Способ прогнозирования эффективности лекарственных препаратов при мочекаменной болезни Советский патент 1991 года по МПК G01N33/86 

СО

С

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической фармакологии. Целью изобретения является упрощение за счет проведения исследования in vitro. Для этого определяют суммарную активность АТФаз эритроцитов in vitro в присутствии терапевтических доз препаратов и сохранение или увеличение исходной суммарной активности АТФаз расценивают как благоприятный эффект от лечения этим препаратом, снижение исходной активности АТФаз свидетельствует о нецелесообразности применения препарата для лечения нарушенного клеточного гомеостаза кальция у данного больного. 6 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической фармакологии, и может быть использовано для прогнозирования индивидуальной эффективности лекарственных препаратов при заболеваниях с нарушением гомеостаза кальция в клетках.

Целью изобретения является упрощение за счет проведения исследования In vitro.

Это достигается определением суммарной активности АТФаз эритроцитов ин вит- ро в присутствии терапевтических доз препаратов, сохранение или увеличение исходной суммарной активности АТФаз расценивают как благоприятный эффект от лечения этим препаратом, снижение исходной активности АТФаз свидетельствует о

нецелесообразности применения препарата для лечения нарушенного клеточного гомеостаза кальция у данного больного.

Способ осуществляется следующим образом.

Для определения суммарной активности АТФаз эритроциты подготавливают по методу А.Т.Казенкова и далее определяют активность АТФаз в системе, содержащей 100 мМ хлорида натрия, 10 мМ хлорида калия, 3 мМ хлорида магния, 50 мМ трис-HCI, 2 мМ раствора АТФ, 1 мМ раствора ЭДТА (рН 7,0) (метод: Казенков А.Т.. Маслова М.Н., Шалобадов А.Д. Исследования активности K-Na-АТФазы в эритроцитах млекопитающих. Биохимия, 1984, т. 49, вып. 7, с. 1089-1096). Активность АТФаз эритроцитов определяют у каждого больного при условии

Os 00

Ю С Ю

сравнения этой активности без добавления и в присутствии в инкубационной среде терапевтических доз изучаемых препаратов.

Примеры исследования действия лазик- са на активность АТФаз ин витро и ин виво.

П р и м е р 1. Ира О., 8 лет, поступила 1,09,88 в уронефрологическое отделение с жалобами на частые позывы на мочеипуска- ние, неудержание мочи днем. Клинико-ла- бораюрным обследованием выставлен диагноз: двухсторонний ПМР IV степени, гиперрефлекторный неадаптированный мочевой пузырь, хронический пиелонефрит. Активность АТФаз при поступлении 2,5 мкм л с . Реакция на лазикс ин витро характе- ризовалась снижением активности АТФаз до 1,15 мкм , т.е. на 60,4%. Проведен курс лечения фуросемидом в течение 10 дней по 0,025 мг 1 раз в день. По окончании курса лечения активность АТФаз снизилась до 1,1 мкм (на 66%). Клинически не отмечено улучшения, сохранялись проявления гиперрефлекторной дисфункции, но уменьшилась частота позывов на мочеиспускание, остается низким эффективный объ- ем мочевого пузыря, Сделан вывод о нецелесообразности дальнейшего применения фуросемида.

П р и м е р 2. Лучия С., 11 лет, поступила 8.09.88 с жалобами на периодическое днев- ное неудержание и ночное недержание мо- чи, изменения в анализах мочи (лейкоцитурия). Клиническими, лабораторными и специальными методами обследования выставлен диагноз: двухсторонний пузырно-мочеточниковый рефлюкс (ПМР), незаторможенный гиперрефлекторный мочевой пузырь, хронический пиелонефрит. Активность АТФаз при поступлении 2,3 мкм , реакция на лазикс ин витро - сниже- ние активности АТФаз до 1,15 мкм , т.е. на 50%, После недельного (семидневного) курса лечения фуросемидом по 0,025 мг 1 раз в день отмечено снижение активности АТФаз до 0,95 IKM . Клинически не получено положительного эффекта, в связи с чем применение лазикса в комплексе лечения прекращено.

П р и м е р 3. Лена С., 9 лет, поступила 9.11.88. Больна с февраля 1986г. когда была выявлена стойкая лейкоцитурия в моче. Кли- нико-лабораторными методами обследования выставлен диагноз: левосторонний ПМР II степени, гипоплазия левой почки, хронический пиелонефрит (рецидивирую- щее течение), гиперрефлекторный незаторможенный мочевой пузырь. Активность АТФаз при поступлении 1,5 мкм , реакция на лазикс ин витро проявилась повышением активности АТФаз до 2,15 мкм .т.е. на

60%, После семидневного курса лечения фуросемидом по 0,025мг 1 раз в день отмечено повышение активности АТФаз до 2,0 мкм (25%), Клинически отмечалось выраженное уменьшение проявлений гиперрефлекторной дисфункции мочевого пузыря, уменьшение внутрипуэырного давления в фазе наполнения, купирование обострения пиелонефрита. Сделан вывод о целесообразности дальнейшего использования лазикса в комплексном лечении данной больной.

