Способ дифференциальной диагностики системной красной волчанки и ревматизма Советский патент 1992 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к ревматологии и может быть использовано в клинической практике для дифференциальной диагностики красной волчанки и активного ревматизма.

Известен способ дифференциальной диагностики системной красной волчанки и ревматизма путем определения уровня иммуноглобулинов сыворотки крови. Однако, известный способ не точен и не специфичен, так как повышение уровня 1 наблюдалось как при ревматизме, так и при системной красной волчанке, а частота обнаружения повышенного их уровня составляла 58.3%.

Известен способ дифференциальной диагностики системной красной волчанки и ревматизма путем определения количественного и функционального состояния Т- и В-систем иммунитета Однако, известный способ трудоемок, дорогостоящий и длителен по времени,

Наиболее близким по техническому решению к заявляемому является способ дифференциальной диагностики системной

красной волчанки и ревматизма, который заключается в определении в крови больного содержания иммунобластов.

Недостаток способа заключается в том, что он является недостаточно точным, так как повышенное содержание иммунобластов в периферической крови наблюдалось у 60% больных СКВ и 20% больных ревматизмом.

Известный способ отличается также большей трудоемкостью, поскольку требует специального выделения лимфоцитов.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Цель достигается тем, что в сыворотке крови пациента определяют связывающую способность Ig G с пролином, при ее уровне 0,6 г/л и более диагностируют системную красную волчанку, а менее 0,6 г/л - ревматизм.

Способ осуществляется следующим образом.

В две пробирки (опытную и контрольную) наливают по 0,15 мл сыворотки крови. В опытную пробирку добавляют 0,05 мл проХ|

i

сл XI

лина в физ. растворе фирмы Reanal (ВНР) - 82,5 мг/мл, не обладающим комплементарными, антикомплементариыми и гемолитическими свойствами, а в контрольную - такое же количество изотонического раство- ра хлорида натрия. Содержимое пробирок перемешивают, инкубируют в течение одного часа в термостате при 37°С. Затем опыт и контроль раскапывают микрошприцем в лунки агар-агара, как это делается при оп- ределении иммуноглобулинов радиальной иммунодиффузией по методу Манчини (1965). Пластину инкубируют во влажной камере при температуре 4° С в течение 24 ч. По окончании инкубации измеряют диаметр колец преципитации. Расчет связывающую способности Ig G с пролином производят по формуле;

lg-AT K-On,

где Ig- AT - связывающая способность Ig G с пролином;

К - количество Ig G в смеси сыворотки крови с пролином.

Оп - количество I g G в смеси сыворотки крови с пролином.

Разведения моноспецифичеекой сыворотки производят в соответствии с Наставлением по применению моноспецифических сывороток против иммуноглобулинов человека.

Используют преимущественно моносыворотки, титр которых на ампуле составлял 1:20, 1:25, 1:32. Разведения антисыворотки делают на 0,1 М веронал-мединаловом буфере следующим образом:

При титре 1:20 сухое содержимое ампулы растворяют в 1 мл дистиллированной воды, затем полученную антисыворотку разводят 9,5 мл веронал-мединалового буфера. Стеклянные пластины покрывают слоем сме- си: агар (9,5 мл) и моноспецифическая сыворотка (9.5 мл), разведенная как описано выше, т.е. в соотношении 1:1. Приготовление моноспецифических сывороток с титрами на ампуле 1:25 и 1:32 осуществляется аналогично в соответствии с указанными титрами.

Системное прогрессирующее поражение соединительной ткани при ревматизме и СКВ сопровождается нарушением обмена коллагена. Специфической аминокислотой для коллагена является пролин. который не содержится ни в каких других белках организма и является специфической меткой коллагена и продуктов его распада.

На долю пролина приходится около 33% аминокислотного состава коллагена.

При достаточной интенсивности и распространенности деструктивных процессов, протекающих в соединительной ткани,

в крови и моче больных, увеличивается концентрация пролина.

Повышенная связывающая способность I g G с пролином является маркером повышения уровня этой аминокислоты в крови и сохраняется длительное время после нормализации содержания пролина.

