Способ моделирования структурной организации кожи для изучения гистогенеза волос Советский патент 1993 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицины, а именно к экспериментальной трансплантологии.

Цель изобретения - повышение физии- логичности модели. Поставленная цель достигается тем, что при создании способа моделирования структурной организации кожи для изучения условий вточного гистогенеза волос путем совместной трансплантации эпидермиса и одного из структурных элементов дермы, отличительным моментом является то, что в качестве компонента дермы используется ее коллагеновый каркас, полученный предварительно путем обработки полнослойного кожного лоскута 2%-м раствором углекислого натрия в течение 1-2 сут. с его последующей промывкой. Благодаря наличию отличительных от прототипа и известных аналогов признаков, а именно: использование в качестве одного из элементов дермы ее коллагенового каркаса (а не волосяных сосочков), получаемого путем предварительной обработки кожного лоскута, заявляемая модель обеспечивает достижение положительного эффекта, выраженного в виде цели изобретения, а именно - повышение физиологичности модели за счет обеспечения врастания кератиноцитов межфолликулярного эпидермиса половоз- релах животных в волосяные сумки дермы.

Изобретение осуществляется следующим образом.:

Предварительно под эфирным наркозом забивают крысу массой 180 г. С живота забирают полнослойный кожный лоскут, размером 4 х б см и пришивают его край к стеклянной рамке. Затем лоскут помещают на сутки в 2%-ный раствор углекислого натрия. Через сутки с поверхности лоскута удаляют эпидермис и шерсть (с помощью пинцетов), а также избыток клетчатки (с помощью ножниц). Затем лоскут (дермальный

ел

с

со

О

оо ю

СО

слой кожи) промывают в проточной воде под краном в течение 3 ч и 1 ч выдерживают в дистиллированной воде. После промывки лоскут помещают в 0,3%-ный раствор формалина в смеси изотонического раствора хлорида натрия и глицерина, находящихся в объемном отношении 3:1, где хранят 2 сут. Затем берут новую крысу самку массой 210 г. У нее известным способом в межлопаточной области формируют полнослойный кожный дефект, являющийся в дальнейшем рецептивным ложем. Из подготовленного ранее коллагенового каркаса дермы вырезают участок размером 1 х 1,5 см и его укладывают на поверхность клетчатки в продольном направлении нижней стороной вниз. Сверху укладывают один слой марли и сухой марлевый тампон. На камеру, предохраняющую рецептивное ложе, надевают перфорированную крышечку. Через сутки на поверхность рецептивного ложа с находящимся на нем участком коллагеново/0| каркаса дермы (после удаления тампона и: марлечки) известным способом транспантируют межфолликулярный эпидермис с правого бока этой же крысы. На трансплантат укладывают один слой марли и сухой марлевый тампон. Сверху на основание предохранительной камеры надевают перфорированную крышечку. В дальнейшем, через каждые 2-3 сут. тампон аккуратно меняют на новый, марлечку при этом не смещают. Через 9 сут. крысу забивают под эфирным наркозом и гистологически изучают строение рецептивного ложа, коллагенового каркаса дермы и эпидермиса. Обнаруживают,

.что кератиноциты межфолликулярного эпидермиса систематически заполняют волосяные сумки коллагенового каркаса дермы. Между коллагеновыми волокнами эквивалента дермы обнаруживают кровеносные сосуды, фибробласты и гематогенные клеточные элементы, проникающие сюда со стороны поверхности рецептивного ложа. Таким образом, использование в качестве эквивалента дермы ее коллагенового каркаса, получаемого путем предварительной обработки кожного лоскута, включающей взятие полнослойного кожного лоскута, помещение его в щелочную среду, механмческое удаление эпидермиса, его производных и избытка клетчатки, промывку и фиксацию, обеспечивает в сравнении с известными моделями вторичное заполнение кератиноцитами межфолликулярного эпидермиса половозрелых животных волосяных сумок дермы,

Формул а изо бретени я Способ моделирования структурной ор-:

ганизации кожи для изучения гистогенеза волос путем трансплантации эпидермиса и структурных компонентов дермы, о т л и ч а- ю щ и и с я тем, что, с целью повышения: физиологичности модели за счет обеспечения врастания кератиноцитов в волосяные сумки, в качестве структурного компонента дермы используют ее коллагеновый каркас, полученный предварительно путем обработки послойного кожного лоскута 2%-ным

раствором углекислого натрия в течение 1-2 сут с его последующей промывкой.

Использование: в экспериментальной биологии и медицине и может применяться при создании моделей, позволяющих изучать гистогенетические потенции различных групп клеток и тканей. Сущность изобретения: проводят трансплантацию эпидермиса и структурных компонентов дермы, при этом в качестве структурного ком- понента дермы используют ее коллагеновый каркас, полученный предварительно путем обработки послойного кожного лоскута 2%-ным раствором углекислого натрия в течение 1-2 сут с его последующей промывкой. Способ позволяет повысить физиологичность модели за счет обеспечения врастания кератиноцитов в волосяные сумки.