Способ получения 16, 17-ацетальзамещенных прегнан-21- овой кислоты в виде их стереоизомеров Советский патент 1993 года по МПК C07J5/00 

выпаривают и повторно очищают хроматог- рафированием на колонке из сефадекса LH- 20 (72 6,3 см) с использованием смеси гептана, хлороформа, этанола с соотношением 20:20:1 в качестве подвижной фазы. Фракцию 5130-5745 мл собирают и выпаривают с выходом 35 мг метил-(22Я)-16 а, 17 а -бутилидендиокси-6 а, 9 а -дифтор-11 /

-окси-3,20-диоксопрегнан-1,4-диен-21-оата. Чистоту определяют посредством высоко- эффективной жидкостной хроматографии, и она равна 95,5%, Температура плавления 223-35°С. Молекулярный вес равен 494.

П р и м е р 3. Раствор 0.45 г ацетата меди (II) в 100 мл абсолютного этанола добавляют к раствору 2,0 г (22R)-16 a, 17 а-бутилиден- диокси-6а, 9 а -дифтор-11/3, 21-диоксипрег- нан-1,4-диен-3,20-диона в 300 мл абсолютного этзнола и подвергают взаимодействию, после чего выделяют образовав- шийся продукт так, как описано в примере 1, и выход составляет 2,0 г (22R)-16 , 17

-бутилидендиокси-6 а, 9 а -дифтор-11/3 -ок- си-3,20-диоксопрегнан-1,4-диен-21-ал-этил полуацеталя.

Этот альдегид подвергают взаимодействию в условиях, описанных в примере 1, заменив метанол этанолом. Выход 1,77 г неочищенного продукта, который очищают на колонке из сефадекса LH-20 (76,5 х 6,3 см) с использованием смеси гептана, хлороформа, этанола с соотношением 20:20:1 в качестве подвижной фазы. Фракцию 2655-3150 мл собирают и выпаривают, После рекристаллизации остатка из этанола получают 1,03 г этил-(22Р)-16 а, 17 «-бутилидендиокси-6 а, 9 а -дифтор-11 /3 -окси-3.20-диоксоп- регнан-1,4-диен-21-оата. Чистота, определенная высокоэффективной жидкостной хроматографией, равна 97%. Темпе- ратура плавления 227-235°С. а о +67,2 (с 0,180; CH2CI2). Молекулярный вес равен 508.

П риме р 4. Раствор 0.35 г ацетата меди (II) в 150 мл пропанола добавляют к раствору 0,80 r(22R)-16«, 17«-бутилидендиокси-6а, 9а-дифтор-11 /3, 21-диоксипрегнан-1,4-ди- ен-3,20-диона в 100 мл пропанола и подвергают взаимодействию. Образовавшийся продукт выделяюттак. как описано в приме- ре 1, при этом выход составляет 0,95 r(22R)- 16 от, М а -бутилидендиокси-6 а, % а.

-дифтор-11 /3 -окси-3,20-диоксопрегнан-1,4- диен-21-ал-пропилполуацетал,я.

Этот альдегид подвергают взаимодей- ствию в условиях, описанных в примере 1, заменив метанол пропанолом. Неочищенный продукт очищают на колонке из сефадекса LH-20 (76,5 6.3 см) с использованием

гептана, хлороформа, этанола с соотношением 20:20:1 в качестве подвижной фазы. Фракцию 3450-3990 мл собирают и выпаривают. Остаток осаждают из смеси метилен- хлорида и петролейного эфира с выходом 0,38 г н-пропил-(22Н)-16 «, 17 а-бутилидендиокси-6 а. 9 а -дифтор-11 /3 -окси-3,20-ди- оксопрегнан-1,4-диен-21-оата. Чистота, определенная посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии, равна 98,9%. Температура плавления 192-195°С. ,4° (с 0,256; CH2CI2). Молекулярный вес 522.

