Питательная среда для культивирования энтеробактерий Советский патент 1992 года по МПК C12N1/20 

Поставленная цель достигается тем, что культивирование бактерий проводят в питательной среде, представляющей собой гуминовую кислоту, растворенную в фосфатном буфере (рН 7,4).

Среду готовят следующим образом. 8,2-8,7 г натрия фосфорнокислого однозамещенного, 2,2-2,7 г калия фосфорнокислого однозамещенного, 0,01 - 0,04 г гуминовой кислоты разводят в 100 мл дистиллированной воды, затем доводят объем до 1000 мл и стерилизуют в автоклаве при 0,5 атм в течение 30 глин. Питательная среда имеет светло-коричневый оттенок без специфического запаха, рН среды 7,4.

П р и м е р 1. Готовят среду как описано выше, ингредиенты берут в следующих количествах(минимальные запредельные значения), г:

Натрий фосфорнокислый

двузамещенный7,9

Калий фосфорнокислый однозамещенный2,0 Гуминовая кислота 0,005 Дистиллированная вода, л До 1 После стерилизации в питательную среду дозировано вносят суспензию бактерий штаммов Salmonella enteritidis. Salmonella typhimurlum, Shlgella Sonnei и Shlgella flexnerl для накопления биомассы. Пробирки с инокулированной питательной средой инкубируют в термостате при 37°С в течение суток. Затем для определения прироста бактериальной массы производят серийные высева бактерий на чашки Петри с соответствующими дифференциально-диагностическими средами (среда Плостерева, висмут-сульфидный агар) с учетом необходимых разведений.

Прим ер 2. Готовят среду в соответствии с примером 1, но ингредиенты берут в следующих количествах (минимальные предельные значения), г:

Натрий фосфорнокислый двузамещенный8,2 Калий фосфорнокислый однозамещеняый , 2,2 Гуминовая кислота 0,01 Дистиллированная вода, л До 1 Прм учете колоний на чашках Петри (тс15лица)установлено, что при заражающей доае микр. кл/мл количество шигелл за сутки культивирования увеличилось в прототипе до 28 ±6 X 10 микр.кл/мл, а в

предлагаемом варианте среды до 26 ± 5 х х10 , тогда как сальмонелл 222 ± 23 х 10 и 215 ± 26 X 10 соответственно.

Различия сравниваемых показателей в прототипе и в предлагаемой среде недостоверны.

П р и м е р 3. Готовят среду как в примере 1, но ингредиенты берут в следующих количествах (оптимальный вариант), г: Натрий фосфорнокислый двузамещенный8,5 Калий фосфорнокислый однозамещенный2,5 Гуминовая кислота0,02 Дистиллированная вода, л До 1 При учете колоний на чашках Петри (таблица) установлено, что количество шмгелл за 1 сут культивирования увеличилось, в прототипе до 28 ±6x10 микр.кл/мл, а в предлагаемой среде до 36 ±4x10 сальмонелл 222 ± 23 X 10 и 226 ± 21 х 10 соответственно.

Различия сравниваемых показателей статистически недостоверны.

П р и м е р 4. Готовят среду как в примере 1, но ингредиенты берут в следующих количествах (максимальные предельные значения), г:

Натрий фосфорнокислый двузамещенный. г8,7 Калий фосфорнокислый однозамещенный2,7 Гуминовая кислота 0,04 Дистиллированная вода, л До 1 При учете колоний на чашках Петри (таблица) установлено, что количество шигелл за 1 сут культивирования увеличилось в прототипе до 28 ± 6 х 10, а в-предлагаемой среде до 24 ± 55 х 10 , сальмонелл 222 ± 23 X 10 и 190 ± 18 х 10 соответственно. .

Различия сравниваемых показателей статистически недостоверны.

