено, %: С 74,49; Н 7,68; N 5,43.
С4вНмГМзОб
Найдено, %: С 74,32; Н 7,63; N 5,44.
Пример 15. N 4(5)(1-нафтил- мегил)ацетил -1 -норлейциламино}-3(5)- ок- с и 6-метилгептэноили-1 -изолейцинол (соединение 6).
Первая стадия. (5)-М-трет-Бутокси- карбонил- -норлейциламино-3(5)-окси- 6- метилгептаноил -1 -изолейцинол.
375 мг (1 ммоль) (5)-(М-трет-бутокси- карбониламино-3(5)-окси-6-метил гептаном L изолейцинола обрабатывают 6 н, раствором соляной кислоты в диоксане до удаления трет-бутоксикарбонильной группы и получают (3S, 45)-4-амино-3-окси-6-метил- гелтаноил-1 -изолейцинол гидрохлорида. 231 мг(1 ммоль) М-трет-бутоксикарбонил-L- норлейцина и 135 мг(1 ммоль) 1-оксибензот- риазола добавляют к этому соединению и полученную смесь растворяют в 5 мл диметилформамида. Добавляют 101 мл (1 ммоль) триэтиламина при охлаждении льдом и 206 мг (1 ммоль) дициклогексилкарбодиимида и реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при 0°С, s затем в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют воду, реакционную смесь экстрагируют диэтило- вым эфиром и нерастворимый остаток отфильтровывают, Органический экстракт промывают 1C- мае. %/объем водным раствором лимонной гислоты, 5 мас.%/обьем водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором натрийхлорида в указанном порядке, а затем сушат над безводным сульфатом натрия. Этот раствор концентрируют, выпаривая при пониженном давлении, а затем переосаждают,
добавляя смесь диэтилового эфира и гекса- на до получения 330 мг указанного соединения в виде белого порошка, т.пл. 139-144°С. Вторая стадия. (5)(1-наф- тилметил)ацетил -1 -норлейциамино}-3(5)0 окси-6-метилгептаноил)-1 -изолейцинол.
163 мг (0.33 ммоля) (ЗНМ-трет-бу- токсикарбонил-и-нойролейциламино)-З(З)- окси-6-метилгептаноил -1 -изолейцинола обрабатывают так же, как на второй стадии
5 примера 12, до получения 110мг указанного соединения в виде белого порошка, т.пл. 135-138°С.
-124° (С 0,1, мета иол).
Вычислено, %: С 73,81; Н 8,40; N 5,87. .
С-мНбэМзОб 1/3 Н20
Найдено, %: С 73,92; Н 8,36; N 5.94.
Пример 16. (5)(1-нафтил- метил)ацетил - -гистидилэмино}- 3(5)-окси- 6-метилгептаноил -1-изолейцинол
0
5
0
(соединение 7).
749 мг (2 ммоль) 4{5)-М-трет-бутоксикар- бонилэмино)-3(5)-окси-6-метилгептаноил -1 -изолейцинола обрабатывают 6 н раствором соляной кислоты в диоксане для удаления трет-бугоксикарбонильной группы и получения (S, 45)-4-амино-3-окси-6- метилгептаноил -1 -изолейцинол гидрохлорида. К этому соединению добавляют 819 мг(2 ммоль) №-трет-бутоксикарбонил-Мт-тозил- L-гистидина и 359 мг (2,2 ммоль) диэтилфос- фороцианидата, всю смесь растворяют в 10, мл диметилформамида. При охлаждении льдом к реакционной смеси по каплям добавляют 425 мл (4,2 ммоль) триэтиламина, а затем все перемешивают в течение 1 ч при 0°С, а затем в течение ночи при комнатной температуре. Эту реакционную смесь концентрируют, выпаривая при пониженном
0
5
0
5
давлении, а остаток смешивают с этилаце- татом. Этилацетатный раствор промывают 10 мае. %/объем водным раствором лимонной кислоты, 5 мае. %/объем водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором натрийхлоридз в указанном порядке, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Маслянистый остаток обрабатывают трифторуксусной кислотой в присутствии анизола для удаления трет-бутоксикарбонильной группы и получения 4(5)-(1 Пт-тозил-1 -гистидиламин)- 3(5)-окси-6-метилгепаноил-| -изолейцинолт- рифторацетата.
