Штамм бактерий VIвRIо NaG 68 серовара, используемый для получения монорецепторной диагностической сыворотки Советский патент 1990 года по МПК C12N1/20 C12N1/20 C12R1/63 

ю ю

со

Наобретпнпе относится к медицине,- кой микробиологии и может быть ис .. пользовано для серологической идентификации патогенных вибрионов,

Штамм Vibrio Nag 68 серовара депонирован в коллекции музея живых культур Всесоюзного научно-исследовательского противочумного института Микроб под номером КМ-15 (6930 и характеризуется следующими признаками и свойствами,

Культурально-морфологические признаки „

Подвижные, слегка изогнутые палочки, спор и капсул не образуют, грам- отрицательные.

Иа плотном агаре образует гладкие округлые, прозрачные, плоско-вьтук- лые с ро вным краем колонии, диаметром 2-2,5 мм,

В жидких средах вызывает помутнение, образует пленку,

Физиолого биохимические свойства ОксидазЬположительный относится -к 1 группе Хейберга, Ферментирует глюкозу и маннит до кислоты без газа не ферментирует инозит и салицин, образует индол и сероводород, имеет де карбрксилазу лизина и орнитина и не имеет дигидролазы аргинина. Не растет в 1%-ной пептонной воде с добйвл нием 7 и 10% хлорида натрия. Штамм КМ-15 (6931) агглютинируется диагностическими холерными сывороткЙми 0,ЕО в разведении 1:100 и Огава, в разведении 1;200, Не агглютинируется диагностическими вибрионными сыворотка- ми 2-67 сероварово Не лизируется фагами С, Эльтор, ХДФ 3,4,5, ТЭПВ 1-7.

Обладает специфическим 0-анти- , геном При иммунизации животных 0-антигеном данного штамма происходит образование специфических антител .

Использование штамма иллюстрируется следующими примером.

И р и м е РО Для приготовления моноварной сыворотки используют О-антиген штамма Vibrio Nag КМ-15 (6934)68 серовара.

Культуру штамма высевают в 1%-ну 0 пептонную 7,б и вырал-,0, .л. . у -

щивают при в течение 4 ч, затем пересевают на свежескошенный агар, содержащий настрй сердечной мышцы, ВтмПИ Заказ 2029

0

5

5

0 с

рН 7,6. Посевы инкубируют при в течение ч, С поверхности агара смывают культуру физиологическим раствором рН 7,3, Полученную микроб- , ную взвесь кипятят при в течение 2 ч с момента закипания в 10%-ном растворе хлорида натрия. Затем взвесь дважды отмьшают физиологическим раст- Q вором рН 7,2Jпутем центрифугирования. После контроля на стерильность микробную взвесь используют для иммунизации кроликов о

Кроликов породы шиншилла массой 2-2,5 кг иммунизируют трехкратно с трехдневными интервалами: первую и вторую инъекции делают подкожно по 20 млрд м,т,, третью внутривенно - 5 млрд.м„т о На седьмые сутки после последней инъекции кроликов обескровливают. Сьшоротку консервируют путем добавления мертиолата натрия 1:10000. Титры сывороток составляют 1:51200, После адсорбции гетерологичные анти-. тела полностью удаляются. За диагностический титр принято разведение сыворотки 1:400(,

Сьюоротку применяют в реакции агглютинации с вибрионами 2-67 Серова- ров.

Реакцию агглютинации ставят объемным методом в пробирках, сьторотку используют в одном разведении - диагностическом титре

Для приготовления сывороток и взвесей культур используют физиоло

гический раствор рН 7,2„

Положительной считают реакцию с оценкой 2-4 +.

Сьторотка .против вибрионов 68 серовара строго специфична и активна. Положительная реакция отмечалась только с гомологичным штаммом.

Использование штамма Vitrio Nag . 68 серовара позволяет получать новую специфическую сьшоротку для диагностики кишечных заболеваний, что позволит в .свою очередь расширить спектр дифференциальных патогенных вибрионов.

Формула изобретен ия

55

Штамм бактерий Vibrio Nag 68 серовара КМ-15 (6931),используемый для получения монорецепторной диагностической сыворотки, Тираж 492 Подписное

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для серологической идентификации патогенных вибрионов.Штамм Vibtio Nag депонирован в коллекции музея живых культур института Микроб под номером КМ - 15 (6931,) 68 серовара. Убитую нагреванием суспен зию культуры используют для иммунизации кроликов по схеме. Получают сыворотку с титром 1:51200. За диагностический титр принято разведение сыворотки 1:400. Сыворотка против вибрионов 68 серовара строго специфична и активна.