П р и м е р 5. Раствор 0.45 ацетата меди (II) в 150 мл метанола добавляют к раствору 1,Or(22R)-16al 17а-бутилидендиокси-6 7, 9 сг-фтор-11 /3, 21-диоксипрегнан-1,4-диен- 3,20-диона в 150 мл метанола и подвергают взаимодействию. Образовавшийся продукт выделяют так. как описано в примере 1. Этот продукт растворяют в 15 мл изопропа- нола и выпаривают. Эту процедуру повторяют дважды, в результате чего получают 1.2 г (22R)-16 a, 17 а -бутилидендиокси-6 а 9 а

-дифтор-11 /3 -окси-3.20-диоксопрегкзн-1,4- диен-21-зл-пропилполуацеталя.

Этот альдегид подвергают озаимсдец- ствию в условиях, описанных в примере 1, заменив метанол изопропанолом. Неочищенный продукт очищают на колонке из се- фадекса LH-20 (71.5- 6,3 см) с использованием хлороформа в качестве подвижной фазы. Фракцию 1845-2100 мг, собирают и выпаривают с образованием 0,12 г твердого вещества, которое осаждают из смеси метиленхлорида и петролейнсго эфи- ра. Выход составляет 0,41 г изопропил- (22R)-16 a. 17 а -бутилидендиокси-6 п. да

-дифтор-1-1 /3 -окси-3,20-диоксопрегнан-1.4- диен-21-оата. Чистота, определенная посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии 96,5%. Температура плавления. 198-210°С. +62.0 (0.292: CH2CI2). Молекулярный вес равен 522.

П р и м е р 6. Раствор 55 мг ацетата меди (II) в 25 мл метанола добавляют к раствору 200 мг (22R)-16a, 17« -бутилидендиокси-ба 9а -дифтор-11/3 , 21-диоксипрегнан-1,4-ди- ен-3,20-диона в 25 мл метанола и подвергают взаимодействию. Образовавшийся продукт выделяюттак, как описано в примере 1, при этом выход 250 мл (22R)-16 а, 17а

-бутилидендиокси-ба , 9 а -дифтор-11 /3 -ок- си-3.20-диоксопрегнан-1,4-диен-21-ал-мет- илполуацеталя.

Этот альдегид подвергают взаимодействию в условиях, описанных в примере 1, заменив метанол бутанолом. Неочищенный продукт очищают на колонке из сефадекса

LH-20 (78,5-2,5 см) с использованием смеси гептана, хлороформа, этанола с соотношением 20:20:1 в качестве подвижной фазы. Фракцию 610-674 мл собирают, выпаривают и осаждают из смеси метиленхлорида и петролейного эфира с образованием 76 мг бутил-{22R)-16 а, 17«-бутилидендиокси-6 а, 9« -дифтор-11 /5 -ркси-3,20-диоксопрегнан- 1,4-диен-21-оата.

Фармакология.

Противовоспалительный эффект.

Избирательность в отношении противовоспалительного действия на месте применения в легких было исследовано в моделирующей системе у крысы после внут- рибронхиального введения глюкокортико- стероида.

Введение шариком сефадекса в легкие крыс приводит к бронхиальному и альвеолярному воспалению. Это вызывает интер- стициаяьный отек легких, который увеличивает вес легких, поэтому воспаление можно измерять в виде увеличения веса легких по сравнению с контрольной группой, которой было произведено вливание носителя. Образованию отека легких можно противодействовать путем предварительного лечения глюкокортикостероидами. предпочтительно в результате внутриброн- хиального введения или ингаляции. В идеальном случае противовоспалительное действие должно быть достигнуто только в месте применения глюкокортикостериода в легких, а не за пределами этого участка, так как это при продолжительном лечении может привести к ограничивающим лечение системным побочным явлениям.

