СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА КАТАЛАЗЫ Советский патент 1967 года по МПК C12N9/04 C12N9/08 

Известен способ получения ферментного препарата каталазы из культуральной жидкости плесневого гриба Penicillium vitale PidopL et Bilai, который продуцирует каталазу. По такому способу каталазу выделяют путем дробного осаждения спиртом, и получаемую каталазу, содержащую примесь глюкозооксидазы, также продуцируют плесневым грибом.

Предлагаемый способ позволяет получить каталазу, не содержащую нримесь глюкозооксидазы.

С этой целью каталазу адсорбируют на окиси алюминия из культуральной жидкости гриба Penicillium vitale Pidopl. et Bilai при рП 3,5-4,2, затем отделяют окись алюминия с адсорбированной на ней каталазой, например, фильтрацией, и выделяют каталазу одним из известных способов, например элюцией и осаждением спиртом.

Из культуральной жидкости, оставшейся после отделения окиси алюминия с адсорбированной на ней каталазой, можно выделить ферментный препарат глюкозооксидазы одним из известных способов.

Способ получения ферментного препарата каталазы заключается в следующем.

окись алюминия в два приема с интервалом 15 мин при перемешивании из расчета 10 вес. % на объем жидкости.

При рН культуральной жидкости 3,5-4,2 каталаза сорбируется окисью алюминия, которая вместе с каталазой отделяется от культуральной жидкости фильтрацией. Фильтрат, содержащий глюкозооксидазу, используют для извлечения ее одним из известных способов.

Каталазу, адсорбированную на окиси алюминия, выделяют, например, элюцией. Элюцию каталазы осуществляют 0,1 м фосфатным буфером с рН, равным 6,8-7,0, дробно, тремя порциями элюэнта, при интенсивном перемешивании. Первая порция составляет 80 об. % от веса окиси алюминия, две последующие - 40 об. %.

Окись алюминия отделяют фильтрованием и регенерируют. Из элюэнта каталазу осаждают

равным объемом изопропилового спирта при комнатной температуре. Осадок каталазы от спиртового маточника отделяют центрифугированием, после чего препарат направляют на вакуум-сушку.

Активность ферментных препаратов каталазы 200000-600000 ед/г. Выход фермента каталазы составляет 80-85%. рН от 2,5 до 9,0, имеет высокую начальную так называемый «взрывскорость действия ной эффект. Предмет изоб ретения 1. Способ получения ферментного препарата каталазы из культуральной жидкости плесневого гриба Penicillium vitale Pidopl. et Bilai, являющегося продуцентом каталазы, отличающийся тем, что, с целью получения каталазы, не содержащей примесь глюкозооксидазы, продуцируемой одновременно с каталазой этим же грибом, каталазу адсорбируют на окиси алюминия при рН культуральной жидкости 3,5-4,2, затем отделяют окись алюминия с адсорбированной на ней каталазой, например фильтрацией, и последнюю выделяют одним из известных способов, например элюцией и осаждением спиртом. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что, i целью получения ферментного препарата глюкозооксидазы, последнюю выделяют из культуральной жидкости (фильтрата), оставшейся после отделения окиси алюминия с адсорбированной на ней каталазой, одним из известных способов.