Способ получения цефемовых соединений или их аддитивных солей с кислотами Советский патент 1993 года по МПК C07D501/06 C07D501/46 A61K31/545 

Изобретение относится к способу получения новых цефемовых соединений или их аддитивных солей с кислотами, которые обладают свойством антибиотика и могут найти применение в медицине для лечения инфекционных заболеваний, вызванных патогенными микроорганизмами.

Целью изобретения является получение новых антибиотиков ряда цефема, обла- дающих повышенной антимикробной активностью,

Примеры, приведенные ниже, иллюстрируют изобретение,

П р и м е р 1. Смесь N.N-диме тилформа- мида (0,41 мл) и 0,49 мл хлористого фосфо- рила в 2 мл этилацета перемешивают при охлаждении льдом в течение 30 мин, чтобы

приготовить реактив Вильсмайера. К указанному выше раствору при 0-5°С добавляют 1,02 г 2-(2-формамидотиазол-4- ил)-2-метоксииминоуксусной кислоты и смесь перемешивают при указанной температуре в течение 30 мин, чтобы получить активированный кислотный раствор. Этот активированный кислотный раствор добавляют в раствор 7-бетамино-3- 3-амино-2-(2- гидроксиэтил)-1-пиразолио -метил-3-цефем- 4-карбоксилата, тригидрохлорида (2г) и 5,85 г М-(-триметилсилил)ацетамида в 40 мл тетра гидрофура на при охлаждении льдом и затем смесь перемешивают при 10-15°С в течение 1 ч. Образовавшуюся смесь выливают в 500 мл диэтилового эфира и образовавшийся осадок собирают путем фильтрации,

VJ

00

VI

СП 00

Сл)

чтобы получить 7-бета 2-(2-формамидотиа- зол-4-ил)-2-метоксииминоацетамидо -3- 3- а ми но-2-(2-гидроксиэтил)-1-пиразол метил-З-цефем-4-карбоксилат, дигидрохло- рид, синизомер (2,55 г).

ИК-спектр (нуйол): 1770, 1660 .

ЯМР-спектр (пердэйтеродиметилсуль- фоксид), б : 3,30 (2Н. мультиплет), 3,68 (2Н, мультиплет), 3,92 (ЗН. синглет), 4,31 (2Н, мультиплет), 5,29 (1Н, дублет, J 5 Гц), 5,32 (2Н, мультиплет), 5,88 (1Н, дублеты, J 5 Гц и 8 Гц), 5,99 {1Н, дублет, J - 3 Гц), 7,48 (1Н, синглет), 8,12 (1Н, дублет, J 3 Гц), 8,59 (1Н, синглет), 9,81 (1Н, дублет, J 8 Гц).

Следующие вещества (примеры 2 и 3) получают по методике, аналогичной таковой в примере 1.

П р и м е р 2. 7-бёта-{2-{2-Аминотиазол- 4-ил)-2-метоксииминоацетамидоКИЗ-ами- но-2-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолио метил-3- цефем-4-карбоксилат, синизомер,

ИК-спектр (Нуйол): 3300, 1770, 1640 .

П р и м е р 3. 7-бета- 2-(2-аминотиазол- 4-ил)-2-(дифторметоксиимино)ацетамидо -3- 3-амино-2-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолио - метил-З-цефем-4-карбоксилат, синизомер. ИК пещфуйол): 3300, 1760,1660см4.

Пример 4. К раствору ди гидрохлорида 7-бета- 2-(2-формамидотиазол-4-ил)-2-мет- оксииминоацетамидо -3- 3-амино-2-(2-гид- роксиэтил)-1-пиразолио метил-3-цефем-4- карбоксилат (синизомер, 2,5 г) в метаноле (12,5мл) добавляют 0,88мл концентрированной хлористоводородной кислоты (0,88 мл) при комнатной температуре.

