Способ получения 3,4-дегидро-4-формил-8-метил-8-гидроксииридан-1-ол)-1- @ -D-глюкопиранозида Советский патент 1991 года по МПК C07H19/24 A61K31/7048 A61K35/78 

экстракты фильтруют, упаривают до водного остатка, упаренный водный остаток обра- батывают хлороформом, очищенный водный раствор наносят на силикагель, высушивают. Полученный сыпучий порошок хроматографируют на колонке силикагеля, элюируя смесью хлороформ-метанол, элюа- ты (хлороформ-метанол, 88:12), содержащие велпетин, упаривают до сухого остатка, который перекристаллизовывают из смеси хлороформ-метанол в соотношении 4:1.

Выход велпетина составляет 0,3-0,4% от массы воздушно-сухого сырья.

П р и м е р 1. 100 г измельченной воздушно-сухой травы котовника бархатистого, заготовленного в Нахичеванской АССР в фазу цветения, экстрагируют метанолом в соотношении 1:10 при кипении (3 ч). Полученные метанольные экстракты фильтруют и упаривают в вакууме до водного остатка (около 25 мл), упаренный водный остаток обрабатывают хлороформом (по 50 мл 5 раз), очищенный водный экстракт наносят на силикагель (10 г) и высушивают. Полученный сухой порошок (20,5 г) наносят на слой силикагеля (40 г), сформированный в колонке в виде взвеси в хлороформе (диаметр колонки б см, высота слоя сорбента 3 см) и элюируют хлороформом (0,3 л), смесью хлороформ - метанол в соотношении 91:9 (0,5 л, промывка колонки) и в соотношении 88:12 (1,5 л, десорбция целевого продукта). Фракции, содержащие целевой продукт, упаривают в вакууме досуха, сухой остаток (0,9 г) растворяют при нагревании в 2 мл метанола, добавляют 6 мл хлороформа, перемешивают и оставляют раствор для кристаллизации целевого продукта, получаемый осадок отжимают в вакууме, промывают 2 раза смесью хлороформ-метанол (3:1). Получено 0,4 г велпетина (т.пл, 204-205°С), что составляет 0,4% от массы воздушно-сухого сырья.

П р и м е р 2. 100 г измельченной воздушно-сухой травы котовника бархатистого, заготовленного в Нахичеванской АССР в фазу цветения, экстрагируют 96%-ным этиловым спиртом в соотношении 1:10 при кипении (3 раза 1 ч). Дальнейшую обработку ведут аналогично примеру 1.

Получено 0,3 г целевого продукта {т.пл, 204-205 С), что составляет 0,3% от массы воздушно-сухого сырья.

ПримерЗ. 100 г воздушно-сухой травы котовника бархатистого экстрагируют 80%- ным этиловым спиртом в соотношении 1:10 (3 раза при кипении). Полученные экстракты упаривают до водного остатка, который очищают хлороформом. Дальнейшую обработку ведут аналогично примеру 1. Целевой

продукт в этих условиях не кристаллизуется.

П р и м е р 4. 100 г измельченной воздушно-сухой травы котовника бархатистого

экстрагируют метанолом в соотношении 1:10 при комнатной температуре (3 ч). Полученные метанольные экстракты упаривают в вакууме до водного остатка и далее обрабатывают аналогично примеру 1.

Получено 0,32 г велпетина (т.пл. 202- 204°С), что составляет 0,32% от массы воздушно-сухого сырья.

Пример 5. 100 г измельченной воздушно-сухой травы котовника бархатистого

экстрагируют 96%-ным этиловым спиртом в соотношении 1:10 при комнатной температуре (3 раза 24 ч), полученные спиртовые экстракты упаривают в вакууме до одногф остатка, далее обработку ведут аналогично

примеру 1.

Получено 0,3 г велпетина (т.пл. 202- 204° С), что составляет 0,3% от массы воздушно-сухого сырья.

Пример 6.100 г воздушно-сухой травы

котовника бархатистого экстрагируют MCIS- нолом в соотношении 1:6 (3 раза при кипении), полученные метанольные экстракты упаривают в вакууме до водного остатка и дальнейшую обработку ведут аналогично

примеру 1.

