Способ определения папаверина Советский патент 1992 года по МПК G01N21/78 

неке, отделения образовавшегося осадка фильтрованием, растворения осадка в водно-ацетдновой смеси с последующим фотометрированием полученного раствора. Недостатками этого способа являются его низкая чувствительность, трудоемкость, связанная с наличием операции осаждения и последующего растворения осадка, а также необходимость использования органического растворителя ацетона.

Наиболее близким к предлагаемому является безэкстракционный фотометрический способ определения алкалоидов, заключающийся в обработке специально полученной из растительного сырья водной вытяжки 0,%-ным раствором восстановленной фосфорно-молибденовой кислоты с последующим фотометрированием окрашенного соединения. Содержание алкалоидов в анализируемой пробе находят, измеряя оптическую плотность избытка фосфорно-молибденовой кислоты не прореагировавшей с солью алкалоидов,, Данный способ не содержит операции экстракции и по сути состоит в обработке аликвоты анализируемого раствора цветореагентом с последующим фотометрированием окрашенного соединения.

К недостаткам известного способа следует отнести низкую чувствительность определения (возможно количественное определение 6,6-16,10 мг алкалоидов, предел определения составляет 6,6 мг), а также известную трудоемкость, связанную с наличием операции осаждения.

Отличительными признаками предлагаемого способа являются использование в качестве цветореагента при определении папаверина смеси молибдата аммония и пирогаллового красного в мольном соотношении 1:(2,0-3,2) в присутствии OC-2Q при его концентрации

М-16,0)-1(Г3%.

Цель изобретения повышение чувствительности определения папаверина, а также упрощение способа.

Поставленная цель достигается тем, что водный раствор анализируемого вещества последовательно обрабатывают растворами моллбдата аммония,моноал- килового эфира полиэтиленгликоля на основе первичных жирных спиртов (ОС-20) и пирогаллового красного .(ПК) при рН ,5-5,0 с последующим фотометрированием окрашенного соединения .

Пример 1. Определение папаре- рина предлагаемым способом.

В мерную колбу на 25 мл помещают аликвотную часть анализируемого раствора, содержащего 0,125-1,000 мг папаверина, добавляют 1 мл 6,

раствора молибдата аммония, 2 мл 0,1%- ного раствора ОС-20, 2,0 мл 6,25 КГ М раствора ПК и 2 мл ацетатного буферного раствора с рН 4,5 (буферные растворы и раствор пирогаллового красного

5 готовили согласно известному способу). Доводят раствор до метки дистиллированной водой. На спектрофотометре (например, СФ-4А, СФ-16) измеряют оптическую плотность растворов при

610 нм с 1 1 см относительно раствора сравнения,не содержащего папаверин. Концентрацию папаверина в анализируемом растворе определяют по градуировочному графику. Построение

5 градуировочного графика проводится аналогичным образом с применением раствора папаверина с известной концентрацией. Результаты количественного определения параверина представлены в табл. 1 о

Данные, представленные в табл„ 1, показывают, что предложенным способом возможно проводить определение папаверина при его концентрации 0,125 - 1,000 мг в 25 мл раствора с относи5 тельной погрешностью 1,7 - 6,7 %.

Примеры 2 - 5. Обоснование интервала соотношений концентраций молибдата аммония и пирогаллолового красного в присутствии ОС-20„

® Данные, представленные в табл. 1 (пример 1), показывают возможность определения папаверина предлагаемым способом при молярном соотношении концентраций (ПН,ргМо04.: ПК 1:2 в при сутствии ОС-20. В табл, 2 представлены результаты определения папаверина предлагаемым способом при других соотношениях концентраций молибдата аммония и ПК, входящих в предлагаемый интервал, и при соотношениях концентраций молибдата аммония и ПК, выходящих за предлагаемый интервал. Определение выполнялось аналогично примеру t с использованием постоянной кон5 центрации молибдата аммония,но вместо 2,0 мл 6,25 раствора пирогаллового красного использовали 2,5 мл (пример 2), 3,2 мл (пример 3), 1,5 мл

0

O

(пример М , ,0 мл (пример 5) раствора ПК той же концентрации.

