Способ приготовления плоскостных препаратов эндотелия сосудов Советский патент 1993 года по МПК G01N1/28 

Изобретение относится к медицине, преимущественно к нормальной и патологической морфологии.

Целью изобретения является расширение возможности способа за счет приготовления препаратов сосудов малого диаметра, что достигается тем, что вскрытие просвета производят срезанием образца в плоскости оси сосуда, при этом, образец предварительно обезвоживают, высушивают на воздухе и укрепляют на подложке, а затем

инкубируют его в смеси спирта с эфиром и абсолютного спирта.

Способ осуществляют следующим образом.

В экспериментах на новорожденных крысятах под внутримышечным нембуталовым наркозом (40 мг/мг веса) сосудистое русло перфузируют средой 199 в течение 1,5 мин (для отмывки сосудистого русла от форменных элементов крови), фиксируют в 2.5% растворе глутароврго альдегида в те00

о

ю

OJ

ю

чение 5 мин и затем иссекают инфрареналь- ный участок брюшной аорты (диаметр не более 1 мм). Образец после дегидратации в спиртах восходящей концентрации высушивают на воздухе, укрепляют на подложке с помощью клея и срезают под микроскопом лезвием вдоль оси сосуда. После этого срезанный образец инкубируют в смеси этано- ла и эфира (1:1) в течение 5 мин и абсолютного спирта в течение 5 мин. Затем эндотелий отделяют с помощью целлоидиновой пленки и укрепляют на желатинизи- рованном стекле. После удаления целлоидина препараты окрашивают гема- токсилином и исследуют в микроскопе МБИ-15.

Пример. В 12 экспериментах на новорожденных крысятах под внутримышечным нембуталовым наркозом (40 мг/кг веса) сосудистое русло перфузировалось средой 199 в течение 1,5 мин (для отмывки сосудистого русла от форменных элементов крови), фиксировалось в 2,5%-ном растворе глутарового альдегида в течение 5 мин и затем иссекался инфраренальный участок брюшной аорты (диаметр не более 1 мм). Образец после дегидратации в спиртах восходящей концентрации высушивался на воздухе, укреплялся на подложке (с помощью клея) и срезался под микроскопом

0

5

0

5

0

образец лезвием вдоль оси сосуда. После этого срезанный образец инкубировался в смеси этанола и эфира (1:1) в течение 5 мин и абсолютном спирте в течение 5 мин. Затем эндотелий отделялся с помощью целлоидиновой пленки и укреплялся на желатинизи- рованном стекле. После удаления целлоидина препараты окрашивались гема- токсилином и исследовались в микроскопе МБИ-15.

Применение предложенного способа перспективно при изучении развития сосудов малого диаметра, при изучении влияния микрохирургических вмешательств на морфологию сосудистой стенки.

Формула изобретения Способ приготовления плоскостных препаратов эндотелия сосудов, включающий вскрытие просвета, обезвоживание, отделение эндотелия с последующей окраской, отличающийся тем, что, с целью расширения возможностей способа за счет приготовления препаратов сосудов малого диаметра, вскрытие просвета производят срезанием образца в плоскости оси сосуда, при этом образец предварительно обезвоживают, высушивают на воздухе и укрепляют на подложке, а затем инкубируют его в смеси спирта с эфиром и абсолютного спирта.

Изобретение относится к морфологии и позволяет повысить эндотелиоциты в стенке магистральных сосудов малого диаметра. Цель - расширение возможностей способа за счет приготовления препаратов сосудов малого диаметра. В экспериментах на новорожденных крысятах под внутримышечным нембуталовым наркозом (40 мг/г веса) сосудистое русло перфузируют средой 199 в течение 1,5 мин (для отмывки сосудистого русла от форменных элементов крови), фиксируют в 2,5%-ном растворе глутзрово- го альдегида в течение 5 мин и затем иссекают инфраренальный участок брюшной аорты (диаметр не более 1 мм). Образец после дегидратации в спиртах восходящей концентрации высушивают на воздухе, укрепляют на подложке (с помощью клея) и срезают под микроскопом лезвием вдоль оси сосуда. После этого срезанный образец инкубируют в смеси этанола и эфира (1:1) в течение 5 мин и абсолютном спирте в течение 5 мин. Затем эндотелий отделяют с помощью целлоидиновой пленки и укрепляют на желатинизированном стекле. После удаления целлоидина препараты окрашивают гематоксилином и исследуют в микроскопе МБИ-15, Применение способа перспективно при изучении развития сосудов, патологических процессов магистральных сосудов малого диаметра, при изучении влияния микрохирургических вмешательств на морфологию сосудистой стенки.