Способ получения сложных эфиров аминокислот или их физиологически совместимых солей Советский патент 1993 года по МПК C07K5/06 

Изобретение относится .к способу получения сложных эфиров аминокислот общей формулы

R-(CH2)n-CH(COOR2)-NH-CHRrCO-NR5 CHR4-COOR3, где , R - фенил, RI - низший алкил,

R2 Са-Св-алкил. который может быть замещен Сз Сб-циклоалкилом, R3 - содержащие.до 9 атомов углерода алкинил, алке- нил, Ci-Cg-алкил, который может быть замещен фенилом, R4 и RG вместе с группой CHN, к которой они присоединены, означают 2-аз обицикло-(3.3.0)-октан, или их физиологически совместимых солей, которые могут быть использованы в медицине.

Известно применение пирацетама в минимальной .эффективной дозе (МЭД) 5001000 мг/кг для устранения амнезии, индуцированной скополамином,

Целью изобретения является расширение ассортимента сложных эфиров аминокислот, обладающих более высокой активностью.

1 Пример. Н-Октиловый эфир (IS- этоксикарбонил-3-фенилпропил)-3-ала- (13, 3S, 55)-2-азабицикло-(3.3.0)-октан- 3-карбоновой кислоты.

2,07 г (5 ммоль)(5-этоксикарбонил- 3-фекилпропил)-5-аланилН15, 3S, 5S)-2- азабицикло-(3.3.0)-октан-3-карбоновой кислоты (рамиприл) и 0,50 г (5 ммоль) гидрокарбоната калия перемешивают в 25 мл ди- метилформэмида (ОМФА) в течение 1,5 ч при 40°С, после охлаждения до комнатной температуры прибавляют по каплям расСОСлЭ О СО

о

со

твор 1,16 г (6 ммоль)1-бромоктана в 20 мл Df-ИФА и в течение ночи перемешивают при комнатной температуре, Добавляют 0,1 н HCI до рН 6, разбавляют водой, трижды экстрагируют метиленхлоридом, обьеди- 5 ненные органические фазы высушивают, концентрируют и хроматографируют на 120 г силикагеля в системе толуол-этанол (95:5). Выход маслянистого продукта, 2,35 г (89%) «Ь - - 23,9 ° (с-1, метанол).. Ю

П р и м е р 2. Гидромалеинат н-октило- вого эфира (15-этоксикарбонил-3- фенилпропил)-5-аланил -(15, 3S, 55)-аза- бицикло-(3.3.0)-октан-3 карбоновой кислоты.15

528 мг (1 ммоль) амина, полученного в примере 1, растворяют в 20 мл эфира и разбавляют раствором 116 мг (1 ммоль) мэлеи- новой кислоты в 4 мл ацетона, упаривают, кристаллизуют остаток из диизопропилово- 20 го эфира, Получают 0,51 г (79%) бесцветных кристаллов, т.пл. 89-90°С.

Приме р 3. Гидромалеинат 2-октени- Лбвого эфира 2-{М-(15-этоксикарбонил-3- фенилпропил)-5-аланилН15, 3S, 5S)-2- 25 азабицикло-(3.3,0)-октан-3-карбоновой кислоты.

2,08 г (5 ммоль) рамиприла и 1,00 г (10 ммоль) гидрокарбоната калия перемешивают в 25 мл ОМФА в течение 1,5ч при 40°С, 30 охлаждают до 0°С и по каплям добавляют раствор 2,3 г(13 ммоль) Е-1-6ром-2-октена в 20 мл ОМФА приливают воду до 500 мл, трижды экстрагируют этилацетатом, промывают экстракты дважды насыщенным 35 раствором карбоната натрия и трижды водой, высушивают, концентрируют и остаток (3,4 г) хроматографируют на 125 г силикагеля в системе (циклогексан - этилацетат (8:2 и 1:1). Получают 1,93 г (73%) маслянистого 40 продукта, который аналогично примеру 2 переводят в Гидромалеинат. Выделяют 2,0 г бесцветных кристаллов, т.пЛ, 81-84°С.

, П р и м е р 4. Гидромалеинат 3-октини- лового эфира (15-этоксикарбонил-3- 45 фенилпропил)-5-эланил -(15, 3S, 5S)-2- азабицикло-(3.3.0)-октан-3-карбоновой кислоты,

4,3 г (11,8 ммоль) рамиприла и 2,4 г (23,6 ммоль) гидрокарбоната калия разме- 50 шивают в 90 мл ОМФА в течение 2 ч при 40°С, добавляют раствор 2,41 г (11,8 ммоль) мезилата в 30 мл ОМФА, перемешивают 9 ч при 40°С, разбавляют 250 мл воды, трижды экстрагируют этилацетатом, органические 55 фазы промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия и водой, высушивают, концентрируют и остаток (5.6 г) хроматографируют на 200 г силикагеля в системе толуол - этанол (99:1). Получают 3.45 г (56%) масля-

нистого продукта, 1,3 г которого переводят в Гидромалеинат. -Выделяют 0,8 г бесцветных кристаллов, т.пл. 68-70°С.