Получено 0,34 г велпетина (т.пл. 202- 205°С), что составляет 0,36% от массы воздушно-сухого сырья,

Пример.100 г воздуш но-сухой травы

котовника бархатистого экстрагируют метанолом в соотношении 1:9 (3 раза при кипении), полученные метанольные экстракты упаривают в вакууме до водного остатка и дальнейшую обработку ведут аналогично

примеру 1.

Получено 0,39 г целевого продукта (т.пл. 203-204°С), что составляет 0,39% от массы воздушно-сухого сырья.

ПримерЗ. 100 г воздушно-сухой травы

котовника бархатистого экстрагируют метанолом в соотношении 1:11 (3 раза при кипении), полученные метанольные экстракты упаривают до водного остатка и дальнейшую обработку ведут аналогично примеру 1.

Получено 0,4 г целевого продукта (т.пл. 203-205°С), что составляет 0,4% от массы воздушно-сухого сырья.

Пример 9. 100 г воздушно-сухой травы котовника бархатистого экстрагиру ют метанолом в соотношении 1:5 (3 раза при кипении), полученные метанольные экстракты упаривают в вакууме до водного остатка и дальше ведут обработку аналогично примеру 1.

Получено 0,28 г велпетина (т.пл. 202 203°С), что составляет 0,28% от массы воздушно-сухого сырья.

ПримерЮ. 100 г воздушно-сухой травы котовника бархатистого экстрагируют метанолом в соотношении 1:10 при кипении (4 раза 1 ч), полученные метанольные экстракты упаривают до водного остатка и дальнейшую обработку ведут аналогично примеру 1.

Получено 0,4 г велпетина (т.пл. 203- 205°С), что составляет 0,4% от массы воздушно-сухого сырья.

Пример 11. 100 г воздушно-сухой травы котовника бархатистого экстрагируют метанолом в соотношении 1:10 при кипении (2 раза 1 ч), полученные метанольные экстракты упаривают в вакууме до водного остатка и дальнейшую обработку ведут аналогично примеру 1.

Получено 0,29 г велпетина (т.пл. 202- 204°С), что составляет 0,29% от массы воздушно-сухого сырья.

Пример 12. 100 г воздушно-сухой травы котовника бархатистого экстрагируют метанолом в соотношении 1:10 при кипении (3 раза к 1 ч), полученные метанольные экстракты упаривают до водного остатка, наносят на силикагель и высушивают. Полученный сыпучий порошок наносят на колонку силикагеля и дальнейшую обработку ведут аналогично примеру 1.

Целевой продукт при этом не получен.

Пример 13. 100 г воздушно-сухой травы котовника бархатистого экстрагируют метанолом в соотношении 1:10 при кипении (3 раза vl ч). Метанольные экстракты упаривают в вакууме до водного остатка, водный остаток обрабатывают хлороформом (по 50 мл 5 раз), очищенный водный экстракт наносят на силикагель (10 г) и высушивают. Полученный сухой порошок наносят на слой силикагеля (30 г), сформированный в колонке в виде взвеси в хлороформе, и дальнейшую обработку ведут аналогично примеру 1.

Получено 0,3 г велпетина, загрязненного примесями (т.пл. 190 193°С).

Пример 14/100 г воздушно-сухой травы котовника бархатистого экстрагируют метанолом в соотношении 1:10 при кипении (3 раза 1 ч). Метанольные экстракты упаривают в вакууме до водного остатка, водный остаток обрабатывают хлороформом, очищенный водный экстракт наносят на силикагель (10 г) и высушивают. Полученный сыпучий порошок наносят на слой силикагеля (100 г), сформированный в колонке в виде взвеси в хлороформе, дальнейшую обработку ведут аналогично примеру 1.

Получено 0.35 г велпетина (т пл. 20 203°С), что составляет 0,35% от массы поз- душно-сухого сырья.

Пример 15. 100 г воздушно-сухо1 5 травы котовника бархатистого экстрагируют метанолом в соотношении 1:10 (3 раза 1 ч). Метанольные экстракты упаривают до водного остатка, последний обрабатывают хлороформом (по 50 мл 5 раз), очищенный

0 водный экстракт наносят на силикагель (10 г) высушивают. Полученный порошок (20.5 г) делят на две равные части.