После перемешивания при той же самой температуре в течение 2 ч смесь выливают в этилацетат(500 мл) и образовавшийся осадок собирают путем фильтрации. Осадок растворяют в воде (100 мл) и подщелачивают до рН 2 водным раствором (5%) бикарбоната натрия. Этот раствор подвергают хроматографированию на колонке с макропористой неионной адсорбионной смолой Дайион Эйч-Пи-20 (торговый знак, производство фирмы Мицубиси Кемикал Индастриз). Целевое вещество элюируют 10%-ным диизопропиловым спиртом и дио- физируют, получая 0,43 г 7-бета- 2-(2-амино- тиазол-4-ил)-2-метоксииминоацетамидо -3- 3-амино-2-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолио}- метил-З-цефем-4-карбоксилата, синизомер (0,43 г).

ИК-спектр (нуйол): 3300, 1770,1640 см .

ЯМР-спектр (пердейтеродиметилсуль- фоксин) д : 3,00 и 3,30 (2Н, АВ-квартет, J « 18 Гц), 3,60 (2Н, мультиплет), 3,83 (ЗН, синглет), 4,37 (2Н, мультиплет), 5,06 (1Н, дублет, J 5 Гц), 5,18 (2Н, широкий синглет), 5,6 (1Н,

дублет, J 5 Гц и 8 Гц), 5,84 (1 Н, дублет, J 3 Гц), 6,71 (1Н, синглет), 7,18(2Н, широкий синглет), 7,38 (2Н, широкий синглет), 8,08 (1Н, дублет, J 3 Гц), 9,52 (1 Н, дублет J 8 Гц).

Следующее вещество (пример 5) получено по.методике, аналогичной примеру 4.

П р и м е р 5. 7-бета- 2-(2-аминотиазол- 4-ил)-2-(дифторметоксиимино)ацетамидо - 3- 3-амино-2-(2-гидроксиэтил)-1 -пираэолио

метил-З-цефем-4-карбоксилат, синизомер. ИК-спектр (нуйол): 3300,1760, 1660 . П р и м е р 6. В суспензию 7-бета- 2-(2- аминотиазол-4-ил)-2-(дифторметоксиимино) ацетамидо -3- 3-формамидо-2-(2-гидроксизтил)-1-пиразолио метил-3-цефем-4-карбок- силата, синизомер (0,7 г) в метаноле (3,5 мл) добавляют 0,42 мл концентрированной хлористоводородной кислоты при комнатной температуре. После перемешивания при

той же самой температуре в течение 2 ч смесь выливают в этилацетат. Образовавшийся осадок растворяют в воде и подщелачивают его до рН 2 с помощью 5%-го водного раствора бикарбоната натрия. Этот

раствор подвергают хроматографированию на колонке с макропористой неионной адсорбционной смолой Дайоин Эйч-Пи-20. Целевое вещество элюируют 10%-ным диизопропиловым спиртом и диофилизируют,

получая 0,41 г 7-бета- 2-(2-аминотиазол-4- ил)-2-(дифторметоксиимин.о)ацетамидо -3- 3-амино-2-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолио - метил-З-цефем-4-карбоксилат, синизомер. ИК-спектр (нуйол): 3300,1760, 1660см 1.

ЯМР-спектр (в тяжелой воде), д; 3,02 и 3,35 (2Н, АВ квартет, J 18 Гц), 3,78 (2Н, мультиплет), 4,28 (2Н, мультиплет), 4,95 и 5,16 (2Н, АВ квартет, J - 16 Гц), 5,16 (1Н, дублет, J 5 Гц), 6,86 (1Н, триплет, J 69 Гц),

7,16(1Н, синглет), 7,83 (1Н, дублет, J 3 Гц). Следующее вещество (пример 7) получено по методике, аналогичной примеру 6.

П р и м е р 7. 7-бета- 2-(2-аминотиазол- 4-ил)-2-метоксииминоацетамидо -3- 3-амино-2-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолио метил-3- цефем-4-карбоксилат, синизомер.

ИК-спектр (нуйол): 3300,1770, 1640 . П р и м е р 8. В раствор 6,5 г 7-бета-{2- (2-аминотиазол-4-ил)-4-метоксииминоацетамидо -3- 3-амино-2-{2-гидроксизтил)-1-пи- разолио метил-3-цёфем-4-карбоксилат, синизомер, в 6,5 мл воды добавляют 6,5 мл двухнормальной серной кислоты при комнатной температуре. Смесь перемешивают

при этой температуре, чтобы выпал кристаллический осадок, Эти кристаллы собирают путем фильтрации и промывают их ледяной водой и затем ацетоном, получая соль серной кислоты 7-бета- 2-(2-аминотиазол-4-ил)-2-метоксииминоэцетамидо -3- 3-амино-2-(2-гид роксиэтил)-1 -пиразол ио метил-3-цеф- ем-4-карбоксилат, синизомер (5,92 г).