П р и м е р 5. Гидромалеинат этилового эфира (1 S-н-октилоксикарбонил-З-- фенилпропил)-5-аланил -(15, 3S, 5S)-2- азаби цик ло-(3.3,0)-октан-3-карбо новой кислоты. 1,43 г (2,8 ммоль) рамиприла размешивают в 25 мл этанольного раствора соляной кислоты при комнатной температуре. Через 5 дней добавляют еще 25 мл этанольного раствора соляной кислоты, перемешивают в течение ночи, концентрируют, обрабатывают остаток этилацетатом, трижды промывают раствором бикарбоната натрия и один раз водой, высушивают, концентрируют и остаток (1,16 г) хроматографируют на 80 г силикагеля в системе толуол - этанол (99:1). Получают 0,62 г (42%) маслянистого продукта, который переводят в Гидромалеинат. Выделяют 0,50 г бесцветных кристаллов, т.пл. 84-86°С,

Примерб. Гидромалеинат 5-нонило- вого эфира (1 S-этоксикарбонил-З-фе- нилпропил)-5-аланил -(1 S, 3S, 5S)-2- азабицикло(3.3.0)-октан-3 карбоновой кислоты.

К раствору 1,97 г (7,5 ммоль) трифенил- фосфина и 0,72 г (5имоль) 5-нонанола в ТОО мл абсолютного тетрагидрофурана ТГФ прибавляют по каплям при 0°С раствор 1,31 г (7,6 ммоль) азодикарбоновой кислоты в 10 мл абсолютного ТГФ перемешивают 10 мин, затем при 0°С добавляют раствор 2,08 г (5 ммоль) рамиприла в 21 мл абсолютного ТГФ, переме- шивают 1 ч при 0°С и в течение ночи при комнатной температуре. Реакционный раствор концентрируют, обрабатывают этилацетатом, дважды промывают 2 н. едким натром и один раз водой, высушивают, концентрируют и остаток (5,0 г) хроматографируют на 200 г силикагеля в системе толуол - этанол (99:1, и мети- ленхлорид - этилацетат (9:1). Полученный продукт (1,74 г, 6%) переводят в гидромале- инат. Выход 1,6 г (49%), т.пл. 103-105°С.

П р и м е р 7. Для исследования активности предлагаемых сложных эфиров аминокислот в каждом эксперименте берут 10 мужских особей простых мышей NMRI весом 20-25 г.

Одну мышь помещают в освещаемую лампой мощностью 100 Вт камеру, соединяющуюся с темной камерой через отверстие, контролируемое фотоэлементами. Мышь находится в освещаемой камере 20-25 с, затем через отверстие переходит в темную камеру, которая автоматически закрывается подъемной дверью.

Внутри темной камеры мышь подвергают электрошоку через лапки током 1 мА в течение 1,0 с. Мышей делят затем на две группы: одна группа за 5 мин до тренировочных испытаний получает 2 мг/кт скопо- ламина. а другой вводят физиологический раствор.

Через 24 ч мышей снова помещают в освещаемую камеру. Большинство мышей, которые не получали скополамин до трени- ровочных испытаний, запоминают опыт боли и не входят в темную камеру снова в течение достаточного промежутка времени (время задержки около 280-300 с).

Мыши, получившие скополамин на 24 ч раньше, входят в камеру гораздо быстрее.

В данном эксперименте мышей предварительно обрабатывают в течение трех дней испытуемыми соединениями, на четвертый день проводят тренировку, на пятый-испы- тание. В дни тренировки и исследования контрольные соединения применяют за 60 мин до проведения тренировки или испытания. Контрольных животных только транспортируют. Определяют .время задержки для группы I, не получившей ни скополами- на, ни испытуемых соединений; для группы II, получившей только скополамин, и для группы III, получившей как скополамин, так и испытуемые соединения. Полученные ре- зультаты приведены в таблице.

Предлагаемые сложные эфиры аминокислот относятся к слаботоксичным соединениям. МЭО для устранения амнезии, индуцированной скополамином. сог.т эвляет 0.3-30 мг/кг.

Формула изобретения

Способ получения сложных эфиров аминокислот общей формулы

R-(CH2)n-CH(COOR2)-NH-CHR-CO-NR5 CHR4-COOR3, где

R - фенил,

R1 - низший алкил;

R2 - С2 Са-алкил, который может быть замещен Сз Сб-циклоалкилом,

R,3 - содержащие до 9 атомов углерода элкинил, алкенил. Ci-Cp-алкил,

причем алкил может быть замещен фенилом;

R4 и RS вместе с группой CHN, к которой они присоединены - 2-азобицикло-(3.3.0)- октан,

или их физиологически совместимых солей, отличающийся тем, что соединение общей формулы

R-(CH2)n-CH(COOR2)-NH-CHR-CO-NRs CHR4-COOQ3,

подвергают взаимодействию с соединением общей формулы QiY,

где Оз - водород;

Q2 имеет значения R2, кроме водорода;

QI имеет значения Ra, кроме водорода;

Y -оксигруппа, галоид, метилсульфони- локсигруппа, -N-N-;

R, Ri, R4, RS имеют указанные значения.

Использование: в медицине. Сущность изобретения: получение сложных эфиров аминокислот общей формулы Р-(СНа)п- CH(CQOR2) - NH-C.H P -CO-N R5-CH R4- COOR3, где n 2; R - фенил, Ri - низший алкил. R2 С2-Са-алкил, который может быть замещен Сз-Св-Циклоалкилом, Rs - содержащие до 9 атомов углерода алкинил, алке- нил, Сч-Сд-алкил, который м.б. замещен фенилом; R4 и Rs вместе с группой CHN, 2-азобицикло-(3.3,0)-октан, или их физиологически совместимых солей. Реагент I соедине ние общей формулы R(CH2)rr CH(COOQ2)-NH-C-HRi-CO-N R5 -CH RA СОООз, где ,, кроме водорода. Реагент 2 соединение общей формулы Q11( где Q-I-РЗ, кроме водорода, Y - оксигруппа, галоид, метилсульфонилок- сигруппа, , R, R, Rs имеют указанные значения...1 табл.