Способ определения гетерогенности гемоглобина Советский патент 1992 года по МПК G01N33/72 

Изобретение относится к области физиологии, биохимии и химической медицины, а именно к области исследования гетерогенности белков, в частности гемоглобина, методом электрофореза..

Цель изобретения - ускорение способа.

Способ осуществляется следующим образом. : . -;

Ацетатцеллюлозные пленки Владимирского или Казанского производства .помещают на 8-10 мин в ацетатный буфер (136,09 г ацетата натрия и 1,4 г три- лона Б на 1 л дистиллированной волы, 57 мл ледяной уксусной кислоты на 1л воды, из двух растворов готовят смесь из расчета 910 мл первого и 90 мл второго. Затем пленку помещают на 1-. 1,5 мин в цитратиый .буфер (10,5 г лимонной кислоты и 1,4 г трилопа Б на.

1 л воды, 2,13 г лимоннокислого натрия- :На 1 л воды,.из двух растворов готовят смесь из расчета 50 мл первого и 750 мл второго). Далее пленку подсушивают фильтровальной бумагой, наносят полированным стеклом образец гемоглобина и помещают в электрофоретическую камеру с буферным раствором (10,5 г лимонной кислоты на 1 л воды и 2,13 г лимоннокислого натрия на 1 л воды сливают в пропорции: 50 мл первого и 750 мл второго) и пропускают электрический ток -напряжением 300-350 В через электроды камеры. Через 8- 12 мин пленку вынимают, подсушивают и окрашивают.

В табл. 2 представлены данные по числу фракций гемоглобина человека при заряде пленок в буферных растворах при напряжении электрического тока

С& Ј

:л

317

300-350 В и времени электрофореза 8- 12 мин.

В табл. 1 представленные данные по числу фракций гемоглобина при электро форезе в условиях разного напряжения электрического тока.

В табл. 3 представлено количество фракций гемоглобина в зависимости от количества трилона Б и времени электрофореза, напряжение 350 В.

В табл. 4 представлено количество фракций гемоглобина в зависимости от количества трилона Б и напряжения электрического тока, время электрофореза 10 мин.

Положительный эффект.заключается в том, что электрофорётическое разделение гемоглобина с помощью предложен ного способа можно провести в 7 раз быстрее по сравнению с прототипом.

16450ч

Ф ормула изобретения

Способ определения гетерогенности гемоглобина, включающий нанесение пробы крови на ацетатцёллюлозную пленку, предварительно обработанную буферным раствором, подсушенную фильтровальной бумагой с последующим электрофорезом и определением числа фракций, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, пленку выдерживают 8-10 мин в растворе ацетатного буфера с добавлением к нему трилона Б в конечной концентрации 0,064-1,9%, затем - 1-1,5 мин в растворе цитратно- го буфера с добавлением трилона Б в конечной концентрации 0,04-0,11%, а электрофорез проводят при напряжении 300-350 В в течение 8-12 мин.

Т а б л и ц а 1

Изобретение относится к области физиологии, биохимии и клинической .. медицины, а именно к области исследования гетерогенности белков методой электрофореза. Цель изобретения - ускорение способа. Цель достигается тем, что наносят пробу крови на ацетатную пленку, которую предварительно выдерживают в течение 8-10 мин в растворе ацетатного буфера с добавлением к нему трилона Б в конечной концентрации 0,064-1,9%, затем - 1-1,5 мин в растворе нитратного буфера с добавлением трилона Б в конечной концентрации 0,04-0,11%, а электрофорез проводят, при напряжении электрического тока 300-350 В в течение 8-12 мин. Использование способа в 7 раз ускоряет процесс электрофореза гемоглобина. 4 табл. г (Л

Примечание. Пленки заряжали в ацетатном

буфере 10 мин, в цитратиом 1 мин.

Пленка в цитратном буфере не заряжалась.

Т. а б л и ц а 2

Напряжение, В

Количество фракций при содержании трилона Б, г

Т а б л и ц а 3