ЯМР-спектр (пердейтеродиметилсуль- фоксил), (5: 3,13-3,83(2Н, мультиплет), 3,40- 3,83 (4Н, мультиплет), 5,15 (1Н, дублет, J 5 Гц), 5,05 и 5,30(2Н, АВ квартет, J 13 Гц), 5,79(1 Н, дублеты J 5 Гц и 8 Гц), 5,88 (1Н, дублет, J 3 Гц), 6,71 (1Н, синглет), 7,28 (2Н, широкий синглет), 7,95 (1 Н, дублет, J 3 Гц), 9,57 (1 Н, дублет J 8 Гц).

Следующие соединения (примеры 9-12) были получены по методике, описанной в примере 1. .

П р и м е р 9, 7-бета- 2-(2-формамидоти- лазол-4-ил)-2-метоксииминоацетамидо -3- 4- метил-3-амино-2-(2-гидроксиэтил)-1-пираз- олио -метил-3-цефем-4-карбоксилат, синизомер.

ИК-слектр (нуйол): 3150, 1770,1650 .

ЯМР-спектр (пердейтеродиметилсуль- фоксил). д: 1,94 (ЗН, синглет), 3,32 (2Н, широкий синглет), 3,52-3,68 (2Н, мультиплет), 3,88 (ЗН, синглет), 4,12-4,39 (2Н. мультиплет), 5,14, (2Н, широкий синглет), 5,29 (1 Н, дублет, J - 5 Гц), 5,82 (1Н, дублеты, J 5 Гц и 8 Гц), 7,36 (1 Н, синглет), 7,83 (1 Н, синглет), 8,47 (1 Н, синглет), 9,63 (1 Н, дублет, J 8 Гц).

Примерю. 7-бета- 2-(2-формамидо- тиазол-4-ил)-2-метоксииминоацетамидо -3-

3-ацетамидо-2-{ацетоксиэтил)-1-пиразолио - метил-З-цефем-4-карбоксилат, синизомер.

ИК-спектр (нуйол): 1780, 1660, 1550 .

ЯМР-спектр (пердейтеродиметилсуль- фоксид), д: 1,9.6(ЗН, синглет), 2,27(ЗН.син- глет), 3,2-3,6 (2Н, мультиплет), 3,87 (ЗН. синглет), 4,1-4,5 (4Н, мультиплет), 5,22 (1Н, дублет, J 5 Гц), 5,43 (2Н, синглет), 5,90.(1 Н, дублеты, J 8 Гц и 5 Гц), 7,00 (1Н. дублет, J 3 Гц), 7,33 (1 Н, синглет), 8,29 (1 Н, дублет, J 3 Гц), 8,43 (1 Н, синглет), 9,62 (1 Н, дублет, J 8T4).

П р и м е р 11. 7-бета-{2-(2-аминотиазол4-ил)-2-метоксииминоацетамидо -3- 4-мет- ил-3-амино-2-(2-гидроксиэтил)-1-пиразо- лио метил-З-цефем-4-карбоксилат, синизомер.

ИК-спектр (нуйол): 3300,1765,1660см - П р и м е р 12. 7-бета- 2-(2-аминотиазол- 4-ил)-2-метоксииминоацетамидоКНЗ-ацет- амидо-2-(2-гидроксиэтил)-1-пиразол тил-З-цефем-4-карбоксилат, синизомер.

ИК-спектр (нуйол): 3200, 1770, 1600 .

П р и м е р 13. 7-бета- 2-(2-аминотиазол- 4-ил)-2-метоксииминоацетамидо -3- 4-ме- тил-3-амино-2-(2-гидроксиэтил)-1-пиразо- лио -метил-3-цефем-4-карбоксилат, синизомер, получен по методике, аналогичной описанной е примере 4.

