Штамм вируса болезни Марека для изготовления вакцины против болезни Марека Советский патент 1992 года по МПК C12N7/00 A61K39/255 

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и биотехнологии и может быть использовано при производстве вакцин против болезни Марека.

Важным средством борьбы против болезни Марека - заболевания, причиняющего значительный экономический ущерб, является вакцинопрофилактика. Вакцинные штаммы вируса болезни Марека должны быть достаточно иммуногенными. генетически однородными, зпатогенными для цыплят и обладать выраженной цито- пэтогенной активностью в культуре фиб- робластов эмбрионов кур (ФЭК).

Целью изобретения является получение нового вакцинного штамме вируса болезни Марека с повышенной иммунологической активностью, представляющий генетически однородный вирусный материал, легко культивируемый в культуре ку- ринных эмбриональных фибробластов.

Штамм ВНИВИП вируса болезни Марека депонирован в Всесоюзной колекции вирусов под номером 2223: семейство Herpesvlrldae, род Thetalymphocryptovirus, вид Герпевирус болезни Марека, I серртип.

О

VJ

о VJ

СП

Штамм имеет следующие морфологическую, физиологическую и культурально-им- мулогическую характеристики.

Штамм ВНИВИП представляет собой вирионы икосаэдрической симметрии, нук- леокапсид содержит ДНК. Репродукция вируса начинается в ядре пораженной клетки, где он достигает величины 150 - 170 нм и завершается приобретением белковой оболочки при переходе в цитоплазму. Здесь размеры вирионов увеличиваются до 200 - 250 нм.

Штамм ВНИВИП репродуцируется в культуре фибробластов эмбрионов кур, вызывая острую форму инфекции с выраженным цитопэтическим эффектом (образование фокусов размером 0,5 - 0,8 мм в титрах МО -6-105 ФОЕ/см).

Штамм ВНИВИП активен в реакции нейтрализации и реакции диффузной преципитации в агаровом геле со специфической сывороткой. Не обладает гемагглютинирую- щей и гемадсорбирующей активностью. Штамм ВНИВИП апатогенен для суточных цыплят при парэнтеральном введении десятикратной вакционзльной дозы. Напряженный иммунитет у цыплят, вакцинированных вакциной из штамма ВНИВИП, наступает уже через 5-7 дней, в то время как вакцина из штамма FC-126 создает иммунитет только через две недели после вакцинации. Иммуно- генная активность вакцины из штамма ВНИВИП составляет более 90%. Через одну после вакцинации штамм ВНИВИП

чает выделяться от вакцинированной .щы. что способствует контактной иммунизации цыплятневакцинировэчных, но посаженных вместе с вакцинированными.

Пример. Проводят сравнительную оценку иммуногенной активности, безвредности и биологической активности вакцин против болезни Марека.

Биологическую активность вакцин определяют методом титрования на суточной культуре фибробластов СПФ-эмбрионов кур. Активность обоих штаммов соответствует паспортным дачным: для апатогенного штамма ВНИВИП вируса болезни Марека - 5-Ю5 ФОЕ/см3; для штамма FC-126 вируса герпеса индеек - 4-Ю ФОЕ/см .

Контроль на безвредность и онкоген- ность проводят следующим образом. Двум группам суточных окольцованных цыплят по 30 голов в каждой внутримышечно вводят

десятикратную дозу апатогенного штамма ВНИВИП вируса болезни Марека и штамма FC-126 вируса герпеса индеек. 70 цыплятам вводят среду Игла, а 70 интактных цыплят оставляют в качестве контроля. Наблюдение за цыплятами согласно программе проводят в течение 150 дней. За весь период наблюдения ни в одной из групп не было зарегистрировано падежа от бодезни Марека. При комиссионном вскрытии цыплят не

было выявлено каких-либо изменений, характерных для инфекционных болезней.

Иммуногенность исследуемых вакцин определяют на суточных цыплятах. Берут А опытные группы суточных цыплят по 70 голоз в каждой. Первую группу цыплят прививают вакциной из штамма ВНИВИП внутримышечно в дозе 1000 ФОЕ/0,2 см3. Вторую группу цыплят прививают сухой вакциной из штамма FC-126 внутримышечно в дозе 2000 ФОЕ/0,2 см3. Третью группу цыплят прививают французской вакциной Лиомарекс внутримышечно в дозе 2000 ФОЕ/0,2 см3 Четвертая группа цыплят остается невакцинировэнной (контроль пзтогенности вируса).

Через 14 дней после иммунизации опытные и контрольную группы цыплят им бицируют внутрибрюшинно вирулентном штаммом Контур вируса болезни Марека

в объеме 0.2 см . За опытной птицей ведут наблюдение в течение 150 дней.

Результаты проведенных исследований представлены е таблице.

Из представленных в таблице данных видно, что вакцина из штамма ВНИВИП вируса болезни Марека показала более высокую иммуногенность (94,3%), чем французская вакцина Лиомарекс (88.9%) и сухая вакцина из штэмма FC-126(80.5%).

Формула изобретения Штамм вируса болезни Марека ГКВ № 2223 для изготовления вакцины против бо- лезни Марека.

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и биотехнологии и может быть использовано при производстве вакцин против болезни Марека. Целью изобретения является получение нового вакцинного штамма вируса болезни Марека ГКВ Nfc 2223 с повышенной иммунологической активностью, представляющий генетически однородный вирусный материал, легко культивируемый в культуре куриных эмбриональных фибробластов. Вакцинный штамм ВНИВИП вируса болезни Марека репродуцируется а культуре фибробластов выбрио- нов кур, вызывая острую инфекцию с выраженным цитопатическим эффектом че« рез72-96ч в титрах МО5- 6105 ФОЕ/см3 Штамм ВНИВИП активен в реакции нейтрализации и реакции диффузной преципитации в агаровом геле. Не обладает гемагглютинирующей и гемэдсорбирующей активностью. Штэмм ВНИВИП обладает выраженной иммуногеннои активностью при вакцинации суточных циплят. Иммуно- геннзя активность вакцины из штамма ВНИВИП составляет более 90% Через одну неделю после вакцинации штамм ВНИВИП начинает выделяться от вакцинированной птицы.