120 мг (0,35 ммоль) бис(1-нафтилме- тил)уксусной кислоты и 60 мг (0,35 ммоль) диэтилфосфороцианидэта добавляют к этому соединению и всю смесь растворяют в 2,5 мл диметилформамида. 70 мг (0,67 ммоль) триэтиламинз добавляют по каплям при охлаждении льдом к реакционной смеси, которую перемешивают втечение 1 ч при 0°С. Затем реакционную смесь концентрируют, выпаривая при пониженном давлении, а остаток смешивают с этилацетатом, Раствор этилацетата промывают 10 мае. %/объем раствором лимонной кислоты, 5 мас.%/обьем водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором натрийхлорида в указанном порядке, высушивают над безводным сульфатом натрия и концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. К остатку добавляют 170 мг (1,28 ммоль) 1-оксибензотриазола, полученную смесь растворяют в 5 мл тетрагид- рофурана. Затем эту реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, после чего ее концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Остаток смешивают с этилацетатом. Этилацетатный раствор промывают 5 мае. %/объем водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором натрийхлорида в указанном порядке, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Остаток очищают с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле (используя смесь 8:1 по объему хлороформа и метанола в качестве проявляющего растворителя) до получения 38,8 мг указанного соединения в виде белых кристаллов, т.пл. 175-179°С.
-70° (С 0,1, метанол). Вычислено, %: С 69,45; Н 7.68; N 9,20.
C44H55N505 1.5H20
Найдено, %: С 69,34; Н 7,38; N 8,78.
Пример 17. ((1-нафтил- метил)ацетил -а-метиониламино}-3(5)-окси- 6-метилгептаноил - -изолейцинол (соединение 8J.
Первая стадия. (8)-(М Фет-Бутокси- карбонил-1 -метиониламино)-3(5)-окси-6- метилгептаноил -1 -изолейцинол.
2 мл 6 н. раствора соляной кислоты в диоксане добавляют к 749 мг (2 ммоль) N- И НМ -трет-бутоксикарбонилэмино З З)- окси-6-метилгептаноил -1--изояейцинола, Затем реакционный раствор перемешивают в течение 2 ч при комнатной температуре, а затем концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Затем к остатку добавляют 500мг (2 ммоль)трет-бутоксикарбонил-метионина и 270 мг (2 ммоль) 1-оксибе- зотриазола. Полученную реакционную смесь растворяют в 30 мл диметилформамида, а затем добавляют 412 мг (2 ммоль) дициклогексилкарбодиимида и полученную смесь перемешивают в течение 3 ч при 40°С. В конце этого промежутка времени реакционную смесь выливают в ледяную воду и экстрагируют этилацетатом. Нерастворимый остаток отфильтровывают. Этилацетатный экстракт промывают 10 мае. %/объем водным раствором лимонной кислоты, 10 мас.%/объем водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным
водным раствором натрийхлорида в указанном порядке, а затем сушат над безводным сульфатом натрия. Этот раствор концентрируют, выпаривая при пониженном давлении, а затем остаток осаждают, добавляя
смесь хлороформа и гексана, в результате чего получают 600 мг указанного соединения в виде белого порошка.
Вторая стадия. (5)-{Ы(Бис(1-нафтил- метил)ацетил -1 -метиониламино}-3(5)- окси6-метилгептаноил -1 -изолейцинол.
2 мл 6 н. раствора соляной кислоты в диоксане добавляют к 600 мг (1,19 ммоль) изолейцинола, полученного на первой стадии. Смесь перемешивают в течение 2 ч
при комнатной температуре, а затем полученный раствор концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. К остатку добавляют403 мг(1,19 ммоль) бис(1-нафтил- метил)уксусной кислоты и полученную
смесь растворяют в 20 мл диметилформамида. Добавляют при охлаждении льдом 300 мг(1,84 ммоль) диэтилфосфороцианидата и 2 мл тризтиламина при перемешивании. Полученную смесь оставляют реагировать в
тесание 1 ч при 40°С, а затем выливают в ледяную воду и экстрагируют этилацетатом. Этилацетатный раствор промывают 10 мас.%/обьем водным раствором лимонной кислоты, 10 мае. %/объем водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором натрийхлорида в указанном порядке. Затем экстракт очищают с помощью препаративной тонкослойной хроматографии (используя а качестве проявляющего растворителя смесь хлороформа и метанола) и осаждают активную фракцию, добавляя смесь хлороформа и гексана, в результата чего получают 520 мг указанного соединения в виде белого порошка т.пл. 76-.
