Штамм бактерий VIвRIо NaG серовара 079, используемый для приготовления моноварной диагностической сыворотки Советский патент 1991 года по МПК C12N1/20 A61K39/106 A61K39/395 

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов.

Целью изобретения является штамм Vibrio Nag 079 серовара, пригодный для приготовления моноварной диагностической сыворотки для идентификации патогенных вибрионов.

Штамм бактерий Vibrio Nag 079 серовара депонирован в музее живых культур Всесоюзного научно-исследовательского противочумного института Микроб под номером КМ-49 (203).

Штамм Vibrio Nag KM-49 (203) обладает всеми свойствами, характерными для рода Вибрио. Морфологические признаки. На плотном агаре образует гладкие круглые-с ровным краем прозрачные колонии диаметром 2-2,5 мм. В жидких питательных средах вызывает равномерное помутнение, образует на поверхности пленку.

Физиологические свойства. Оксидазо- положительный, ферментирует глюкозу и маннит(до кислоты без газа), не ферментирует инозит и салицин, продуцирует индол и сероводород, принадлежит к I группе Хей- берга, не фосфоресцирует, дает феномен тяжа, декарбоксилирует лизин и орнитин и не дигидрирует аргинин, не растет в 1 % пептонной воде с добавлением 7 и 10% хлорида натрия. Штамм Vibrio Nag KM-40 (203) агглютинируется холерной диагностической 0-сывороткой в разведении 1:100 и не агглютинируется холерными диагностическими сыворотками Инаба, Огава, РО. Не лизируется холерными диагностическими фагами С, эльтор, ХДФ 3, 3, 5 и бактериофагами ТЭПВ 1-7.

Обладает специфическим 0-антигеном. При иммунизации животных 0-антигеном данного штамма происходит образование специфических антител.

со

с

о о

00

со

00

ч

Пример 1. Для приготовления моно- трной дна иостической сыворотки 079 се- ровара используют 0-антиген штамма Vibrio Nag KM-49 (203). Культуру штамма высевают в 1 %-ную пептонную воду, рН 7,6 и выращивают при 37°С в течение 4 ч, затем пересевают на свежескошенный агар, содержащий настой сердечной мышцы, рН 7,6. Посевы инкубируют при 37°С в течение 18-20 ч. С поверхности агара культуру смывают физиологическим раствором рН 7,2. Полученную микробную взвесь кипятят при 100°С в течение 2 ч с момента закипания в 10%-ном растворе хлорида натрия. Затем взвесь дважды отмывают физиологическим раствором рН 7,2 путем центрифугирования. После контроля на специфическую стерильность микробную взвесь испол;,уют для иммунизации животных.

Пример 2. Кроликов породы шиншилла весом 2-2,5 кг иммунизируют трехкратно с трехдневными интервалами: первую и вторую инъекции делают подкож- нэ по 20 млдр. м.т,, третью - внутривенно по 5 млрд м.т. На седьмые сутки после последней иньекции кроликов обескровливают. Сыворотку консервируют путем добавления мертиолата натрия 1:10000, Титры

.ыворогок составляют 1:3200. За диагностический титр принято разведение 1:400.

Сыворотку применяют в реакции агглютинации с вибрионами, выделяемыми от

больных острыми кишечными заболеваниями людей. Реакцию агглютинации ставят объемным методом в пробирках, сыворотку используют в одном разведении -диагностическом титре. Для разведения сывороток

и приготовления взвесей культур используют физиологический раствор рН 7,2. Положительной считают реакцию с оценкой 2-4 +.

Сыворотка против вибрионов нового

079 серовара строго специфична и высокоактивна. Положительная реакция отмечается только с вибрионами 079 серовара.

Данная сыворотка имеет важное практическое значение при микробиологической

диагностике кишечных заболеваний. Она позволяет более широко дифференцировать патогенные вибрионы.

Формула изобретения Штамм бактерий Vibrio Nag KM-49 (203)

серовара 079, используемый для приготов; ления моноварной диагностической сыворотки.

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов. Целью изобретения является штамм VIBRIO NAG 079 серовара, служащий для приготовления моноварной диагностической сыворотки для идентификации патогенных вибрионов. Штамм VIBRIO NAG KM - 49(203) 079 серовара обладает всеми морфологическими, культуральными и физиологическими свойствами характерными для рода VIBRIO. Штамм КМ - 49(203) обладает специфическим О-антигеном, при иммунизации животных образуются специфические антитела. Полученная сыворотка агглютинирует вибрионы только гомологичного 079 серовара и не реагирует с вибрионами гетерологичных сероваров.