СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА ГЛЮКОЗООКСИДАЗЫ Советский патент 1968 года по МПК C12N9/04 

Известен способ получения ферментного препарата глюкозооксидазы путем подготовки посевного материала плесневого гриба Аспергиллюс Нигер - продуцента этого препарата с последующим его культивированием в глубинных условиях на мелассе, отделения полученного мицелия гриба от культуральной жидкости и выделения глюкозооксидазы из мицелия одним из известных способов, например экстрагированием водой и осаждением из полученной водной вытяжки фермента изопропиловым спиртом.

Для упрощения процесса подготовки посевного материала и повышения активности полученного препарата глюкозооксидазы предложено посевной материал выращивать на синтетической питательной среде, содержащей iJ/a глюкозы или сахарозы с добавлением к ней кукурузного экстракта. Процесс культивирования на мелассе вести при рН не ниже 6,0. Освобожденную от мицелия культуральную жидкость возвращают на стадию культивирования посевного материала.

Способ заключается в следующем.

Споры плесневого гриба Аспергиллюс Нигер щтамма Л В проращивают глубинно в колбах на синтетичеекой питательной среде, содержащей IVo глюкозы (или сахарозы), 0,5% кукурузного экстракта и минеральные еоли. Полученную культуру высевают на такую же

среду в посевной ферментер в количестве 1,5- 2Vc а спустя 18-20 час культуру в количестве 1,(; передают в основной ферментер, содержащий мелассу, разведенную водопроводной водой до плотности 3-6° Блг с рН не ниже 6,0 и свободную от минерального фосфора.

Культивировалие гриба ведут в течение 20- 24 час при 27° С и непрерывном продувании 3 объема воздуха на 1 объем среды в минуту. После этого отделяют мицелий гриба от культуральной жидкости. Последнюю доводлт до рН 6,0, стерилизуют и возвращают на ста дию культивирования посевного материала.

Мицелий гриба высущивают и из него экстрагируют водой . Экстракт осаждают тремя объемами изопропилового спирта. Полученный ферментный препарат, кроме глюкозооксидазы, содержит значительное количество каталазы и инвертазы.

Активность препарата (QOi) составляет 4000. Глюкозооксидазная активность в пересчете на 1 л среды составляет 480000 мкл O./oo.

25

Предмет изобретения

Люс Нигер-продуцента этого препарата, глубинного культивирования иолученной культуры по,севного материала на мелаесе, отделения полученного мицелия гриба от культуральной жидкости с последующим выделением из мкцелия глюкозооксидазы одним из известных способов, например экстрагированием водой и осаждением из полученной водной вытяжки фермента изопропиловым спиртом, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса

подготовки посевного материала и ПовыЩения активности иолученного препарата глюкозооксидазы, выращивают посевной материал на синтетической питательной среде, содержащей 1э/(, глюкозы или сахарозы с добавлением к ней кукурузного экстракта, а культивирование на мелассе осуществляют при рН не ниже 6,0, при этом освобожденную от мицелия культуральную жидкость возвращают на стадию культивирования посевного материала.