80°С.
И23 -133° (С 0,1. метанол). Пример 18. М-{4(5НЩБис(1-нафтил- метил)ацетил -3-(4-тиазолил) алениламино}-3(5)-окси-6-метилгептаноил - -изол - ейцинол (соединение 9).
Первая стадия. Метиловый сложный эфир (1-нафтилметил)ацетил -3-(4-ти- )-0.-аланин,
511 мг (1,50 ммоль) бис(1-нафтилме- пп)у«-сусной кислоты v 389 мг (1.50 ммоль) метилового сложного эфира 3-(4-тиазолил)- DL-аланиндигидрохлорида суспендируют в 20мл безводного тетрагидрофурана, 0,25 мл (1,65 ммоль) диэтилфосфороцианидата и 0,69 мл (4,95 ммоль) триэтиламина при охлаждении льдом добавляют затем к этой суспензии и пол ученную смесь перемешивают р течение ночи при комнатной тгмперз iype в атмосфере азота. D конце этою промежутка времени растворитель отгоняют при пониженном давлении, а полученный остаток очищают на хроматог- рафической колонке ссиликагалем (элюируя смесью 2:1 по объему этилэцетатэ и гексана) до получения 630 мг указанною соединения т.п.. 110- 112°С.
Вторая стадия. (1 -нзфтилме- тил)aцeти;l -3-(4-тиaзoлил)-DL-aлaнинa гид- раз ид
620 мг (1,22 ммоль) метилового сложного чфира (1-нэфтилметил)яцетил -3-(4- т л-эзолил).1Нина растроряют в 8 мл безводного диметилформамида. Этот рас- т пор смешивают с 310 мг (6,19 ммоль) гидра- зитнгидрэта, перемешивают в течение 5 ч при 40 С. Растворитель отгоняют при пониженном давлении, к остатку добавляют воду. Выпавшие кристаллы собирают фильтрованием, промывают смешанным растворителем, состоящим из гексана и ди- этилового эфира, и сушат до получения 408 мг указанного соединения, т.пл. 118-121 °С.
Третья стадия. (3)(1-нафтил- мегил)ацетил -3-(4-тиазолил) аланила- мино}-3(5)-окси-6-метил-геп ганоил - -изол - ейцинол.
393 мг (0,77 ммоль) (1-нафтилме- тил)ацетил -3-(4-тиазолил)-01-аланингидраз- ида суспендируют в 10 мл безводного диметилформамида. К этой суспензии при -60°С добавляют 0,66 мл 4 н.раствора соля ои кислоты tj диоксане, а затем температуру оеакци- онной смеси повышают до -20 С. Зту суспензию смешивают с 0,13 мл (0.97 ммоль) изопентилншрита и перемешивают в течение 10 мин. После того, как подтверждено исчезновение гидразида, температуру реакции снооо снижают до -60°С. Для нейтрали- зации добас,-1яют 0,33 мл (3.00 ммоль) N-метилморфопина. а затем 328 мг (1,02 ммоль) N-(35, 45)-4-ами||0-3-окси-6-метил- гептзмоил -1 -игюлейцинолгидрсхлорида и
0,12 мг (0.09 ммоль) N-метилморфслина и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при 4°С. Растворитель отгоняют при пониженном давлении, а остаток очищают с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле (используя смесь 10:1 по обьему хлороформа и метанола в качестве проявляющего растворителя) до получения 310 мг указанного соединения в виде белых кристаллов, т.пл. 94-98°С.
Пример 19. (5Н2(К8НБис(1-наф- тилметил)ацетил аминононаноил}-амино-3 (5)-окси-6-метилгептаноил -1.-изолейцинол (соединение 10).
