пор, пока больше нельзя наблюдать выделение газа (около 2,5 ч). Она здесь охлаждается, отгоняются 5 мл толуола, и к раствору rio каплям добавляются 4,6 мл 3-метоксипро- пиламина и 5 мл триэтиламина. После перемешивания раствора при комнатной температуре в течение 4 часов он упаривается, остаток вносится в воду и 4 раза экстрагируется метиленхлоридом. Объединенные органические фазы высушиваются над сульфатом в магния и упариваются. Сырой (неочищенный) продукт хроматографируется на силикагеле (растворитель этилацетат).
Выход 4,3 г масло 1Н-ЯМР (СДС)з: 5 1,6-2.3 (4Н, м); 3,2-3,8 (14Н, м); 7.8-8,0 (1Н, м); 8,3-8,5 (1Н. м); 8,6-8,8 (1Н. м).
П р и м е р 2, Пиридин-2,4-дикарбоно- вая кислота-бис-М,М-(этоксипропилл)-амид.
Пропись смотрите в примере 1:.амино- компонента, этоксипропиламин;
Выход: 4,5 температура плавления: 46- 48°С.
Н-ЯМРССДСОз: ,3(6Н); 1.7-21 (4Н,м); 3,3-3,8 (12Н. м); 7,8-8.0 (1Н. м); 8.4-8,5 (1 Н,м); 8,5-8,8 (1Н,м).
Пример 3. Пиридин-2,4-дикарбо- новая кислота-бис-М,М-(2-диметоксиэ- тил)амид.
Прогтись смотрите в примере 1.
Амино-компонента: 2-диметоксиэтила- мин;
Выход: 1,6 г (из 3 г пиридин-2.4-дикар- боновой кислоты), масло.
1Н-ЯМР(СДС1з): (53,4(1 2 Н, s);3,7(4H.м); 4,5 (2Н, м); 7,9-8,0 (1Н, м); 8,4-8,5 (1Н, м); 8,7-8,8 (1 Н, м).
Пример 4. Пиридин-2,4-дикарбоно- вая кислота-бис-М,К|-(2-метоксиизопро- пил)амид.
Пропись в примере 1:
Амино-компонента: 2-метоксиизопро- пиламин.
Выход: 3,3 г (из 3 г пиридин-2,4-дикар- боновой кислоты), масло.
1Н-ЯМР -(): (5 1,3(6Н,d); 3,2(6Н, с); 3,5 (4Н, d); 4,4 (2Н, м); 7,9-8,0 (1Н, м): 8,4-8,5 (1Н, м); 8,7-8,8 (1Н. м);
При м е р 5. Пиридин-2,4-дикарбоно- вая кислота-бис-М,М-(2-этоксиэтил)амид
Пропись в примере 1.
Амино-компонента: этоксиэтиламин.
Выход 7,8 г (из 10 г пиридин-2,4-дикар- боновой кислоты). Температура плавления: 42-44°С.
1Н-ЯМР (): с5 1,2 (ЗН, tr); 3,3-3.8 (12Н, qu и м); 7,9 (1Н, м); 8.4-8,5 (1Н, м): 8,7-8,8 (1Н,м).
П р и м е р б. Пиридин-2,4-дикарбоно- вая кислота-бис-М -(3-гидроксипро- пил)амид.
0,5 г пиридин-2,4-дикарбоновая кисло- та-бис-М,М-(3-метоксипропил)амида растворяются в 10 мл дихлорметана, и при -78°С по каплям добавляется трибромид бора (11 мл, 1-молярный раствор в дихлорметане). После окончания внесения трибромида бо- ра раствор оставляют нагреваться до комнатной температуры и в течение 3 ч перемешивают. Затем его вносят (вливают) в 100 мл насыщенного раствора бикарбоната и трижды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы высушиваются над сульфатом магния и ynapi ваются. Неочищенный (сырой) продукт хроматографируется на силикагеле.