Одну половину (10,25 г) сыпучего порошка наносят на слой силикагеля (20 г),

5 сформированный в виде взвеси в хлороформе, Колонку промывают хлороформом (0,16 л) и смесью хлороформ - метанол (92:8, 0,25 л), целевой продукт десорбируют смесью хлороформ-метанол (88:12) Дальнейшую

0 обработку проводят аналогично примеру 1, уменьшив в 2 раза объем растворителя

ПолученоО.1 гзагрязненного велпетина (белые кристаллы с желтоватым оттенком, т.пл. 180-187°С).

5П ри ме р 16. Вторую половину порошка

(сорбент-1-экстракт), полученного в примере 15, наносят на слой силикагеля (20 г), сформированного в колонке в виде взвеси в хлороформе, промывают колонку хлороформом

0 (0,15 л) и смесью хлороформ-метанол (92:8). Целевой продукт десорбируют смесью хлороформ-метанол (90:10, 0.25 л) и дальнейшую обработку ведут аналогично примеру 1, уменьшив в 2 раза объем растворителей.

5Получено 0,12 г целевого продукта (т.пл.

203-204°С), что составляет 0,24% от массы воздушно-сухого сырья.

П р и м е р 17. 150 г воздушно-сухой травы котовника бархатистого экстрагиру0 ют метанолом в соотношении 1:10 (3 раза при кипении). Метанольные экстракты упаривают в вакууме до водного остатка, который обрабатывают хлороформом (по 75 мл 5 раз). Очищенный водный остаток наносят на

5 силикагель (15,0 г), высушивают и получают 30,1 г сыпучего порошка. 10,33 г полученного порошка наносят на слой силикагеля (20 г), сформированного в колонке в виде взвеси в хлороформе, промывают колонку 0,15 л

0 хлороформа и 0,25 до смеси хлороформ-метанол (91:9), целевой продукт десорбируют смесью хлороформ-метанол в соотношении 90:10 (1 л). Дальнейшую обработку ведут аналогично примеру 15.

5Получено 0,16 г целевого продукта (т.пл.

203-205°С), что составляет 0,32% от массы воздушно-сухого сырья.

П р и м е р 18. 10,33 г порошка (сорбент + экстракт), полученного в примере 17. Хро- матографируют аналогично примеру 16, но

с тем отличием, что для десорбирования используют смесь хлороформ-метанол (89:11, 1 л). Дальнейшую обработку ведут аналогично примеру 15.

Получено 0,18 г целевого продукта(т.пл. 202-204°С), что составляет 0,36% от массы воздушно-сухого сырья.

П ример 19.10,33 г порошка (сорбент + экстракт), полученного в примере 17, хро- матографируют аналогично примеру 16, но с тем отличием, что для десорбирования целевого продукта используют смесь хлороформ-метанол в соотношении 87:13 (0,75 л).

Дальнейшую обработку ведут аналогично примеру 15. Целевой продукт в кристаллическом виде получить не удалось.

П р и м е р 20. 100 г воздушно-сухой травы котовника бархатистого экстрагируют метанолом в соотношении 1:10 (3 раза при кипении), метанольные экстракты упаривают в вакууме до водного остатка. Дальнейшую обработку ведут аналогично примеру 1, но с тем отличием, что на стадии кристаллизации велпетина сухой остаток растворяют при нагревании в 2 мл метанола, добавляют 4 мл хлороформа, перемешивают и оставляют раствор для кристаллизации.

Целевой продукт в таких условиях не кристаллизуется.

П р и м е р 21. Некристаллизугащийся целевой продукт, полученный в примере 20, упаривают досуха, растворяют в 2 мл метанола при нагревании, добавляют 8 мл хлороформа, перемешивают и оставляют раствор для кристаллизации.

Получено 0,42 г велпетина, загрязненного примесями (т.пл. 190-106°С),

Велпетин был изучен в отношении про- тивокашлевой и бронхолитической активности.