Дифференциация между действием глюкокортикостероида в обработанном участке легкого и за пределами этого участка была охарактеризована в следующем протоколе испытаний. Крыс - Dawley (225 г) слегка анестезировали простым эфиром, после чего им вводили испытуемый препарат глюкокортикостероида в объеме 0,5 мг/кг только в левую долю легкого. Это достигалось путем введения тонкого и изогнутого стального катетера через рот и трахею в левую долю легкого (выбор этого режима введения только в левую долю был подвержен отдельными экспериментами с использованием сини Эванса, в результате выполнения которых было обнаружено, что более 95% введенного вещества находилось в левой доли и менее 5% - в правой доле легкого). Через тридцать мин вводили суспензию сефадекса в объеме 1 мл/мг в трахею непосредственно над бифуркацией, так что суспензия достигла как левой, так и

правой долей легких. Через двадцать часов крыс убивали, после чего у них отсекали левое и правое легкое и взвешивали отдельно. Также регистрировали вес тимуса. Контрольным группам вводили носитель вместо глюкокортикостероидного препарата и физиологический раствор вместо суспензии сефадекса для определения веса, не защищенного препаратом отека под действием

сефадекса, и веса нормального легкого. Для каждого глюкокортикостероидного препарата испытывали, по крайней мере, 3 дозы в диапазоне 0,01-10 мг/кг и в отношении каждой 6 параллелей/дозу. Глюкокортикостероиды суспендировали в носителе CMC-Na 0.75%, твине 80 0,04% и 0,7% NaCI, добавляемой до 100%,

При строго локальном противовоспалительном действии в случае заболеваний ды- хательных путей идеальным профилем соединения является такой профиль, который должен противодействовать воспалению в подвергаемой локальному лечению

левой доли легкого, а не правой доли легкого, куда сначала попадает глюкокортикосте- роид по большому кругу кровообращения (после поглощения из левого легкого). Соог ношение между требуемой средней эффективной дозой (уменьшающей отек на 50%) в правой и левой долях легкого может использоваться в качестве параметра для оценки избирательной активности на месте применения. Для идеального глюкокортикостероида это соотношение избирательности должно быть высоким.

Результаты выполненных испытаний приведены в таблице, где в верхней части представлены действия достигаемые ранее

известными типами глюкокортикостерои- дов. Будезонид не обеспечивает какой-либо избирательности для места применения в легком, так как требуемая средняя эффективная доза для левой и правой долей легкого была почти одинаковой (соотношение избирательности 1,5). В случае самой высокой испытанной дозы (0,3 мг/кг) будесонид уменьшает вес тимуса на 22% (р 0,01). Ранее известный глюкокортикостериоид

FCB достигает некоторой избирательности, так как уменьшение отека правой доли легкого требует в 2-3 раза большей дозы по сравнению с необходимой дозой для торможения отека левого легкого.

Новые соединения по этому изобретению характеризуются гораздо лучшей избирательностью 8 отношении активности, связанной с подвергнутой местному лечению лезой доли легкого. Соотношение избирательности достигает 6 или даже большего

числа величин. С помощью этих соединений можно препятствовать развитию отека легкого, по меньшей мере, на 60% без какого- либо значительного влияния на отек правой доли легкого. При дозе 10 мг/кг соединения в соответствии с примерами 1 и 5 вообще не влияют на вес тимуса, в то время как соединение по примеру 3 при той же дозе вызывает незначительное уменьшение веса тимуса (на 15%, р 0,05).

Новые соединения обладают более высокой противовоспалительной активностью на месте применения (значение средней эффек- тивной дозы в левой доле легкого 5 мг/кг) по сравнению с низкой активностью, продемонстрированной для препарата FCB (10 мг/кг).

Действия испытанных глюкокортикостероидов в модели сефадекса.

Результаты приведены по отношению к соответствующей

контрольной группе, которой вводился сефадекс.

Средняя эффективная доза - требуемая доза глюкокортикостероида, необходимая для уменьшения отека на 50%.

Формула изобретения Способ получения 16, 17-ацетальзаме- щенных прегнан-21-оновой кислоты общей формулы 1

:::D

:н сн сн

223

в виде их стереоизомеров, где RI представляет прямолинейный или разветвленный Ci - С4-злкил, отличающийся тем, что осуществляют окисление альдегида формулы

Редактор

Техред М.Моргентал

3412

Тираж НПО Поиск Роспатента 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Подп

JJD с

н :к сн сн

223

в виде его полуацеталя в присутствии цианид-ионов и спирта формулы

RiOH, где RI имеет вышеуказанные значения.

Корректор Е. Папп

., 4/5

Подписное