Выход: 0,45 г масло,
1Н-ЯМР (): d 1,5-2.2 (4Н, м); 3,4 (4Н, м); 3,6 (4Н, м); 7.9-8,0 (1Н, м); 8,4-8,5 (1Н. м); 8,7-8,8 (1Н, м).
Пример 7а. Дибензиловый эфир пиридин-2,4-дикарбоновой кислоты 30 г пи- ридин-2,4 дикарбоновой кислоты аналогично тому, как это описано в примере 1, в присутствии 30 мл тионилхлорида превращаются в хлорид кислоты и вступают в реакцию с 43,8 г бензилового спирта. Продукт перекристаллизовывается из дии- зопропилового эфира. Выход 42.1 г.
Температура плавления, 63-65°С. П р и м е р 76. 4-Бензиловый эфир пиридин-2,4-дикарбоновойкислоты. 40гди- бензилового эфира пиридин-2,4-дикарбоно- вой кислоты из примера 7а вносятся .в суспензию 27,8 г нитрата меди (1) в 700 мл метанола. Смесь втечениечаса кипятится под флегмой и после охлаждения отфильтровывается от комплекса меди. Комплекс суспендируется в диоксан, и добавляется сероуглерод. Выпавший сульфид меди отфильтровывается, и органическая фаза упаривается. Продукт перемешивается в петролейным эфиром. Выход: 25:3 г
Температура плавления 113-115°С П рим ер 7с. 2-(3-Метоксипро- пил амид-4-бензиловый эфир пиридин-2,4- дикарбоновой кислоты.
3,9 г 4-бензилового эфира пиридин-2,4- дикарбоновой кислоты из примера 76 аналогично тому, как это описано в примере 1, в присутствии 1,2 мл тионилхлорида пре- вращаются в хлорид кислоты и вступают в реакцию с 3-метоксипропиламином с образованием амида. Продукт для очистки хроматографируется на силикагеле смесью цйклогексзн-этилацетат (1:1).
Выход: 4,3 г масло
Пример 7д. 2-(3-Метоксипропил)амид пиридин-2,4-дикарбоновой кислоты.
4,3 г соединения из примера 7с растворяются в 100 мл диоксана и гидрируются с 500 мл палладий/ угле(10%)- катализатора при нормальном давлении в течение 4 часов. По окончании поглощения водорода смесь отсасывается от катализатора, и растворитель отгоняется.
Выход 3,5 г.
Температура плавления, 124-126°С.
Пример 7е. 2-(3-Метоксипропил}- амид-4-(2-метоксиэтйл)амид пиридин-2,4- дикарбоновой кислоты.
Согласно примеру 1, 1,8 г соединения из примера 7д в присутствии 0.6 мл тионил- хлорида превращаются в хлорид кислоты и после этого вводятся в реакцию с 2-меток- сиэтиламином. Продукт для очистки хрома- тографируется на силикагеле смесью дихлорметан/метанол (20:1).
Выход 1,0 г. масло
Н-ЯМР (СДС1з): 5 1,9-2,0 (2Н, qul); 3,4 (6Н, s); 3,5-3,7 (8Н,м); 6.9 (1Н, s, br); 8,0 (1Н, dd); 8.4 (1Н, s. br): 8,55 (1Н, s); 8,7 (1Н, d).
Пример 8. 2-{2-Метоксиэтил)амид-4- (З-метоксипропил)амид пиридин-2,4-дикар- боновой кислоты.
Аналогично примерам 7 а-е: согласно примеру 8 получается соединение в результате того, что на этапе примера 7с используется 2-метоусиэтиламин, а на этапе примера 7е используется 3-метоксипропи- ламин.
Температура плавления, 69-72°С.
1Н-ЯМР (): 5 1,9-2,0 - (2Н, gui), 3,4 (ЗН, s); 3,45(ЗН, s), 3,6-3,7 (8Н, м); 7,4 (1Н/ br); 7,9 (1Н, dd); 8,3 (1Н, dr); 8,4 (1H,d); 8.7 (1Н, d).
