СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ ЛИЗОЦИМОВ ИЗ СОДЕРЖАП1ЕГО ИХ СЫРЬЯ Советский патент 1966 года по МПК C12N9/36 

К группе лизопимов относятся бактернолнтические ферменты, которые разрушают бактерии, действуя на входящие в состав и.х клеточных стенок мукополнсахарнды.

Известны способы нолучення ферментных препаратов лнзоцнмов из содержащего их сырья, нанример белка куриного яйца, путем смешивания его с водой и последующей адсорбцни хитином.

Однако в сырье могут находиться и другнс белкн, способные сорбироваться на хитине в тех же условиях, в которых сорбируется лнзоцим. Это приводит к тому, что при совместном присутствии таких белков в сырье на хнтине сорбируется не один лизоцим, а беоТков, имеющих сродство к хитину, т. е. лизоцим, полученный по известному способу, содержит еще белковые примеси.

Предлагаемый способ обеспечивает получеinie ферментпых препаратов лизоцимов без белковых примесей.

Для этого ферментные препараты десорбпруют дистиллироваппой водой. Процесс адсорбции хитином следует проводнть путем пропуска раствора сырья или экстракта его через слой хитнна в присутствии NaCl с концентрацией 0,5-1,0о/о при рП 5,5.

и продуктов частичного гидролиза хнтипа - олигасахарпдок (если они есть) целесообразно провести повторную адсорбцию раствора ферментного препарата лизоцима хитином с последующей десорбцией его 0,5-l.OVo-иым раствором уксусной кислоты. При этом повторную адсорбцию рекомендуется проводить р. присутствии 0.1 М натрий- или калийфосфатного буфера при рН 7,9-8,0. Pereiiepnpoвать ХИТИ1; после десорбции ферментного препарата лнзоцпмов днстиллироващюй водой (т. е. после первой стадии) целесообразно 2- 5Vo-)ibiM раствором уксусно : кчслотьт. После второй стадии хитнь регенерируется автоматнческн при десорбции лнзонимог. 0,,Г.ОЙ уксусной КНСЛОТО.

Предлагаемый способ заключается г, следующем.

Через колонку, наполненную хитином с размером частиц 50-250 мк и уравновен1енную с 0,5-1,0 /о-ным раствором XaCl в дистиллированной воде, пропускают исходный вод)юсолевой раствор сырья, содерл ащнй лнзоцнм в CN;CCH с сопутствуюпи1ми . Псход 1ЫП раствор должен содержать NaCl в концентрации не менее 0,5-КОт/,, н иметь рН 5.5. В этнх условиях лизоцнм целиком сорбируется на х)ггине н задерживается на колонке, в то время как примеси проходят через колонку, не задержнваясь. Загем через колонку