3 мл 6 н. раствора соляной кислоты в диоксане добавляют к 58,6 мг (0,156 ммоль) (5)-трет-бутоксикарбониламино-3(5)-ок - си-6-метилгептаноил - L- изолейцинола. Реакционный раствор перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре, а затем выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток растворяют в 2 мл диметилформамида, а затем при охлаждении льдом добавляют 77,5 мг (0,156 ммоль) 2- (Р5)(1-нафтилметил)ацетил аминонзно- вой кислоты и 27,9 мг (0,17 ммоль) диэтил- фосфорцианидата. К реакционной смеси по каплям добавляют 33 мл (0,327 ммоль) триэтиламина и полученную смесь перемешивают в течение 3,5 ч при комнатной температуре, а затем концентрируют, выпаривая при пониженном давлении. Остаток смешивают с 2 мл воды и экстрагируют зти- лэцетатом Органический слой сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают с помощью препаративном тонкослойной хооматографии на силикагеле (про являющий агент - 10:1 по обьему смесь хлороформа и метанола) до получения 21,0 мг указанного соединения в виде бесцветного порошка, т.пл. 75-78°С.
Пример 20. ((1-нафтил- метил)ацетил -ОЬпропаргилглициламино}- 3(S)-o кс и-6-метилгепта ной л -L-изол ейцинол (соединение 11).
10 мл 6 н. раствора соляной кислоты в диоксане добавляют к 749 мг (2 ммоль) N- 4(5)-трет-6утоксикарбониламино-3(5)-окси -6-метилгептаноил - L-изолейцинола. Раствор перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре, а затем выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток растворяют в 20 мл диметилформамида, а затем добавляют 426 мг (2 ммоль) N-трет- буто кс и карбон и л-01 гпропаргил глицина и 270 мг (2 ммоль) 1-оксибензотриазола. К этому раствору добавляют 412 мг (2 ммоль) дициклогексилкарбодиимида и 1 мл тршти- ламина при охлаждении льдом. Полученную смесь перемешивают в течение 2 ч при 40-50°С, после чего выделившуюся ди- цик ло re ксил моче вину отфильтровывают. Полученный фильтрат смешивают с этила- цетатом, промывают водой, 10 мас.%/объ- ем раствора бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором натрийхло- рида в указанном порядке, а затем органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Затем растворитель от- гоняют при пониженном давлении. Остаток смешивают с диэтиловым эфиром, а выпавший осадок отфильтровывают. Полученный фильтрат выпаривают досуха при пониженном давлении. К остатку добавляют 10 мл 6 н. раствора соляной кислоты в диоксане и после перемешивания в течение 30 мин при комнатной температуре раствор упаривают досуха при пониженном давлении. Остаток растворяют в 20 мл диметилформамида, к которому добавляют 680 мг (2 ммоль) бис(1- нафтилметил)уксусной кислоты и 543 мг (3 ммоль) диэтилфосфороцианидата. К этому
раствору добавляют 1 мл триэтиламина при перемешивании. Полученный раствор пере- мешивают в течение 2 ч при 40-50 С, выли- вают в ледяную воду и эстрагируют этилацетатом. Этилацетатный слой промывают 10 мас.%/обьем водным раствором лимонной кислоты, 5 мае. %/объем водным раствором натрийхлоридом в указанном порядке, а затем органический слой сушат над безводным сульфатом натрия. Растворитель отгоняют при пониженном давлении, затем чистят с помощью препаративной тонкослойной хроматографии (проявляющий растворитель - этилацетат), в результате чего получают два изомера указанного соединения, за счет асимметричного атома углерода в пропаргилглициловом фрагмен- .те, т.пл. 182-188 и 92-94°С соответственно.
Пример 21. (5)(1-нафтил- метил)ацетил -1 -лейциламино}-3(5)- окси-б- метилгептаноил амино-1-бензил пиперидин (соединение 12).
Первая стадия. 4-(3S, 45)-4-трет-Бутокси- кар6ониламино-3-окси-6-метилгептаноил а- мино- 1-бензилпиперидин.
