Способ подготовки препарата лимфатических сосудов к исследованию Советский патент 1992 года по МПК G01N1/28 

Изобретение относится к медицине и биологии, а именно к гистохимии, и может быть использовано в лабораториях для определения содержания ацетилхолина в тканях.

Целью изобретения является получение препарата с сохранной стенкой лимфатических сосудов.

Способ осуществляют следующим образом.

Изолированный отрезок лимфатического сосуда помещают в соответствующую рН инкубационную среду и буфер с рН 6,0-6,3, что обеспечивает более активную реакцию на холинэстеразу с субстратом. Далее проводят дегидратацию препарата в спиртах возрастающей концентрации, при этом используют спирты 50, 75, 80, 96°, далее ксилол и абсолютный спирт. Эти условия необходимы для сохранения структуры стенки сосуда, близкой к прижизненному. Абсолютный ацетон исключают из процесса проведения гистохимической реакции, поскольку достаточно использование абсолютного спирта. Из средств заключения

препарата выбирают смесь глицерина и желатины в соотношении 1:1 с соблюдением температурного режима в пределах 60- 80°С. При такой обработке лимфатические сосуды четко дифференцируются от окружающей ткани.

П р и м е р 1. Фосфатный буфер с рН 6,0-7,0, проводка через спирты 50, 75, 80, 96° по 10 мин. Абсолютный спирт, абсолютный ацетон, ксилол, как обезвоживающие вещества используют по 1 мин. Анализ препаратов с помощью микроскопа МБИ-2 показал потерю активности холинэстеразы, разрушение структуры стенки лимфатического сосуда, обнаружены отдельные мелкие кусочки сосудистой ткани и определение холинергических нервных структур не представляется возможным.

П р и м е р 2. Использовали фосфатный буфер с рН 6,0-6,3 провода препаратов через спирты 50, 75, 80, 96° в течение 5 мин в абсолютном спирте 2 с, в ксилоле 3 с. Абсолютный ацетон исключен из процесса дегидратации. Заключение препарата производят в смеси глицерина с желатиной

(Л

со о ел

в соотношении 1:1 с учетом температурногоФормула изобретения режима 60-80°С. Результаты анализа препа-Способ подготовки препарата лимфа- ратов под микроскопом МБИ-2 показали на-тических сосудов к исследованию путем личие холинергических нервных структур вфиксации, заключения в среды, содержа- стенке лимфатических сосудов и в целом5 щие желатин, приготовления срезов с no- сохранены структурные элементы стенкиследующей обработкой в инкубационной сосуда.среде, отличаю щи йс ятем, что, с целью Таким образом, предлагаемый способлучшей сохранности структуры сосудов, получить качественные препараты лимфа-среда для заключения дополнительно со- тических сосудов выявляет холинергиче-10 держит глицерин в соотношении с желати- скую иннервацию в стенке лимфатическихной 1:1, при этом заключение проводят при сосудов, метод нашел применение в клини-60-80°С, а обработку в инкубационной сре- ческой лимфологии.де проводят при рН 6,0-6,3.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лимфологии. Целью является получение сохранной структуры лимфатических сосудов. При этом лимфатические сосуды инкубируют в среде для выявления холинэстеразы, а среда для заключения дополнительно содержит глицерин в соотношении с желатиной 1:1. Заключение проводят при температуре 60-80°С, а инкубацию в среде проводят при установлении рН 6,0-6.3. Способ позволяет получить качественные препараты лимфатических сосудов.