Данные, представленные в табл. 2, показывают, что реализация способа определения папаверина при использовании (NH4)ЈMoO и ПК, взятых в мольном соотношении 1:(2,0-3,2), позволяет достичь цель изобретения (примеры 2 и 3). Выход за предлагаемый интервал приводит к уменьшению разницы в характере светопоглощения цветореа- гента в присутствии и в отсутствие папаверина, т„е, к уменьшению чувствительности способа. Так, использование молибдата аммония и ПК,взятых в мольном соотношении 1:(2,0-3,2), позволяет проводить определение 0,125 - 1,000 мг папаверина (примеры 1 - ЗК При использовании молибдата аммония и ПК, взятых в соотношении 1:1,5 и - 1:,0 (соответственно примеры k и 5), предел определения составляет 0,375 мг. Определение меньших количеств папаверина невозможно принципиально,

П р и м е р 6 „ Обоснование необходимости применения ОС-20,

Данные, представленные в табл. 1 и 2 (примеры 1-3), показывают возможность определения папаверина предлагаемым способом в присутствии 8 ОС-20„ В табл. 3 представлены результаты определения папаверина в отсутствие ОС-20. Определение выполнялось аналогично примеру 1, за исключением операции введения 2 мл 0,1%-но- го раствора ОС-20.

Данные, представленные в табл.1 и 2 (примеры 1-3), показывают возмож10

15

лагаемым способом при мольном со от шении концентраций молибдата аммон и ПК, равного 1: (2,0-3,2) в присут вии ОС-20 при его концентрации в конечном объеме. В табл. представлены результаты определени папаверина в присутствии различных концентраций ОС-20. входящих в пре лагаемый интервал концентраций ОСа также выходящих за предлагаемый тервал. Определение выполнялось ан логично примеру 1, но вместо 2 мл 0,1%-ного раствора ОС-20 использов ли 1 мл (пример 8), 0,5 мл (пример 5,0 мл (пример 10) раствора ОС-20 те Концентрации.

Данные, представленные в табл.

20 показывают, что реализация способа определения папаверина при использ вании концентрации ОС-20 Cf-l6)« 10 (примеры 1 - 3 и 7, 8) позволяет достичь цель изобретения. Выход за

25 предлагаемый интервал приводит к

уменьшению чувствительности способа уменьшению разницы в светопоглощени цветореагента в присутствии ОС-20 папаверина и в отсутствие папаверин Так, при использовании концентрации

30 ОС-20 (-1б). 10 предел определени составляет 0,125 мг в 25 мл конечно го объема; при использовании других концентраций ОС-20 (примеры 9 и 10) предел определения составляет 0,375

35 в конечном объеме 25 мл. Определени меньших количеств папаверина невозм но принципиально.

Таким образом, использование пре лагаемого способа определения папав

ность определения папаверина способом 40 рина дает положительный эффект по в присутствии ОС-20. Данные, представленные в табл.3 (пример 6), показывают, что реализация способа определения папаверина в отсутствие

сравнению с известным способом, выр жающийся в повышении чувствительное ти способа при использовании в каче ве цветореагента смеси молибдата ам

ОС-20 не позволяет достичь цель изоб- 5 мония и пирогаллолевого красного в

присутствии ОС-20 в 51,6 раза (пред определения составляет 0,125 мг вме то. 6, 46 мг по известному).

ретения. Если по примеру 1 минимально определяемая концентрация папаверина составляет 0,125 мг, то использование в качестве цветореагента смеси молибдата аммония и ПК позволяет проводить определение папаверина при его концентрации 0,375-1,000 мг.

Примеры - Ю. Обоснование предлагаемого интервала концентраций ОС-20.

Данные, представленные в табл. 1 и 2 (примеры 1-3), показывают, что возможно определение папаверина пред

5

лагаемым способом при мольном со отно- шении концентраций молибдата аммония и ПК, равного 1: (2,0-3,2) в присутствии ОС-20 при его концентрации в конечном объеме. В табл. представлены результаты определения папаверина в присутствии различных концентраций ОС-20. входящих в предлагаемый интервал концентраций ОС20, а также выходящих за предлагаемый интервал. Определение выполнялось аналогично примеру 1, но вместо 2 мл 0,1%-ного раствора ОС-20 использовали 1 мл (пример 8), 0,5 мл (пример 9), 5,0 мл (пример 10) раствора ОС-20 той те Концентрации.