348 мг (1,83 ммоль) 4-амино-1 -бензилпи- перидина, 510 мг (1.85 ммоль) (3S, трет-бутоксикарбониламино-3-окси-6-мет илгептановой кислоты и 358 мг (2,2 ммоль) диэтилфосфороцианидата растворяют в 2 мл диметилформамида. К этому раствору по каплям добавляют 223 мг (2,2 ммоль) триэ- тилвмина при охлаждении льдом и полученную смесь перемешивают в течение 30 мин при 0°С, а затем в течение ночи при комнатной температуре. К реакционному раствору
добавляют этилацетат, затем промывают 10 мае.%/объем водной соляной кислоты, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором натрийхлорида в указанном порядке, сушат над безводным сульфатом натрия и конденсируют, выпаривая при понижеНт-юм давлении. Полученный остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем (элюируя смесью 20:1 хлороформ и метанол) до получения 663 мг указанного соединения в виде слегка желтоватого стеклообразного вещества.
Вторая стадия. (5)-(Ы-трет-Бутокси- карбонил-Ь-лейциламино)- 3(5)-окси-6-ме- тилгептаноил амино-1-бензилпиперидин.
370 мг (1,60 ммоль) М-трет-бутоксикар- бонил- -лейцина, 620 мг (1,47 ммоль) 4-(3S, 43)-4-амино-3-окси-6-метилгептаноил амино- 1 -бензилпиперидиндигидрохлорида, полученного при удалении трет-бутоксикарбо- нильной группы из соединения, полученного на первой стадии примера 16, и 313 мг (1,92 ммоль) диэтилфосфороцианидата растворяют в 2 мл диметилформамида. К этому раствору добавляют по каплям 388 мл (3,83 ммоль) триэтиламина при охлаждении льдом и полученную смесь перемешивают в течение 30 мин при 0°С, а затем в течение ночи при комнатной температуре. К реакционному раствору добавляют этилацетат, затем промывают 10 мае.%/объем водной соляной кислотой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором натрийхлорида в указанном порядке, сушат над безводным сульфатом натрия и конденсируют, выпаривая при пониженном давлении. Полученный остаток смешивают с растворителем )1:1 по объему смесь этилацетата и диэтилового эфира) и распыляют до получения 68 мг указанного соединения в виде бесцветных кристаллов, т.пл. 186-187°С.
Вычислено, %: С 66,40; Н 9,35; N 9,99.
C31H52N405
Найдено, %: С 66,33; Н 9,38; N 10,04.
Третья стадия. 4-{4(5)(1-нафтил- метил)ацетил -1.-лейциламино}-3(5)- окси-6- метилгептаноил амино-1-бензилпиперидин.
213 мг (0,4 ммоль) (5)-1 -лейцилами- но-3(5)-окси-6-метилгептаноил амино-1- бензилпиперидиидигидрохлорида, полученного при удалении трет-бутокси группы из соединения, полученного на второй стадии примера 16, 136 мг (0,4 ммоль) бис(1- нафтилметил)уксусной кислоты и 78 мг(0,48 ммоль) диэтилфосфороцианидата растворяют в 2 мл диметилформамида. К этому раствору по каплям добавляют 146 мл (1,44
ммоль) триэтилдмина при охлаждении льдом и полученную смесь перемешивают при 0°С в течение 30 мин. а зятем в течение ночи при комнатной температуре. Реакционный раствор смешивают о этилацетатом, ппомывают 10 мае. %/объем водной соляной кислотой и пасы ценным водным раствором натрийхлорида ь указанном порядке, сушат над безводным сульфатом натрия и конденсируют, выпаривая при пониженном давлении. Полученный остаток смешивают с этилацетатом и распыляют до получения 288 мг указанного соединения в виде бесцветных кристаллов, т.пл. 183- 184°С.
« -105° (С 0,1, МеОН).
/ нгибировани8 ренниновой активности.
Проведены биологически испытания, в которых способность полученных соединений ингибировать активность реннина была определена способом,основанным на методике Кокубу.
Каждое испытуемое соединение растворяют в 60 мас% /объем этанола Активность человеческого реннина в присутствии каждого соединения измеряют с использованием овечьего лнгиогснзиногвна. В 1 мл испытуемой смеси содержалось 0,1 моль/л фосфатн го буферл (; Н 7,3), человеческий реннин (эквивалент 0,5 нг ангилтен- зина на 1 мл в минуту), овечий ангиотензиногенНэквивалент 200 нг ангио- тензина 1). 1x10 М испытуемого соединения, 6 мас.%/объем этанола и ингибиторы ангистензиназы (10 ммоль/л этилендиамин- тетраацетата натрия и 3,4 ммоль/л 8-гидро- ксихинолина). Смеси дают реагировать в течение 10 мин при 37 С и затем реакцию останавливают, помещают реакционную трубку на 5 мин в баню с кипящей водой. Затем смесь центрифугируют и всплывающий слой (0,05-0,1 мл) используют для анализа оставшегося ангиотензина 1.