ИК-спектр (нуйол): 3300, 1765, 1660см

ЯМР-спектр (в тяжелой воде), д : 1,97 (ЗН, синглет), 3,06 и 3,37 (2Н, АВ-квартет, J 18 Гц), 3,37-3,93 (2Н, мультиплет), 3,98 (ЗН, синглет), 4,19-4,43 (2Н, синглет), 5,09 (2Н, широкий синглет), 5,19(1Н, дублет, J 5 Гц), 5,89 (1 Н, дублет, J 5 Гц). 6,96 (1 Н, синглет), 7,71 (1Н, синглет).

Пример 4. 7-бета- 2-(2-аминотиазол- 4-ил)-2-метоксииминоацетамидо -3- 3-ацет- змидо-2-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолио мет- ил-З-цефем-4-карбоксилат, синизомер был получен по методике, описанной в примере 6. Температура плавления 160°С (с разложением).

ИК-спектр (нуйол): 3200, 1770, 1600 см 1.

ЯМР-спектр(в тяжелой воде), 5:2,26(ЗН, синглет), 3,10 (1Н, дублет), J 18 Гц), 3.47 (1Н, дублет, J 18 Гц), 3,8-4,1 (4Н, мультиплет), 3,95 (ЗН, синглет), 5,20 (1Н, дублет, J 5 Гц), 5,32 (2Н, синглет), 5,77 (1Н, дублет, J 5 Гц), 6,93 (1 Н, дублет, J 3 Гц). 6,94 (1Н. синглет), 8,16 (1 Н, дублет, J 3 Гц).

Теперь для того, чтобы показать полезность целевых соединений способа по изобретению, проведены данные испытаний на МИК(минимальную ингибирующую концентрацию) характерного вещества (1) этого способа.

Метод испытания.

Противомикробную активность in vitro определяют методом двухкратного разбавления агаровой пластинки.

Одну петлю ночной культуры каждого испытуемого штамма в триптиказо-соевом бульоне (108 жизнеспособных клеток на 1 мл) наносят полосами на агар сердечного экстракта (Н1агар), содержащий постепенно изменяющиеся концентрации испытуемого вещества. Минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) выражают в единицах мкг/мл после выдерживания при 37°С в течение 20 ч.

Испытуемое вещество.

1) 7-бета- 2-(2-аминотиазол-4-ил)-2-ме- токсииминоацетамидо -3- 3-амино-2-(2-гид- роксиэтил)-1-пиразолио -метил-3-цефем-4-кар- боксилат, синизомер, вещество примера 4.

Результаты испытания представлены в табл.1.

Для терапевтического назначения целе- вое вещество (1) или его фармацевтически приемлемую соль используют в виде фармацевтического препарата, который содержит указанное вещество в качестве активного компонента, в смеси с фармацевтически приемлемыми носителями, такими как органическая или неорганическая твердая или жидкая среда для лекарства, которая пригодна для перорального, парэйтерального и экстериального назначения. Эти фармацевтические препараты могут быть в твердой форме, такой как таблетки, гранулы, порошок, капсулы, или в жидкой форме, такой как раствор, суспензия, сироп, эмульсия, ли- минад.

Если необходимо в указанные препараты могут быть включены вспомогательные соединения, стабилизирующие агенты, увлажняющие агенты и другие добавки, такие как лактоза, лимонная кислота, винная кислота, стеариновая кислота, стеарат магния, белая земля, сахароза, кукурузный крахмал, тальк, желатин, агар, пектин, масло земляного ореха, оливковое масло, масло какао, этиленгликоль.

Дозировка вещества (1) может изменяться и, кроме того, зависеть от возраста, состояния пациента, характера заболевания и самого типа активного вещества. Вообще пациенту в сутки можно назначать дозы между 1 мг и приблизительно 4000 мг или даже больше. Для лечения заболеваний, вызванных патогенными микроорганизмами, можно применять средние единичные дозы приблизительно 50, 100, 250, 500, 1000, 2000 мг целевого вещества настоящего изобретения.

Для подтверждения преимуществ целевых соединений способа данной заявки в сравнении с известными цефемовыми антибиотиками были проведены сравнительные испытания.

1} Метод испытания.