Учитывая вышесказанное, в соответствии с целью изобретения была изучена связывающая способность I g G с пролином у 17 доноров, 25 больных ревматизмом 1-11 степени активности и 32 больных СКВ 1-11 степени активности. Диагноз СКВ у обследованных больных верифицирован на основе общепринятых критериев Американской Ревматологической Ассоциации, включая наличие Е-клеток и антинуклеарного фактора в диагностически значимых титрах, а ревматизма - на основании критериев Киселя-Джонса-Нестерова. У всех больных ревматизмом имели место органические поражения сердца, подтвержденные при Эхо-КГ.

Полученные результаты представлены в табл.1.

При анализе индивидуальных величин исследуемого показателя в группе больных ревматизмом и СКВ оказалось, что у 31 из 32 больных СКВ (т.е. 96,8%) связывающая способность I g G с пролином составила 0,6 г/л и более, тогда как у 23 из 25 больных ревматизмом (92;0%) значения этого показателя были менее 0,6 г/л. Это дало основание использовать численное значение связывающей способности 1 ° С с пролином 0,6 г/л как дифференциально-диагностический критерий распознавания рассматриваемых заболеваний. При этом точность способа (т.е. процент правильной постановки диагноза у 57 больных СКВ и ревматизмом) составляет 94,7%.

Сопоставление точности способа-прототипа и предлагаемого способа представлено в табл. 2.

Как видно из данных табл. 2, точность предлагаемого способа достоверно превышает точность способа-прототипа.

Таким образом, применение способа обеспечивает высокую точность (94,7%) дифференциальной диагностики СКВ и ревматизма.

П р и м е р 1. Больная К., 22 лет, поступила в стационар с жалобами на периодические ноющие боли в области сердца, сердцебиение и одышку при физической нагрузке, ломоту в сустав.ах, субфебрилитет, пятнисто-папулезную сырь после приема антибиотиков, похудание 3 кг без видимой причины. В анамнезе 3 года назад - тонзил- лэктомия.

При объективном обследовании: общее состояние удовлетворительное. Кожные покровы бледные, пятнисто-папулезная сыпь на коже туловища и конечностей. Периферический лимфоузлы не пальпируются. Сус- тавы не изменены. В легких везикулярное дыхание. Тоны сердца ритмичные, систолический шум на верхушке. Пульс 100 уд. в мин. АД 120/70 мм рт.ст. Живот мягкий, при пальпации безболезненный. Симптом Пас- тернацкого отрицательный с обеих сторон. Периферических отеков нет.

Данные объективного обследования не позволяли достоверно диагностировать ревматизм или СКВ. Больная была обследова- на предлагаемым способом.

Получены следующие результаты. Связывающая способность 1 g G с пролином г/л

В крови больнойНормальная

0,5320-0,10

Учитывая непродолжительный характер заболевания (до 3 месяцев), отсутствие данных, свидетельствующих об органическом поражении клапанов сердца и наличии ха- рэктерных иммунологических сдвигов, больной был поставлен диагноз; ревматизм ак- тивнаяфаза, 1 степени активности, первичный ревмокардит, ХНК 1 ст. Больной был проведен полный курс противоревматической тера- пии, больная была взята на диспансерное наблюдение. В последующем при дальнейшем наблюдении в течение года были выявлены признаки сформировавшегося митрального стеноза.

П р и м е р 2. Больная У., 31 года, поступила в стационар с жалобами на боли в области сердца, одышку при нагрузке, боли в временами легкое припухание мелких суставов кистей, онемение кончиков пальцев рук и ног, субфебрилитет.

Считает себя больной 2 года, когда появились вышеперечисленные жалобы. При обследовании выявлен диастолический шум над аортой, поставлен диагноз ревматизм, аортальная недостаточность.

При поступлении объективно: общее состояние удовлетворительное. Нерезко выраженная гиперемия щек и переносицы. Увеличены периферические лимфоузлы. Не- значительная дефигурация проксимальных межфаланговых суставов кистей рук. В легких везикулярное дыхание. Тоны сердца ритмичные, тахикардия, диастологический шум над аортой. Пульс 100 ударов в мин. АД 130/60 мм рт.ст. В анализе крови; Не 110 г/л. СОЭ 15 мм/ч. Общий анализ мочи: белок 0,099 г/л, лейкоциты до 10 в поле зрения, эпителий плоский - 8 в п/зр,

эритроциты - 5-7 в п/зр. Антинуклеарный фактор и LE-клетки не обнаружены.