Исследования фармакологической активности.
а) Энтеральная всасываемость.
Женским особям крыс, масса которых составлял около 150 г через пищевод (инт- рагастрально), посредством глотательного зонда, вводится подлежащее испытанию вещество в количестве 50 мг/кг, Через 5,10, 1.5. 30. 60, 120, 180, 240 минут 4 крысы усып- ляются, и из вены у них берется кровь, Кровь тотчас же центрифугируется, и введенное соединение экстрагируется из сыворотки эфиром. После упаривания эфира остаток вносится в 100 мл жидкости (текучего сред- ства). Жидкость состоит из 0,05 М фосфорной кислоты и ацетонитрила (4:1). Из этой пробы 50 мкл впрыскиваются на HPLC-ко- лонку. Определение проводится при УФ 200
нм и времени удерживания 2,2 минуты. Результаты приведены в табл. 1. В табл. 1:
1- время (мин)
2- вещество из примера 1
3- вещество из примера 2
4- вещество из примера 3
х - среднее значение из 4 измерений SD - стандартное отклонение NWG ниже предела обнаружения, б) Фармакологическая эффективность. Для доказательства эффективного торможения пролин- и лизин-гидроксилазы посредством соединений 1 измерялись концентрации гидроксипролина в печени концентрации 7s - (IV) - коллагена в сыворотке.
а)крыс, не подвергшихся обработке (контрольные);
б)крыс, которым вводился четыреххло- ристый углерод (C.CU - контроль);
с) крыс, которым вводился прежде всего CCU, а затем вводилось предлагаемое по изобретению соединение.
Действующая сила соединений определялась как процентное торможение синтеза гидроксипролина в печени и синтеза 7s - (IV) - коллагена в сыворотке, после введения их (соединений) через рот, по сравнению с контрольными животными, которым вводился только четыреххлористый углерод (ССЦ-контроль). Результаты приводятся в табл. 2.
В.табл. 2 представлены также, как вещества сравнения, соединения из примеров 2 и 3 заявки ФРГ ДЕ-А 3703959 М,М1-бис(2-метоксиэтил)-диа- мид пиридин-2,4-дикарбоновой кислоты и М,М-бис(3-изопропоксипропил)-диамид- пиридин-2,4-дикарбоновой кислоты. Неожиданно, соединения I показывают лучшую эффективность уже даже при оральном (через рот) вводе, чем соединение из примера 2 заявки ФРГ ДЕ-А 3703059, вводимое подкожно.
Формула изобретения Способ получения диамидов N.Nбйс(алкоксиалкил)-пиридин-2,4-дикарбоно вой кислоты общей формулы
CONH-(fV)-(OR2)n
fHi
CONH-(RiHOR2V
где Ri - линейный или разветвленный Ci- С -алкандиил;
R2 - неразветвленный Cr-C-q-алкил или водород, п 1 или 2,
за исключением соединений, где R.i - этил, R2 - метил или водород и п « 1,. отл и. чающийся тем, что пиридин-2,4- дикарбоновую кислоту смешивают с по крайней мере двумя эквивалентами галоге- нирующего средства, в по крайней мере два эквивалента алкоксиалкиламина общей формулы
H2N-(Rl)-(OR2)n,
где Ri, R2 и п - имеют указанные значения,
растворяют в растворителе и оба раствора вводят в реакцию взаимодействия, полученный диамил М.Г -бифлкоксиалкил}- пиридин-2,4-дикарбоновой кислоты выделяют или переводят в диамид М,М1-бис- (гидроксиалкил)пиридин-2,4-дикарбоновой кислоты.
Сывороточные показатели соединений из примеров 1-3 после приема дозы 50 мг/кг (ввод-оральный)
Таблица 1
Та бл ииа 2
Г
