Способ определения агрегационной активности тромбоцитов Советский патент 1991 года по МПК G01N33/86 

Изобретение относится к медицине, а именно к гемокоагулологии, и может быть использовано для оценки функционального состояния тромбоцитов.

Целью изобретения является повышение чувствительности способа за счет использования в качестве индуктора при определении агрегационной активности тромбоцитов фибрин-мономера.

Способ осуществляется следующим образом.

Забор крови производят малотравматичной короткой иглой с широким просветом. В силиконированную пробирку предварительно наливают 1 мг стабилизатора (3,8%-ного раствора цитрата натрия), набирают кровь до метки 10 мл и аккуратным покачиванием перемешивают со стабилизатором, Богатую тромбоцитами плазму получают центрифугированием в течение 5 мин при 1000 об/мин на центрифуге ЗУХЛ4.2 ОПн-8 (кровь больных с гематокри- том свыше 0,55 л/л в течение 10 мин при 1 500 об/мин). Бедную тромбоцитами плазму получают путем центрифугирования богатой тромбоцитами плазмы при 3000 об/мин в течение 20 мин на той же центри фуге.

Фибрин-мономер получают по известному способу.

Берут богатую тромбоцитами плазму больного и здорового человека (контроль), определяют количество тромбоцитов в 1 мм каждой из плазм и доводят в них количество тромбоцитов до 150 тыс. в 1 мм3, пользуясь для этого собственной бедной тромбоцитами плазмой. Затем берут в стеклянные пробирки по 0,25 мл плазмы с содержанием 150 тыс. тромбоцитов в 1 мм3 больного и здорового (контроль), помещают в водяную баню на 30 с при 37°С, добавляют по 0,05 мл растворимого фибрин- мономера и замеряют при покачивании пробирок время появления первых агрегатов (время агрегации) тромбоцитов в плазме больного и здорового человека (контроль).

При ускорении времени агрегации в плазме больного по сравнению с контрольной результат расценивается как гиперагрегация, а при удлинении времени агрегации

о ю

xj N О

в плазме больного, по сравнению с контролем, расценивается как снижение агрегации.

Индукция агрегации тромбоцитов растворимым фибрин-мономером приведена в табл.1.

Статистические данные сравнительного анализа способа прототипа и других способов для исследования функции тромбоцитов и заявленного способа приведены в табл.2.

Как видно из табл.2, применение в качестве индуктора агрегации фибрин-мономера в большей степени выявляет изменение функциональной активности тромбоцитов, чем применение гемолизат-агрегации (прототип), особенно в группе больных тромбо- цитопатией.

Предложенным способом обследовано 164 больных с различными нарушениями в системе гемостаза, из них снижение времени агрегации на растворимый фибрин- мономер выявлено у 48 больных, гиперагрегэция с этим же индуктором агре гации выявлена у 34 человек.

П р и м е р 1, Больная З.С., 34 лет поступила в клинику в желудочно-кишечным кровотечением. При обследовании системы гемостаза выявлено (см. табл.1) резкое снижение времени агрегации на растворимый фибрин-мономер (100 с у больной, 30 с на контроле). Агрегация на другие индукторы была в пределах нормы (АДФ - 100%, тромбин-агрегация 95%, коллаген-агрегация 100%, адреналин-агрегация 105%).

П р и м е р 2. Больная Г.А., 26 лет. Диагноз: флеботромбоз нижних конечностей. Выявлено укорочение времени агрегации на растворимый фибрин-мономер (у

-

больной 15с. на контроле 30 с). Агрегация тромбоцитов на другие индукторы была повышена (АДФ-агрегация 140%, тромбин-агрегация 120%, адреналин-агрегация 135%,

5 коллаген-агрегация 130%).

Применение растворимого фибрин-мономера для оценки агрегации тромбоцитов у больной З.С. позволило объяснить причину желудочно-кишечного кровотечения, При

10 нормальной агрегации на известные индукторы (АДФ, тромбин, коллаген, адреналин) отмечалось резко сниженная агрегация на растворимый фибрин-мономер. У второй больной Г.А. отмечалась гиперагрегация

15 тромбоцитов на известные индукторы агрегации, а так же гиперагрегация тромбоцитов на растворимый фибрин-мономер, что позволило объяснить предрасположенность к тромбованию сосудов фибриновым сгуст20 ком.

Таким образом, использование предлагаемого решения позволяет оценить ранее не изучавшуюся агрегационную функцию тромбоцитов, что повышает точность диаг- 25 ностики нарушений в системе гемостаза. Заявленный способ может быть использован в клинико-диагностических лабораториях больниц различного типа (включая центральную районную больницу).

30

Формула изобретения Способ определения агрегационной активности тромбоцитов путем добавления в обогащенную тромбоцитами плазму индуктора агрегации тромбоцитов и определения времени появления агрегатов, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, в качестве индуктора агрегации тромбоцитов используют фибрин-мономер.

Та б л и ца1

Изобретение относится к медицине, а именно к гемокоагулологии, и может быть использовано для оценки функционального состояния тромбоцитов. Целью изобретения является повышение чувствительности способа. Для этого агрегационную активность тромбоцитов определяют путем добавления в обогащенную тромбоцитами плазму в качестве индуктора агрегации фибрин-мономера с последующим определением времени появления агрегатов

Примечание. + - наличие агрегации тромбоцитов.

Таблица2