Данные, представленные в табл. Ь

показывают, что реализация способа определения папаверина при использовании концентрации ОС-20 Cf-l6)« 10 (примеры 1 - 3 и 7, 8) позволяет достичь цель изобретения. Выход за

предлагаемый интервал приводит к

уменьшению чувствительности способа - уменьшению разницы в светопоглощении цветореагента в присутствии ОС-20 и папаверина и в отсутствие папаверина. Так, при использовании концентрации

ОС-20 (-1б). 10 предел определения составляет 0,125 мг в 25 мл конечного объема; при использовании других концентраций ОС-20 (примеры 9 и 10) предел определения составляет 0,375 мг

в конечном объеме 25 мл. Определение меньших количеств папаверина невозможно принципиально.

Таким образом, использование предлагаемого способа определения папаверина дает положительный эффект по

сравнению с известным способом, выражающийся в повышении чувствительное-- ти способа при использовании в качестве цветореагента смеси молибдата аммония и пирогаллолевого красного в

присутствии ОС-20 в 51,6 раза (предел определения составляет 0,125 мг вместо. 6, 46 мг по известному).

Практическое использование способа позволит существенно повысить чувствительность определения папаверина и повысить надежность результатов анализа .

Формула изобретения

Способ определения папаверина пу- ч тем обработки водного раствора анализируемого вещества раствором цеетореагента с последующим измерением оптической плотности полученного окрашенного раствора, отличающий- с я тем, что, с целью повышения чувствительности определения, в качестве

дата аммония и пирогаллолового крЯсно-р го при молярном соотношении 1;(2,0- 3,2) и обработку ведут в присутствии моноалкилового эфира полиэтиленгликоля на основе первичных жирных спирВЦТСЛЬНОСТИ ОПрвДвЛ ™ у в n. w ггт r -.. .. ,™.,г. .-,. rL

цветореагента используют смесь молиб- тов при концентрации (k,0-16,0)-10 %.

8

дата аммония и пирогаллолового крЯсно-р го при молярном соотношении 1;(2,0- 3,2) и обработку ведут в присутствии моноалкилового эфира полиэтиленглико ля на основе первичных жирных спир ггт r -.. .. ,™.,г. .-,. rL

тов при концентрации (k,0-16,0)-10 %.

Использование; в аналитической химии при анализе фармацевтических препаратов,, Сущность изобретения: водный раствор пробы обоабатывают смесью молибдата аммония и пирогалло- вого красного при молярном соотношении Т: (2,0-3,2) в присутствии неионо- генного поверхностно-активного вещества ОС-20 при его концентрации (-16) 10 % Полученный раствор фото- метрируют, относительная погрешность 1.7-6,7$. табл ты кислотного характера: эозин (экстра гент - хлороформ), бромкрезоловый пурпурный (экстрагент - бензол). Кроме этих красителей применяют и метило- оанж (экстрагент - хлороформ), Общими недостатками этих методов являются невысокая чувствительность определения, трудоемкость, связанная с наличием операции экстракции, необходимость использования токсичных органических растворителей, а также невысокая воспроизводимость результатов анализа. Известен способ определения папаверина путем осаждения его солью СО ел 4 Ј

Т а б л и ц а 1

Таблица 2

45

ТаблицаЗ

определена 6.1

м

4-10

16 -10

2-10

,-

20-10

-5

Редактор Н. Лазаренко Техргд М.Дидык

Заказ 1812ТиражПодписное

ВОДИЛИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, г.Ужгород, ул. Гагарина,101

Таблица 4

0,1250,124

0,5000,510

1,0000,989

0,1250,127

0,5000,505

1,0001,032

0,125Не определеноНе

0,500 0,489

1,000-. 1,032

0,125Не определеноНе

0,5000,490

1,0001,008

Корректор М. Самборская