МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ б-МЕТИЛ-ДЗ.Э-ЭРГОЛЕН-В-КАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ Советский патент 1967 года по МПК C12P17/18 

Предложен микробиологический способ получения 6-метил-А® -эрголен-8-карбоновой кислоты. Способ заключается в том, что фильтрат культуры Claviceps paspali Stevens el Hall NRRL 3080 пропускают через иопообменные смолы, например Дауекс 50 или Амберлит ИР 120. 6-Метил-Л -эрголен-8-карбоновую кислоту элюируют со смолы 5%-ным раствором аммиака и кристаллизуют путем упаривания элюата и доведения значения рИ раствора до его изоэлектрической точки. Выход продукта 80%.

Полученное соединение является новым и может найти применение в качестве промежуточного продукта в синтезе физиологически активных веществ.

Пример 1. б-Метил-Д -эрголен-8-карбоновая кислота.

5 л фильтрата культуры нового рода Claviceps paspali Stevens et Hall с общим содержанием производны.х эрголина приблизительно 500 мг/л (в отношении молекулярного веса 300) и значением рН 5,6 колориметрическим путем фильтруют через взмученную водой колонну, содержащую 500 г Амберлита 1R 120 (форма П-|-, диаметр колонны 2,8 см, высота 115 СЛ1). Проходная скорость составляет 500 мл/час. После промывки колонны 1 л воды извлекают б-метил-Д - -эрголен-8-карбоновую лслоту 5%-пым аммиаком. Собранный в фракциях по 500 мл продукт исследуют на содержание производных эрголина флуоресценцией в ульграфиолетовом свете и цветной реакцией по Келлеру (раствор РеС1з в ледяной уксусной кислоте и концентрированная HoS04). Первые четыре фракции (всего 2 л) упаривают при 13 Л1М торра и при температуре ванны в до 500 мл, регулируют значение рН нри помощи ледяной уксусной кнслоты до 5,5, отфильтровывают от осадившейся смолы (цветная реакция по Келлеру дает отрицательный результат), концентрируют фильтрат в вакууме прпблизительно до объема 25 мл, прпбавляют 20 мл метанола, дают раствору вскипеть и оставляют OTCTaiiваться несколько часов при . Выкристаллизованную кислоту после отфильтровывания промывают водой ц метанолом п сущат при в течение 2 нас в вакууме. Пз последующпх 7 фракцпй после такой же обработки можно получить дальнейшее количество кристаллизованной б-мстилизоваииой 6-метплД® -эрголен-8-карбоновой кислоты.

Для очищения сырой кислоты объединяют кристаллизовапнош продукты, растворяют их в 5%-ном спиртовом аммиаке; раствор после фильтрации регулируют до значения рП 5,5 двухнормальной уксусной кислотой ц нагревают его в водяной бане. Кристаллизованную кислоту через несколько часов отфильтровывают, промывают водой н метанолом и сушат в вакууме при . Т. пл. 243-245°С (с разложением), HD (ОД н. NaOH). Цветная реакция по Келлеру, ван Урк и Эрлиху такая же, как при лнзергиновой киелоте; тонкоелойная хроматограмма на кремневом геле ео епиртом (25%-ным аммиаком 9: 1) в качеетве жидкости имеет значение Rf 0,4-0,45. Пятно принимает при опрыскивании реактивом Эрлиха синий оттенок. Ультрафиолетовый епектр: макс., мм 0,1 н. NaOH log 8 217; 5/4,56; 282/3,79; 292/3,74; минимум при 252 мм. Р1нфракрасный спектр: характерные полосы при 3340, 2275 (широко), 1674 и 1580 (в нуиоле). Получен хлоргидрат из б-метил-Д - -эрголен-8-карбоновой кислоты с разбавленной соляной кислотой; гидрохлорид иерекрнеталлизовывают из воды и разбавленной соляной кислоты; т. пл. 257-259°С (с разложением); аЬ --176° (в 0,1 н. НС1). Ультрафиолетовый спектр такой же, как у 6-метил-А® -эрголен-8-карбоновой кислоты. Инфракрасный епектр: характерные полосы при 3380, 2600, 1708, 1660 (слабо) и 1606 (слабо) (в нуиоле). 6-М е т и -э р г о л е н-8-к арбоновая кислота и 3 X л о р г и д р а т а. К суспензии из 100 мг гидрохлорида в 5 мл воды, разл1ешивая, прибавляют по каплям 2 н. раствор бикарбоната натрия до полного растворения субстанции. Затем значение рН регулируют до 5,5, дают закипеть, через нееколько часов отфильтровывают кристаллизованиую кислоту, промывают ее водой и метанолом и высушивают в вакууме при , т. пл. 24-5-247 С (с разложением), -208 (0,1 н. NaOH), тонкоелойная хроматограмма на кремневом геле со спиртом (25%-ным аммиаком при 9:1) одинакова; значение Rf 0,45. Нятно в ультрафиолетовом свете практически не проявляет флуоресценции н принимает при опрыскивании реактивом Эрлиха синий оттенок. Нример 2. 6-Метил-Д -эрголен-8карбоновая кислота. Для получения 6-метил-Д -зрголен-8-карбоновой кислоты из фильтрата культуры нового рода поступают, как описано в примере 1, нрнменяя, однако, вместо Амберлита IP 120 катионообменник Дауекс 50. Получают кристаллизованную сырую 6-метил-Д -эрголен-8-карбоновую кислоту с указанными в примере 1 свойствами. Предмет изобретения Микробиологический способ получения 6мeтил-Д® -эрголен-8-карбоновой кислоты, отличающийся тем, что культуру Clavieeps paspali Stevens et Hall NRRL 3080 нронускают через кислые ионообменные емолы е последующей элюацией кислоты 5%-ным раствором аммиака и кристаллизацией ее путем упаривания элюата и доведения значения рН раствора до его изоэлектрической точки.