П р и м е р 5. Готовят среду как в примере 1, но ингредиенты берут в следующих количествах (масимальные запредельные значения ингредиентов), г: Натрий фосфорнокислый двузамещенный9,0 Калий фосфорнокислый однозамещенный3,0

Гуминовая кислота0,08

Дистиллированная вода, лДо 1

При учете результатов (таблица) установлено, что количество шигелл за 1 сут культивирования увеличилось в прототипе до 28 ±6 х10, а в предлагаемой среде только до 9 ±1,3 х10, сальмонелл 222х ± 23 х10° и 50 ±10 х10 соответственно. Различия показателей статистически достоверны.

Результаты роста кишечных бактерий на различных питательных средах приведены в таблице.

Из приведенных данных видно, что размножение бактерий происходит в питательной среде, содержащей 0,01 - 0,04 г гуминовой кислоты; 2,2 - 2,7 г калия фосфорнокислого однозамещенного; 8,2 - 8,7 г натрия фосфонокислого двузамещенного. Увеличение концентрации ингредиентов в питательной среде не способствует увеличению концентрации бактерий, напротив, количество бактерий уменьшается на 68 76 % по сравнению с прототипом.

Таким образом, предлагаемая среда по сравнению с известными обеспечивает равнозначное размножение бактерий, прирост бактериальной массы в обоих случаях составлял 4 - 6 %. Ее использование позволит

заменить дефицитные пищевые продукты (мясо, рыбу, дрожжи) на дешевое непищевое сырье- гуминовые кислоты.

Процесс приготовления питательной среды прост, не требует специального оборудования и реактивов. Применение предлагаемой среды для культивирования бактерий в микробиологической промышленности и микробиологических исследованиях позволяет снизить себестоимость целевого продукта.

Формула изобретения

Питательная среда для культивирования энтеробактерий, содержащая питательную основу, минеральные соли и дистиллированную воду, отличающаяс я тем, что, с целью упрощения состава среды при сохранении ее ростовых свойств, в качестве питательной основы, она содержит гуминовую кислоту, а в качестве минеральных солей - фосфорнокислый двузамещенный натрий и фосфорнокислый однозамещенный калий при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:

Фосфорнокислый двузамещенный натрий8,2 - 8,7

Фосфорнокислый

однозамещенный калий .2,2-2,7

Гуминовая кислота0,01 - 0,04

Дистиллированная

вода, лДо 1

Изобретение относится к микробиологии, а именно к питательнь1м средам для культивирования бактерий, и. может быть использовано в микробиологической промышленности. Целью изобретения является упрощение состава среды при сохранении ее ростовых свойств. Предложена питательная среда для культивирования энтеробактерий, содержащая следующие ингредиенты, г: натрий фосфорнокислый двузамещенмый 8,2-8,7; калий фосфорнокислый однозамещенный 2,2-2,7; гумино- вая кислота 0,01-0.04; дистиллированная вода до 1 л. 1 табл.^w'ЁИзобретение относися к микробиологии, а именно к питательным средам для культивирования, кишечных бактерий, и может быть использовано в микробиологической промышленности для расширения арсенала заменителей натуральных мясных и рыбных продуктов непищевыми источниками сырья.В микробиологии известны питательные среды для культивирования кишечных бактерий, в которых используют фермен- толизат биомассы микроорганизмов - дрожжей и бактерий, выращенных на Н-парафиновой нефти и лактопептоне, с добавлением остальных необходимых компонентов.Наиболее близка к предлагаемому магниевая среда следующего состава;Раствор А:Пептон, г4.2Хлорид натрия, г7,0Дрожжевой гидроли-зат, г20.0Фосфат калия, г1.5Дистиллированнаявода, мл890Раствор Б:Хлорид магния, г3,6Дистиллированная вода, мл90Раствор В:Бриллиантовыйзеленый, мл (водныйраствор 0,5%)0,9рН7,4Недостатками известной среды являются многокомпонентность, сложность приготовления и использование в качестве основного сырья ценных пищевых продуктов (мясо, дрожжи, рыба, пептон).Цель изобретения - упрощение состава среды при сохранении ее ростовых свойств.VI о00 00 СА>& J^