Антибактериальную активность ин вит- рл определяли с помощью метода двухкратного разбавления чашки с агаровой средой как это описано ниже,

Одну полную петлю культуры, выращенной в течение ночи, каждой испытуемой линии в триптиказа-соевом бульоне (10 жизнеспособных клеток в 1 мл) наносили на агар сердечного экстракта (Н1-агар), содержащий отградуированные концентрации ха- рактерного испытуемого соединения. Минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) выразили в единицах мкг/мл после инкубации при 37°С в течение 20 ч.

2) Испытуемое соединение.

Испытуемое соединение 1): 7 / - 2-{2- аминотиэзол-4-ил)-2-(дифторметоксиимино) - ацетамидо -3- 3-амино-2-(2-гидроксиэтио)-1- пиразолио -метил-3-цефем-4-карбокси- лат, синизомер.

Испытуемое соединение 2): (2- аминотиазол-4-ил)-2-метоксииминоацета- мидо -3- 4-метил-3-амино-2-(2-гидроксиэтил)1-пиразолио -метил-3-цефем-4-карбоксилат , синизомер (соединение примера 11).

Испытуемое соединение А): 7 fi (2- аминотиазол-4-ил)-2-(дифторметоксиимино) - ацетамидо -3-(3-амино-2-метил-1-пиразолио)- метил-З-цефем-4-карбоксилат, синизомер (соединение примера 67 Европейского патента № 0223246).

Испытуемое соединение Б): 7/3 (2- 0 аминотиазол-4-ил)-2-метоксииминоацетами- до}-3-(4-метил-3-амино-метил-1-пиразолио)- метил-З-цефем-4-карбоксилат, синизомер (соединение, примера 89 Европейского патента № 0223246).

5 3). Результаты испытаний представлены в табл.2.

Таким образом, соединения способа данного изобретения являются перспективными для создания лекарственных средств 0 с повышенной антимикробной активностью.

Формула изобретения

Способ получения цефемовых соединений формулыо

5

JjC-CON

RI S

N

VR,

ЦХ

. «гиф

coo© i R

I/

в виде синизомеров,

где RI и R4 независимо друг от друга - свободная или защищенная аминогруппа;

R2 - низший алкил или фторированный метил;

Нз-свободный или защищенный гидро- кси(низший)алкил;

RS- водород, или метил, или их аддитивные соли с кислотами, отличающийся тем, что соединение

формулыс р

©/-К 5

снаХЗ- Ч ;

tf-&f-{

tcoo:

w i

R3

где Нз. R4 и Rs имеют указанные значения,

в оиде кислотно-аддитивной соли егореак- ционноспособного производного, подвергают взаимодействию с реакционноспособным производным кислоты формулы

R

IS H

OR,

в виде синизомера,

где RI и R2 имеют указанные значения.

и выделяют целевой продукт в свободном виде или в виде аддитивной соли с кислотой или в целевом продукте или его аддитивной соли с кислотой, где RI и/или R4 - защищенная аминогруппа, и/или Нз - защищенный гидрокси(низший) алкил, удаляют защитную группу или группы с получением целевого продукта, где RI и/или R4 - свободная аминогруппа и/или Рз - свободный гидро- кси(низший) алкил, или его аддитивной соли с кислотой.

Приоритет по признакам:

14.09.87 при RI, Ra, R3 и R4 имеют указанные значения, Rg- водород.

28.06.88 при Ri, R2, Rs и R4 имеют указанные значения, RS - метил.

Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к получению цефемовых соединений ф- лы. . . N-тгС-СОШ N-ГГ V. о 0-R, соое Т . . ... Ч R3 в виде синизомеров, где RI и R независимо друг от друга - свободная или защищенная аминогруппа; R2- низший алкил или фторированный метил; Ra - свободный или защищенный гидрокси (низший) алкил; Rs-H, или метил, или их аддитивные соли с кислотами,которые обладают свойствами антибиотика. Цель - разработка способа получения более активных соединений. Получение ведут ацилированием кислотно- аддитивной соли реакционноспособного производного соответствующего цефемого соединения со свободной 7-аминОгруппой реакционноспособным производным соответствующей (2-замещенный тиазолил-4)- алкоксииминоуксусной кислоты. 2 табл. (Л С

Таблица 1

Таблица 2