Способ получения коррозионных анатоми-чЕСКиХ пРЕпАРАТОВ для элЕКТРОННОй МиКРО-СКОпии Советский патент 1981 года по МПК G01N33/48 H01J37/20 

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОРРОЗИОННЫХ АНАТОМИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ

1

Изобретение относится к медицине, а именно анатомии, и может быть использовано для изучения; рельефа стенок сосудистого русла и других полостей организма в условиях нормы и патологии.

Известен способ получения коррозионных анатомических препаратов для электронной микро.скопии, включающий введение в сосудистое русло полимера с последующей его полимеризацией и коррозией сосудистых тканей 1J.

Однако известный способ не позволяет выявить все структуры сосудистого русла и получить качественные препараты.

Цель изобретения - выявление всех структур сосудистого русла и получение качественных препаратов.

Поставленная цель достигается тем, что в способе, получения коррозионных анатомических препаратов для электронной микроскопии, включающем введение в сосудистое русло полимера с последующей его полимеризацией и коррозией сосудистых тканей, перед введением полимера в сосудистое русло вводят 0,3-0,5%-ный раствор глютарового альдегида на 5-10 мин и 0,2-0,5°/о-ный

раствор нитрата серебра, причем в качестве полимера используют олигоэфир метакриловой кислоты, а полимеризацию проводят при температуре от 10 до 25°С в течение от 48 до 72 ч.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

Пример. У морской, свинки под нембуталовым наркозом вскрывают брющную полость и канюлируют брющную аорту. Сосудистую систему животного промывают полигликоном при температуре 37°С под давлением 90 мм рт.ст. против тока крови в течение 5 мин до полной отмывки крови. Сразу после этого животное начинают промывать 0,4%-ным раствором глютаральдегида, приготовленном на 0,1 М фосфатном буфере с добавлением сахарозы и 2% декстрана таким образом, чтобы осмотичность фиксатора была в пределах 320-350 мосм/л, затем вводят 0,2-0,5°/о-ный раствор AgNO. После 3-минутной фиксации под давлением 90 мм рт.ст. указанным раствором в сосудистое русло вводят олигомер смолы ТГМ-3 (ненасыщенный эфир метакриловой кислоты и триэтиленгликоля) с добавлением 1°/о

перекиси бензоила. Вскрытие сосуды перевязывают и животное целиком погружают в сосуд, заполненный 3%-ным раствором глютаральдегида на 0,1 М фосфатном буфере, и в котором с помощью холодильника поддерживают температуру 15°С. Через 48 ч у крысы удаляют легкие, погружают в 20%ный раствор КОН при 40°С. После растворения тканей (обычно через 7 дней).полученный сосудистый слепок промывают в дистиллированной воде при 40-50°С и обрабатывают сначала в растворе, содержащем 3% глицина, глютамата натрия и 2% сахарозы, в течение 24 ч, затем в 2/о-ном растворе танниновой кислоты в течение 24 ч и наконец в 2% -ном растворе четырехокиси осмия в течение 8 ч. После высущивания образцы исследуют под сканирующим электронным микроскопом РЭМ-200.

Предлагаемый способ позволяет получить качественные препараты и выявить все структуры сосудистого русла.

Способ может быть использован для изучения изменений поверхности сосудов и других полостей организма при различных заболеваниях, что позволяет расширить многие патогенетические звенья этих страданий.

Формула изобретения Способ получения коррозионных анатомических препаратов для электронной микроскопии, включающий введение в сосудистое русло полимера с последующей его полимеризацией и коррозией сосудистых тканей, отличающийся тем, что, с целью выявления всех структур сосудистого русла и получения качественных препаратов, перед введением полимера в сосудистое русло вводят 0,3--0,5°/о-ный раствор глютарового альдегида на 5-10 мин и 0,2-0,5%-ный раствор нитрата серебра, причем в качестве полимера используют олигоэфир метакриловой кислоты, а полимеризацию проводят при температуре от 10 до 25°С в течение от 48 до 72 ч.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Nowell J, A.Panglokn Л.,Ту1е1 W,S. Scannind Electron Microsco/jy of the avian lung.Jn: SEM/1970. Proceedinds of the third ahhual SEM Symposium IITRI, Chigago, Sllinois,USA, p. 249-259..