Аналогичным образом проводят контрольный эксперимент, не используя испытуемого соединения. Из полученных значений рассчитывают процент ингибирования ренниновой активности, дости/аемый под действием каждого испытуемого соединения. Полученные результаты представлены в таблице, где приведены средние значения 3 или 4 экспериментов.
Как показали проведенные испытания, описываемые соединения обладают более высокой реннин-ингибирующей активностью, чем аналог, при этом они проявляют низкую токсичность,
Формула изобретения
Способ пол vicuna пептидов общей формулы
Вг О
R, О
I I
сн,он
I I
о
II
fy-CH-C-NH-CH-C-NH-CH-CH-CHj-C-Ej
где RI и R2 одинаковые и каждая группа
формулы (A)p-Re,
где р 1- А - С1-С4.-алкиленовэя группа, Re
-нафтильная группа;
0R3 - С1-С -алкил, %-имидазолилметил,
4-тиазолилметил или -2-(метилсульфи- нил)этил;
R4 - изопропиловая группа;
RS - группа формулы NRaRg, где Re
5 водород, Rg - Ст-С -алкиловая группа, бензил-4-пиперидмниловая группа или Ст-С -алкиловая группа, имеющая заместитель, выбранный из С1-С4-ялкокси, окси-. диметоксифенил и ди(С1 С4 элкил)аминог0 РУПП
или фармацевтически их приемлемых солей,
отличающийся тем, что проводят взаимодействие соединения формулы Ri -CH(R2)-CO (Y -ОН 5 где Ri и R2 имеют указанные значения;
Y - группа формулы -NH-CH(R3)CO, где Яз имеет указанные значения;
г - С или 1,
или реакционно-способное производное 0 его с соединением формулы
H(Y)SNH-CH(CH2R 4)-CH(OH)-CH 2CORs где Y имеет указанное значение; ,1;
и RS имеют указанные значения; 5s + г 1,
и в случае необходимости превращают любую включенную группу внутри упомянутых определений в любую другую такую группу и целевой продукт выделяют в свободном 0 виде или в виде соли.
Приоритет по признакам: 30.11.84 при Ri и R2 одинаковы или различны и каждый является группой формулы -(А)р-Нб, где р 1,/Кл-С4-алкилен; RG - наф- 5 тил; Рз - Ci-C -алкил, имидазолилметил; R4
-изопропил; RB - NHRg, где Rg - Ci-C/j-ал- кил, не замещенный или замещенный окси, алк(С1-Сз)окси группой.
19.12.84при RI и R2 одинаковы или раз- 0 личны и каждый является группой формулы
-(А)-Яб. где р 1, А - Ст-С -алкилен; Re - нафтил; Ra - Ст-С -алкил; R4 - изопропил; RS - NHRg, где Rg - Ст-С -алкил, не замещенный или замещенный окси, алк{Сг 5 С4)окси группой, диметоксифенил. ди(С1-Сфлкиламиногруппа.
29.01.85при Ri и R2 одинаковы или различны и каждый является группой формулы -(A)P-R6. где р 1: А - Ci-Сз алкилен Пб .
нафтил; R3 5-имидазолилметил. 4-{1,3-тиа- золил)метил; R4 изопропил; R5 NHRg, где R9 С1 С4-алкил, не замещенный или замещенный оксигруппой или низшей алк(С1- С4)оксигруппой.
Изобретение касается производства пептидов или их фармацевтически приемлемых солей общей ф-лы I- RiR2CH-C(0)-NH- CHR3-C(0)NH-CH(CH2R4)-CH(OH)-CH2-CH2-C
Редактор О.Юрковецкая Техред М.Моргентал
Заказ 3017Тираж 228 .Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат Патент, г. Ужгород, ул.Гагарина, 101
Корректор м- Шароши
| Шедер Э , ЛюОке К Пептиды | |||
| - М Мир | |||
| Запальная свеча для двигателей | 1924 |
|
SU1967A1 |