Учитывая клиническую картину и объективные данные (нечетко выраженная волча- ночная бабочка, лимфаденопатия, стойкость полиартрита с поражением мелких суставов кистей, поражение почек) с последующим подтверждением при лабораторном и инструментальном обследовании диагноз ревматизма был пересмотрен в пользу СКВ.

Для уточнения диагноза больная была обследована предлагаемым способом.

Получены следующие результаты. Связывающая способность 1 g G с пролином, г/л:

В крови больнойНормальная

3,3250-0,10

Это позволило подтвердить диагноз: СКВ, хроническое течение, 1 ст. активности с поражением кожи, суставом, сердца, почек, РЭС. Больной было назначено 2 таблетки преднизолона со снижением дозы до 1 /2 таблетки и 1 табл. делагила на ночь, отменена бициллинопрофилактика, вызывающая при СКВ сенсибилизацию организма и неблагоприятно сказывающая на течении заболевания.

Спустя три месяца, после инсоляции (поездка в Крым) у больной резко повысилась температура до 38°С, усилилась гиперемия щек, появилась пятнисто-папулезная сыпь, алопеция, усилилась одышка, тахикардия, увеличилось артериальное давление. При повторном поступлении в клинику и обследовании было обнаружены LE-клетки и антинуклеарный фактор, что позволило подтвердить диагноз СКВ.

П р и м е р 3. Больная Р., 36 лет, поступила в стационар с жалобами на боли в суставах, в области сердца, недомогание, похудание, субфебрилитет, слабость. Данные клинического, лабораторного и инстру- ментального обследования не свидетельствовали с достаточной достоверностью в пользу активного ревматизма или СКВ.

Больная была обследована согласно предлагаемому способу, получены следующие результаты.

Связывающая способность 1 g G с пролином, г/л:

В крови больнойНормальная

0.60-0,10

Был установлен предварительный диагноз: СКВ. хроническое течение. 1 ст. активности с поражением сердца, суставов. РЭС. Спустя 2 месяца, после ОРЗ у больной повысилась температура до 38,2°С увеличились периферические лимфоузлы.

появилось припухание суставов кистей. При лабораторном обследовании обнаружены LE-клетки и антинуклеакрный фактор, что позволило окончательно подтвердить диагноз СКВ, назначить преднизолон 2 таблетки и 1 таблетку делагила на ночь.

Согласно предлагаемому способу было обследовано 25 больных ревматизмом и 32 больных СКВ. Полученные результаты были использованы для назначения патогенетической терапии и, тем самым, способствовали уменьшению частоты развития тяжелых осложнений и сокращению сроков пребывания больных в стационаре, что позволяет рекомендовать предлагаемый способ для широкого внедрения в практическое здравоохранение.

Таким образом, способ обладает следующими существенными преимуществами;

- более высокая точность по сравнению с прототипом (94,7% против 60%, ,01); - способ прост, не требует дорогостоящей аппаратуры и специально обученного персонала.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагности- ки системной красной волчанки и ревматизма, путем исследования крови, отличающийся темг что, с целью повышения точности способа, в сыворотке крови определяют уровень Ig G до и после инкубации с пролином и при его увеличении в шесть раз и более диагностируют системную красную волчанку, а яри увеличении менее чем в шесть раз - ревматизм.

Использование; медицина, ревматология. Цель изобретения - повышение точности способа. Сущность изобретения: в сыворотке крови определяют связывающую способность сывороточного иммуноглобулина G с пролином и при ее уровне 0,6 г/л и более диагностируют системную красную волчанку, а менее 0,6 г/л - ревматизм. 2 табл.

Связывающая способность I д G с пролином (г/л) у здоровых, больных ревматизмом и СКВ

Примечание: Р- достоверность изменений по сравнению со здоровыми. Pi - достоверность изменений по сравнению с ревматизмом.

Сопоставление точности предлагаемого способа и способа-прототипа

Редактор А,Вер

Техред М.Моргентал

Заказ 3844ТиражПодписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Таблица 1

Таблица 2

Корректор Н.Милюкова