Известны способы серологической идентификации и обнаружения холерных вибрионов путем постановки реакции агглютинации на стекле с холерными сыворотками, например, при помощи микроскопии в темном поле.
Предлагаемый способ отличается от известных тем, что готовят серийные разведения сыворотки до титра и учитывают результаты непосредственно после соединения антигена с антителом при помощи фазово-контрастной микроскопии по образованию конгломератов. Это позволяет упростить методику проведения реакции и сократить время учета.
Для серологической идентификации и обнаружения холерных вибрионов по предлагаемому способу сначала готовят серийные разведения холерных агглютинирующих сывороток в 1%-ной пептонной воде, начиная с разведения 1 : 50 до титра сыворотки (рН 7, 4-8,0). Агаровую 10-12-часовую культуру вибриона эмульгируют в 1%-ной пептонной воде до концентрации 1-1,5 млрд микробных тел Е I мл по оптическому стандарту. Затем на обезжиренное предметное стекло наносят каплю пептонной воды (контроль) или каплю одного из разведенний сыворотки (опыт). Каплю эмульсии -исследуемого вибриона смешивают на стекле с первой каплей, накрывают покровным стеклом и рассматривают в фазово-контрастном микроскопе с сорокакратным увеличением от 5 сек до 5 мин. В контрольном препарате наблюдают характерную подвижность значительной части вибрионов, а в опытных препаратах - явления агглютинации и иммобилизации вибрионов. Оценку интенсивности реакции производят по образованию конгломератов. Реакция агглютинации считается отрицательной в случае, когда происходят медленное (4-5 мин) образование небольших рыхлых подвижных конгломератов, иммобилизация основной массы вибрионов, лежащих изолированно, и имеется много подвижных микробов. При положительной реакции агглютинации конгломераты образуются быстрее и получаются более компактными, подвижных микробов мало или совсем нет, движение их замедленно.
Предмет изобретения
Способ серологической индентификации и обнаружения холерных вибрионов путем постановки реакции агглютинации на стекле с холерными сыворотками, отличающийся тем, что, с целью упрощения реакции и сокращения времени ее учета, готовят серийные разведения сыворотки до титра и учитывают результат непосредственно после соединения антигена с антителом при помощи фазовоконтрастной микроскопии по образованию конгломератов.