Противокашлевую активность велпетина изучали на кошках различных пород весом 2,5-5,0 кг, с применением барбамилового наркоза 60 мг/кг. Установлено, что велпетин в дозах 1,0 мг/кг и 10,0 мг/кг вызывает угнетение кашлевого рефлекса на 34,1-57,2% и 40,6-60,9% соответственно.

Бронхолитические свойства велпетика изучали на морских свинках обоего пола массой 300-500 г. Бронхоспазм вызывали

внутривенным введением ацетилхолина в дозе 10 мкг/кг. В результате проведенных исследований установлено, что на фоне выделения велпетина в дозе 10,9 мг/кг величина бронхоспазма снижалась через 2, 20, 40, 60, 80, 100 мин на 25,5; 10,5; 19,3; 20,8; 24,8; 24,7% соответственно, а при дозе 10,0 мг/кг за аналогичные промежутки времени - на 9,7; 8,1; 12,6; 15,4; 29,7,45,2% соответственно.

Таким образом, велпетин обладает про- тивокашлевой активностью, примерно в 1,5 раза превышающей противокашлевую активность известного соединения группы сесквитерпенов - ледола. Кроме того, велпетин имеет тенденцию к снижению аце- тилхолинового бронхоспазма.

Исследование острой токсичности велпетина на мышах показало, что LD50 1500

мг/кг (подкожное введение).

Следовательно, велпетин по показателям острой токсичности относится к малотоксичным соединениям и почти в 1,5 раза менее токсичен известного соединения

группы сесквитерпенов - ледола.

Формула изобретения Способ получения 3,4-дегидро-4-фор- мил-8-метил-8-гидроксииридан-1-ол)-1- D-глюкопсфанозида формулы

иП,о

НО О НО

ои

CHjOH

он

отличающийся тем, что измельченную надземную часть котовника бархатистого (Nepeta velutina Pojark. Lamiaceae)экстрагируют низкомолекулярным спиртом (Ci-C2) в

соотношении 1:(6-10) с последующим выделением целевого продукта упариванием растворителя в вакууме до водного остатка, очисткой упаренного экстракта хлороформом, хроматографированием экстрактивных веществ на силикагеле в соотношении сырье-сорбент 1:0,4 с использованием в качестве элюента для десорбирования ц§ле- вого продукта смеси хлороформ- метанол (90-10)-(88-12) и последующей

его очисткой перикристаллизацией из смеси хлороформ - метанол (3:1).

Изобретение касается замещенных глю- козидов, в частности получения 3,4-дегид- ро-4-формил-8-метил-8-гидроксииридан-1Изобретение относится к способам получения нового природного соединения ряда монотерпеновых иридоидных гликозидов, а именно 3,4-дегидро-4-формил-8-метил-8- гидроксииридан-1-ол)-1-/3 -D-глюкопирано- зида (велпетина) формулы нсно () ол-1-/3 -Д-глюкопиранозида, обладающего противокашлевой и бронхолитической активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание нового более активного вещества указанного класса. Синтез ведут экстракцией измельченной надземной части котовника бархатистого Ci-2-алкиловым спиртом (соотношение 1:(6- 10)) с последующим упариванием растворителя в вакууме до водного остатка. Упаренный экстракт очищают хлороформом с последующим хроматографированием на силикагеле (соотношение сырья и сорбента 1:0,4) с использованием в качестве элюента для десорбирования целевого продукта смеси хлороформа и метанола 90-100)-(88- 12) и очисткой перекристаллизацией из смеси хлороформа и метанола (3:1). Новое вещество имеет в 1,5 раза лучшую противо- кашлевую активность в сравнении с известным ледолом при тенденции к снижению ацетилхолинового бронхоспазма и токсичности на мышах мг/кг. (А С обладающего противокашлевой и бронхолитической активностью, Цель изобретения - способ получения нового природного соединения группы тер- пеноидов, обладающего более высокой противокашлевой активностью в сравнении с известными соединениями этой группы. Поставленная цель достигается тем, что измельченную воздушно-сухую надземную часть котовника бархатистого (Nepeta velutina Pojark) экстрагируют метанолом или 96%-ным этиловым спиртом в соотношении 1:(6-10) при кипении, полученные о 00 о 3