Примеры исследования влияния ксиди- фона на активность АТФаз ин витро и ин виво.

П р и м е р 4. Лена С., 10 лет, поступила 9.11.88, больна с февраля 1986 г. Диагноз: левосторонний ПМР III степени, гипоплазия левой почки, хронический пиелонефрит (рецидивирующее течение), гиперрефлекторный незаторможенный мочевой пузырь. Активность АТФаз при поступлении 1,5 мкм , реакция на ксидифон ин витро характеризовалась повышением АТФазной активности до 1,8мкмл 1с 1,т.е. на 20%. После семидневного курса лечения 2%-ным раствором ксидифина (прием внутрь) по одной десертной ложке 3 раза в день установлено повышение активности АТФаз до 2,15 мкм л с ,т.е. на 33%. Сделан выводе целесообразности применения ксидифона в дальнейшем лечении больной.

П р и м е р 5. Мария С., 10 лет, поступила 6.12.88. Больна с марта 1985 г. Обследованием выставлен диагноз: двусторонний ПМР, незаторможенный мочевой пузырь, хронический пиелонефрит. Активность при поступлении 2,3 мкм л с , ин витро реакция на ксидифон проявилась уменьшением активности АТФаз до 1,5 мкм л м с . После семидневного курса лечения отмечено снижение активности АТФаз до 1,15 мкм , т.е. на 50%. Клинически не отмечалось положительного эффекта, в связи с чем сделан вывод о нецелесообразности дальнейшего применения ксидифона у данной больной.

Изобретение позволяет упростить за счет определения in vitro прогнозирование визуальной эффективности лекарственных препаратов при мочекаменной болезни.

Способ может быть воспроизведен в любой биохимической лаборатории, занимающейся диагностической и лечебной работой.

Формула изобретения

Способ прогнозирования эффективности лекарственных препаратов при мочекаменной болезни путем забора крови,

разделения крови на фракции и определения активности ферментов, отличающийся тем, что, с целью упрощения за счет проведения исследования In vitro, эритроциты инкубируют с лекарственным препаратом,

Изменение активности АТФяз под воэл.еЧ( pa mnrttbce

определяют в .эритроцитах активное ть А Г Ф и при снижении ее от исходного уропнч vf та навливают нецелесообразность применения препарата для лечения нарушенного клкточ ного гомеостаза кальция у данного больного

Т я 0 л и ц « 1

Изменение активности АТФаз эритроцитов под вочдейс-твнем различных доз препаратов ин витро (мкм с О

1) - активность АТФаз без добавления препаратов, 2) - активность АТФаз + ксидифон 0,016 мкм/мл, 3) - активность АТФаз + финоптин в дозе 36 мкг/м, 4) - активность АТФаз + лазикс н дозе 14 мкм/мл, 5) - активность АТФаз + адреналин в дозе 14 мкг/мл.

ТаблицаЗ

Влияние различных концентраций ксидифона и финоптина на активность клеточных АТФаз (мкм л )

1) - активность АТФаз без воздействия ксидифона и финоптина (контроль), 2) - активность АТФаз + 0,016 мкм/мл ксидифона, 3) - активность АТФаз + 0,08 мкм/мл ксидифона, 4) - активность АТФаз + 0,16 мкм/мл ксидифона, 5) - активность АТФаз +0,21 мкм/мл ксидифона, 6) - активность АТФаз + 0,28 мкм/мл ксидифона, , 7) - активность АТФаз + 10 мкл финоптина, 8) - активность АТФаз + + 20 мкл финоптина (доза, в 2 раза превышающая терапевтическую).

Таблица4

Влияние эссенциале на содержание фосфоли- пидов в эритроцитах больного мочекаменной болезнью ин витро

, )

52,1 i 5,4 84,0i4,8v 101,2±11,5

.oi, aWo,ooi

I Л б П И П 1

, )

v 101,2±11,5

;

ТаблицаЗ

Изменение активности клеточных АТФаз и количества фосфолипидов в мембране эритроцитов при воздействии эссенциале

Показатели Период исследования

До воздей- После воз- Р

ствия , действия

Активность

АТФаэ,

мкм л- (10) 1,4 ±0,1 2,2 ±0,01СО,01

Фосфолипиды

эритроцитов,

мкм 4,5-10 эр.

(Ю)52,1t5,4 101,24t11,5 0,001

Таблиц

Сравнительная оценка определения эффективности ксидифона при лечении мочекаменной болезни

Показатели Прототип I Предлагаемый

способ

-...

Чувствительность Неопределенная 95±2% Сроки наблюдения 14-180 сут. 3 11 ч Возможные ослож- Снижение синтеза Нет нения1,25-ОН-Д3

- - -------- --- -----