Способ получения лейцинаминопептидазы из мозга Советский патент 1991 года по МПК C12N9/48 A61K37/48 

Изобретение относится к медицине и предназначено для выделения и очистки из ткани мозга поименяемого в медицине и биологии фермента лейцинаминопептида- зы(ЛАП).

Цель изобретения состоит в увеличении выхода целевого г ооду, та и упрощении способа.

Цель достигается там, что обработку ткани формальдегидом проводят в процессе гомогенизации до стадии гель-фильтрации на сефадексе, а гель-фильтрации подвергают не9 мщенный супернатант гомогената.

Способ осуществляют следующим образом.

1,5 г ткани мезга гомо енизируют в 10 мл 6-9%-ного раствора формальдегида на 0,01 М трис-буФсре, центрифугируют в течение 15 мин при 5000 об/мин. Супернатант наносяг на кол нку пля центрифугирования, заполненную сефадексом G-75, центрифугируют 1 мин со скоростью 3000 об/мин и в

элюате определяют сг пг-Ьи сную ктиз- ноет. Л Ml

Спзаифн се кую а.гтвность Лэ.тментЗ определяют с гюмсш ю стандартного ЛАПTCU О,

Удельная активность ЛАП, очищгнной дан. ыи саособо л составляет от 20 Q.O я ед/мг белка.

Г р и 1 е р. 1,5 г ткани моз а гомогени- si/ipv o . 10 мл 9%-soio асттсрз формальдегида на 0,01 ч 1р лс-Г iepa. Гомогечат центр -г 1Ь ниь пр i 5uOO об/vHH. Сулронагант наносит на колонку дтя риф гипоБе-нир, зэ олненную сефпдексом G-7U, центрифуг MpvoT 1 мин при 3000 ufi/м- - Удел актив ссть ЛАП в Эмюэтэ гостдртяе 42 ea/t-v белка

U: C. знде.энного j eoriehTd контро- - MDVOT д1-ск печ ос п етпческим анализов В процессе диск- р трофореза rri -jnapai ЛАП ро- впя -я э риде двух зон - оснсьная в области fa - R глобулинов i в

т

С

пмкп&

XS

р

44

4 О

317017464

области преальбуминов-ai глобулинов. От-используемого в медицине и биологии ферсу гствив примесных зон позволяет судить омента.

высокой степени гомогенности полученныхФормула изобретения

препаратов..Способ получения лейцинаминопепти5дазы из мозга, включающий гомогенизацию

Таким образом, изобретение позволяетткани, центрифугирование, гель-фильтрасократить и упростить очистку фермента, ацмю на сефадексе G-75, обработку 6-9%т юке увеличить его выход-удельная актив-ным раствором формальдегида, о т л и ч анёсть ЛАП 20-42 ед/мг белка, Изобретениею щ и и с я тем, что, с целью увеличения

позволяет получить высокоочищенный го- 10выхода целевого продукта и упрощения спомогенный фермент. Использование цель-соба, обработку формальдегидом проводят

нрй ткани мозга расширяет возможностиво время гомогенизации ткани, а гель-фильтпромышленной наработки ЛАП - широкорации на сефадексе подвергают неочищенный супернатант гомогената.

Изобретение относится к медицине и предназначено для выделения и очистки из ткани мозга применяемою в медицине и биологии ферменте лейцинаминопептида- зы. Цепью изобретения является увеличение еычода целевого продукта и упрощение способа, Дня этого гомогенизацию ткани мозга проводят в сфере формальдегида перед стадией гель-фильтрации а гель-фильтрации подвергают неочищенный супернаг&нт гомогената При этом время выделения сокращается до 30 мин, а удельная ачтиь- ост ь -л а доход т до 42 рд/мг белкз.